張寶龍,趙子續,曲 木,唐子鵬,翟勝利
(天津現代晨輝科技集團有限公司,天津市水族動物功能性飼料企業重點實驗室,天津 301800)
杜氏鹽藻屬綠藻門(Chotorrhyta),綠藻綱(Chorophyta),團藻目(Volvocales),鹽藻科(Dunazeiallcea),嗜鹽,常見于海鹽田中。水體有時會因鹽藻的大量聚集而呈艷麗的粉紅色或紅色,因此,鹽藻又有了“粉紅湖”的稱號。鹽藻中蛋白質含量較高,其成分中必需氨基酸的含量占總氨基酸的37.20%,不飽和脂肪酸占總脂肪酸的50%以上,還含有多種維生素、甘油、多糖、膳食纖維、萜類物質、無機元素、微量元素等[1-3],其所富含的β-胡蘿卜素能促進水產動物體色提升,尤其是促進增紅,這可以很大程度地提升一些水產動物的觀賞性,提高其商業價值,同時β-胡蘿卜素也是一種天然的抗氧化劑[4],對提升動物體免疫力有著極大的促進作用。目前鹽藻作為國際上公認的天然β-胡蘿卜素來源,是水生動物的重要飼料添加劑之一。
錦鯉為觀賞魚的重要品類之一,因其體色絢麗、泳姿優美成為人們居家裝飾的常備選擇,也有人稱其為風水魚,其銷量也是逐年升高。隨著市場需求的加大,各種錦鯉集約化的養殖模式(工廠化循環水養殖模式、集裝箱循環水養殖模式等)也應運而生,但集約化程度的加大也會導致錦鯉出現體色退化、疾病頻發等情況,造成錦鯉商業價值大幅降低[5]。本試驗以紅白錦鯉為養殖對象,在飼料中添加不同水平的杜氏鹽藻,并測定相關生理生化指標,以期篩選出錦鯉飼料中適宜的杜氏鹽藻添加量,為生產實踐提供理論依據。
本試驗以紅白錦鯉(購自天津魚之悅觀賞魚養殖專業合作社)作為試驗對象,試驗在公司循環水實驗室內進行,箱體有效體積150 L。試驗所用錦鯉共計540尾,魚體經消毒后暫養7 d,暫養結束后將其隨機分成6 組,每個組3 個重復,每個重復30尾魚。每天8時和17時進行投喂,投喂量為體質量的3%~4%(視試驗魚吃食及體質量增長情況調整),養殖周期為8周。
本試驗在錦鯉基礎飼料(粗蛋白含量32.77%)中添加杜氏鹽藻粉,添加梯度分別為0 g/kg、4 g/kg、8 g/kg、16 g/kg、32 g/kg、64 g/kg,分別標記為Diet 1,Diet 2、Diet 3、Diet 4、Diet 5、Diet 6,用環模制粒機制成粒徑為2.5 mm 的顆粒飼料,陰涼處風干待用。
1.3.1 生長指標
試驗所測生長指標計算公式如下:

式中:Wt為終末體質量(g);W0為初始體質量(g);t為試驗天數(d);F為飼料攝入量干質量(g)。
1.3.2 體色指標
養殖試驗結束后,從每個平行中隨機挑選5條魚,用色差儀(CR-400)測定其體表紅斑處L*值、a*值、b*值。
1.3.3 抗氧化指標
養殖試驗結束后,從每個平行中隨機挑選9 條魚,用2 mL 無菌注射器尾靜脈抽血,每3 條魚的血液混成一個樣本,4℃靜置8 h 后,用轉建為4 000 r/min 離心機離心10 min,取上清制成血清樣本。抽血后低溫條件下解剖,取肝胰臟及腎臟將其剪碎,按組織:0.85%生理鹽水=1∶9 的比例勻漿,用轉建為4 000 r/min 離心機離心10 min,取上清制成10%組織勻漿液。試驗中T-SOD、CAT、MDA 指標測定試劑盒均購自南京建成生物科技研究所。
試驗數據采用SPSS 18.0 統計分析軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)檢驗各試驗組間差異顯著性,若差異達到顯著水平(P<0.05),則進行Duncan 氏法多重比較分析。試驗數據以平均值±標準差(mean±SD)表示。
試驗結果表明,紅白錦鯉的增質量率、特定生長率隨著杜氏鹽藻添加量增加均呈上升趨勢,64 g/kg 添加組最高,與16 g/kg、32 g/kg 添加組無顯著差異(P>0.05);餌料系數在32 g/kg 組最低,與16 g/kg、64 g/kg 添加組無顯著差異(P>0.05),但顯著低于其他各組(P<0.05)。

