油茶幼苗葉片葉綠素含量的檢測分析

彭 楊，賀 巒，陳小珍

（江西應(yīng)用技術(shù)職業(yè)學院，江西 贛州 341000）

油茶是山茶科山茶屬植物，是我國南方重要木本油料樹種。油茶種子含油30%以上，可制蠟燭與肥皂，具有分布區(qū)域廣、用途多等特點。油茶具有很高的綜合利用價值，茶籽多糖等是化合、食品等原料；茶樹灰洗頭可殺死虱子蟲卵。許多大田作物在缺乏微量元素時表現(xiàn)異常癥狀，通過觀測葉片顏色變化可評價作物適應(yīng)性狀況。文章采用葉綠素儀測定油茶幼苗葉綠素含量，為油茶幼苗快速鑒別提供依據(jù)。

1 油茶生物學特性研究

油茶為我國特有木本食用油料樹種，與椰子等并稱四大木本食用油料植物，我國利用油茶榨油供應(yīng)食用已有2 300多年的歷史。油茶正常生長開花結(jié)果條件為年均氣溫14℃～21℃，大于10℃年積溫4 250℃～7 000℃，無霜期200～360 d[1]。油茶的發(fā)育過程可具體分為胚芽期、幼年期、盛果期、衰老期，生命周期達幾十年。林分結(jié)構(gòu)是影響油茶摻量的重要因素，研究發(fā)現(xiàn)油茶單位面積產(chǎn)量與種質(zhì)密度有關(guān)，油茶林分中單株摻量相差懸殊，通過采用立體栽培方式可降低林分內(nèi)近地濕度，達到增加經(jīng)濟效益的目的。葉片是油茶重要器官，葉綠素是葉片質(zhì)體色素的重要部分，油茶葉綠素含量對種子中脂肪酸合成具有重要影響[2]。因此，對油茶種質(zhì)資源葉片葉綠素含量進行研究，可為油茶高品質(zhì)育成提供依據(jù)。

2 油茶染色體基礎(chǔ)研究

生物體遺傳性狀由基因控制，染色體在數(shù)目等方面發(fā)生變異可以導致生物遺傳性狀改變。研究利用染色體制片對普通油茶染色體核型進行分析，發(fā)現(xiàn)普通油茶染色體數(shù)目2n=30，帶型分析表明，油茶帶型可分辨同源染色體對基本上成對的，對油茶不同物種染色體數(shù)目研究發(fā)現(xiàn)，二倍體到八倍體均存在，普通油茶為六倍體。

人工誘變技術(shù)是利用多種理化生因素誘發(fā)遺傳基因突變，提高重組率，基因主要位于染色體，植物由二倍體形成多倍體是植物嘉進化的顯著特征。研究人員將多倍體育種用于油茶，研究發(fā)現(xiàn)用2%濃度秋水仙堿處理油茶頂芽側(cè)葉厚與對照具有顯著差異。

植物組織培養(yǎng)是植物離體器官在人工控制下進行培養(yǎng)發(fā)育的技術(shù)。研究人員對油茶組培育技術(shù)進行大量研究，利用岑軟3號頂芽誘導獲得再生植株。針對研究中生根周期長的缺點，對生根培養(yǎng)基進行優(yōu)化，進而縮短生根周期。對繼代培養(yǎng)進行優(yōu)化調(diào)整，使得各項參數(shù)提高[3-4]。研究具備油茶組培苗規(guī)模化生產(chǎn)能力，對小果油茶開展離體培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)廣寧紅花油茶愈傷組織可誘導性強。開展對12 個油茶物種進行愈傷組織誘導，發(fā)現(xiàn)浙江紅花油茶、多齒紅花油茶誘導率較高。

雜交是2 個生殖細胞相互融合雙親基因重組，可創(chuàng)造適合生產(chǎn)需要的類型，是植物育種學的重要內(nèi)容。雜交是種內(nèi)個體間生殖細胞結(jié)合，植物雜交育種研究包括開花、雜交技術(shù)等。為了解油茶開花習性，對油茶花期柱頭受精能力進行研究，發(fā)現(xiàn)花粉活力隨時間延長逐漸降低，這說明開花前2 d授粉成功率高。對油茶花期變異進行研究表明，影響花期的主要因素有遺傳與氣候因素，前者決定花期類型，氣候因子影響入秋與花期早晚。入秋早花期推遲，影響次年產(chǎn)量。研究表明攸縣花期在2 月下旬—4 月中旬，單株花期為18 d，花粉最佳保存溫度為-20℃。

表1 不同油茶葉片不同部位葉綠素含量Tab.1 Chlorophyll content in different parts of Camellia oleifera leaves

3 不同油茶品種幼苗葉片葉綠素含量測試

將油茶幼苗種植于苗圃內(nèi)大塑料袋中，油茶品種包括長林 04（CL04）、長林 40（CL40）、長林 03（CL03）和 23（CL23）。選取4 個品種20 株同齡油茶為研究對象，采用SPAD-520 葉綠素儀對不同位置展開葉測定，以展開葉3 個不同部位測定值和平均值代表植株葉片葉綠素含量。

圖1 不同油茶品種總體葉綠素含量Fig.1 Total chlorophyll content of different Camellia oleifera varieties

葉綠素含量與油茶光合作用關(guān)系密切，葉綠素含量低造成葉片衰老。4 種油茶葉片幼苗期內(nèi)葉綠素含量差異顯著。CL03 比其他品種葉綠素含量高，使CL03 具有更強的光合能力，CL23 葉綠素含量較低，吸收氮元素能力弱。在同等栽培條件下不同油茶品種葉片葉綠素含量差異大，油茶幼苗Cl04葉中部葉綠素含量較高，同葉片部位不同品種葉綠素含量表現(xiàn)不同差異性，CL04，CL03 葉尖葉綠素含量在0.05 水平上無差異，與CL23 有差異。同等栽培條件下，CL04、Cl03 適應(yīng)性相當，表明CL04，CL03 生理活性較高。CL04 油茶幼苗頂部葉葉綠素含量在0.05 水平無差異，CL04 與CL03 油茶幼苗基部綠素含量在0.05水平有差異，CL23油茶幼苗基部葉綠素含量在0.05 水平有差異。不同油茶品種幼苗植株中部葉SPAD值標準誤差較低。

圖2 不同油茶品種葉片不同部位葉綠素含量Fig.2 Chlorophyll content in different parts of leaves of different Camellia oleifera varieties

4 結(jié)語

SPAD 值標識葉綠素相對含量，是對油茶氮元素營養(yǎng)診斷的基礎(chǔ)。不同品種油茶幼苗葉片SPAD 值不同，確定代表植株葉綠素含量狀況葉位是診斷油茶幼苗適應(yīng)性前提。油茶幼苗期植株中部葉片中部SPAD 值差異性不大，對植株進行適應(yīng)性診斷具有無損等特點，但受測定葉位等因素影響，僅靠SPAD 值判斷物種適應(yīng)性是不全面的，后續(xù)還需要進一步研究。