表1 飼料中添加杜氏鹽藻對紅白錦鯉生長性能的影響Tab.1 Effects of Dunaliella salina on growth performance of Cyprinus carpio
試驗結果表明:錦鯉體表L*值隨杜氏鹽藻含量的上升呈下降趨勢,而a*值、b*值有上升趨勢。L*的最低值及a*、b*的最高值均出現在64 g/kg 添加組,且均與0 g/kg 添加組差異顯著(P<0.05)。

表2 飼料中添加杜氏鹽藻對紅白錦鯉體色的影響Tab.2 Effects of Dunaliella salina on body color of Cyprinus carpio
試驗結果表明,當飼料中杜氏鹽藻添加量超過32 g/kg時,紅白錦鯉血清及組織中T-SOD 活性得到顯著提升(P<0.05),32 g/kg和64 g/kg添加組顯著高于其他各組(P<0.05)。

表3 飼料中添加杜氏鹽藻對紅白錦鯉T-SOD活性的影響Tab.3 Effects of Dunaliella salina on T-SOD activity of Cyprinus carpio(組織:U/mgprot;血清:U/mL)
試驗結果表明,紅白錦鯉血清及組織中CAT 活性隨杜氏鹽藻添加量升高而上升,其中32 g/kg 及64 g/kg 添加組肝胰臟、腎臟中CAT 活性顯著高于其他組(P<0.05),血清中CAT活性在32 g/kg組最高,且顯著高于其他各組(P<0.05)。

表4 飼料中添加杜氏鹽藻對紅白錦鯉CAT活性的影響Tab.4 Effects of Dunaliella salina on CAT activity of Cyprinus carpio(組織:U/mgprot;血清:U/mL)
試驗結果表明,紅白錦鯉血清及組織中MDA 活性隨杜氏鹽藻添加量升高而降低,其中32 g/kg及64 g/kg添加組肝胰臟、腎臟中CAT 活性顯著低于其他組(P<0.05),血清中MDA活性在32 g/kg組最低,且顯著低于其他各組(P<0.05)。

表5 飼料中添加雨生紅球藻對紅白錦鯉MDA含量的影響Tab.5 Effects of adding Haematococcus pluvialis to feed on MDA content of Cyprinus carpio(組織:U/mgprot;血清:U/mL)
本試驗中,當飼料中杜氏鹽藻添加量為32~64 g/kg時,紅白錦鯉增質量率、特定生長率最高,且在該組餌料系數顯著降低。方珍珍等的研究表明,鹽藻對紅白錦鯉的生長具有明顯促進作用,其適宜添加量為0.04%,這與本試驗結果一致且添加量也在同一水平。而楊育凱等在卵形鯧鲹、崔培在非洲王子魚中的研究結果相反,他們認為鹽藻的添加不能促進養殖對象的生長性能,這可能與生物種類及飼料配方有關。
目前,在飼料中添加色素被認為是改善養殖動物體色的最安全且有效的手段之一。本試驗中,杜氏鹽藻添加量為64 g/kg 時,紅白錦鯉體表紅斑處紅度值最高,表明杜氏鹽藻對紅白錦鯉體色有顯著的促進作用,而楊育凱等研究也發現,在卵形鯧鲹飼料中添加1%~1.6%的鹽藻可顯著提升其體色。相同的結果也見于錦鯉、金魚和血鸚鵡的研究中。另外,在方珍珍等對紅白錦鯉的體色研究中發現添加鹽藻的著色效果遠遠優于添加辣椒粉和使用溫度控制的方法,可能是因為鹽藻中含有較多的β-胡蘿卜素,更易被紅白錦鯉吸收和在體內沉積。
魚體體質是否健康會直接影響其體色及其商業價值,諸如營養不良或投飼量過低便會出現頭大身子瘦小的情況,魚體有寄生蟲也會導致其體表暗淡無光,因此飼料研發過程中,在追求好的體色的同時,也應注重其機體健康狀況。本試驗中,測定了紅白錦鯉血清、肝胰臟及腎臟中抗氧化指標的變化情況,結果發現32 g/kg的鹽藻添加量可顯著促進其抗氧化能力的提升。相同的試驗結果也見于白東清等在紅草金魚、陳錢在黃顙魚的研究中。
本試驗結果發現,杜氏鹽藻添加量為32 g/kg、64 g/kg 時,紅白錦鯉表現出較高的增長率,且餌料系數較低,體色尤其是紅、黃2 個色度值得到顯著提升,該2 組紅白錦鯉抗氧化指標較優,在本試驗條件下,紅白錦鯉飼料中杜氏鹽藻的建議添加量為32~64 g/kg。