腫瘤病理診斷中冰凍切片技術的應用價值

趙振剛

（吉林省吉林市人民醫(yī)院 病理科，吉林 吉林 132001）

0 引言

隨著人們生活環(huán)境、飲食結構、生活壓力等的不斷變化，腫瘤的發(fā)病率在臨床上不斷的增加。腫瘤是指機體中正常細胞在不同的始動因素與促進因素長期作用下，所產(chǎn)生的增生與異常分化所形成的新生物[1]。腫瘤一般分為良性腫瘤和惡性腫瘤，良性腫瘤可以通過藥物和手術進行有效的治療；惡性腫瘤進入中晚期一般錯過了最佳的治療時期，預后差，患者一般只能夠通過化療等來延長生命[2]。冰凍切片技術是臨床診斷腫瘤疾病常用的病理學診斷方法，其利用低溫冰凍病灶組織，對病灶組織實施切片、固定、染色等處理，通過顯微鏡觀察和判斷腫瘤性質(zhì)，為手術治療提供依據(jù)[3]。鑒于此，本文將1900 例腫瘤病理標本為例進行分析，總結冷凍切片技術的方法，試探討其對疾病病理診斷的影響，報告具體內(nèi)容請看下文。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究例數(shù)有1900 例，研究時間在2019 年11月至2020 年11 月，觀察對象是腫瘤病理標本，對比分為兩組，各950 例。對照組中男性標本例數(shù)與女性標本例數(shù)各自為500 例、450 例；患者年齡為28～55 歲，平均（41.23±2.11）歲；標本類型：卵巢260 例、子宮240 例、淋巴結220 例、乳腺130例、甲狀腺100 例。研究組中男性標本與女性標本的構成比為511:439；患者年齡為27～55 歲，平均（40.58±2.14）歲；標本類型：卵巢270 例、子宮250 例、淋巴結210 例、乳腺120 例、甲狀腺100 例。對比分析兩組的各項信息，具有可比性（P＞0.05）。

納入標準：①1900 例標本主人同意實施手術治療；②經(jīng)告知后所有標本主人均自愿參與，并簽署相關文件；③本次研究獲取倫理委員會的審核通過。

排除標準：①標本主人的心、肝、腎等器官存在嚴重器質(zhì)性病變；②標本主人近段時間接受過重大手術治療，無法再次實施手術治療；③標本主人的精神異常，聽覺與語言存在障礙，不能配合完成標本采集。

1.2 方法

1900 例腫瘤病理標本收集完成后，放入恒溫式冰凍切片機中，將提前準備好的濃度為95%的乙醇90 mL+濃度為10%的甲醛5mL 加入恒溫式冰凍切片機中，隨后開展相應的檢測。

研究組開展冰凍切片技術處理，詳細方法為：（1）標本的選擇與保存。①在手術過程中，需要保證標本適中且新鮮，標本組織大小為15mm×15mm，厚度維持在0.2～0.5cm，在獲取標本的時候，注意不要損傷周圍組織，并且盡量避開壞死組織和出血部位。②標本收集好后，需要將標本放置在冷凍的環(huán)境，結合實際需求和標本的抗寒程度，合理調(diào)節(jié)冷凍環(huán)境的溫度。通常情況下，乳腺的冷凍溫度控制在-29～-21℃；卵巢的冷凍溫度維持在-21～-19℃；淋巴結、肝臟以及腎臟的冷凍溫度保持在-18～-17℃。冷凍時間≤3min，但是肝臟、淋巴結和甲狀腺的冷凍時間控制在2～2.5min。（2）標本切片處理。①取出標本后進行切片處理，首先將標本放置在玻璃片上，加入固定液對標本進行固定處理，固定時間大約為1min；②隨后采用清水沖洗標本，確保固定液沖洗干凈后加入提前預溫的蘇木精，靜置2min 后進行水洗，采用鹽酸分化與水洗，放入溫開水中呈現(xiàn)藍色，隨后加入水溶性伊紅進行水洗；③加入梯度乙醇進行脫水處理，隨后采用水風機將乙醇吹干，最后進行封片處理。

對照組展開常規(guī)石蠟切片技術處理，具體方法為：標本的選擇與保存方法同冰凍切片技術相同，術后將標本放入濃度為10%的福爾馬林溶液+二甲苯中，開火進行煮沸，煮沸后吸掉標本上的溶液，隨后放入丙酮溶液中再次進行煮沸，煮沸后再次吸掉標本上的溶液，最后將標本放入溫度為70℃的石蠟溶液中進行制片，大約30min 后完成制片。

1.3 觀察指標

（1）將手術病理學檢查作為參照標準，對比分析兩組的檢測結果，仔細記錄惡性腫瘤、良性腫瘤以及交界性腫瘤的例數(shù)，計算總確診率。

（2）觀察兩種切片技術的檢測質(zhì)量，邀請本院2 名資深病理學醫(yī)師進行評估，主要評估清晰度、細胞形態(tài)以及細胞結構，并進行打分，每項為10 分，分數(shù)越高，評定為檢測質(zhì)量越良好。

1.4 統(tǒng)計學方法

研究所得數(shù)據(jù)均錄入至Excel 2010 中予以校對，采用SPSS 23.0軟件進行處理，（）表示計量資料，（%）表示計數(shù)資料，用t和χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 評價分析兩種切片技術的檢測結果

從表1 的結果可以發(fā)現(xiàn)，在準確率上，對比對照組（84.21%），研究組（96.84%）明顯更高，差異較大（P＜0.05）。

表1 評價分析兩種切片技術的檢測結果[n(%)]

2.2 對比分析兩種切片技術相關指標的差異

從表2 的結果能夠看出，在清晰度評分、細胞結構評分以及細胞形態(tài)評分上，研究組高于對照組（P＜0.05）。

表2 對比分析兩種切片技術相關指標的差異（,分）

表2 對比分析兩種切片技術相關指標的差異（,分）

3 討論

近年來，腫瘤的患病人數(shù)不斷增加，死亡率也在不斷提高，已成為人口死亡的重要疾病原因。據(jù)相關統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，腫瘤的患病率在全球范圍內(nèi)呈上升趨勢，其中胃癌、腸道癌均位于我國發(fā)病率排行榜前幾名，對患者家庭以及社會均造成了極大的困擾[4]。很多腫瘤疾病的早期癥狀不明顯，等到引起患者的注意，確診的時候已經(jīng)處于晚期，降低了臨床治療效果，提高了患者的病死率，給患者的身體健康與生命安全構成極大的威脅[5]。故臨床加強對腫瘤疾病的檢查是非常重要的。

隨著臨床醫(yī)學水平的發(fā)展與完善，病理學技術也發(fā)展迅速，在疾病診斷與鑒別中發(fā)揮著重要的作用，已成為腫瘤疾病的重要檢查手段。常規(guī)石蠟切片是一種常規(guī)病理學檢測技術，但是檢測效果不理想。而冰凍切片技術是指取出標本后快速冷凍，冷凍到一定的硬度后進行切片，該技術可以保存標本的酶活性和結構，方便后期病理學檢查[6]。根據(jù)操作方法的不同，冰凍切片技術分為：①低溫恒冷箱冰凍切片；②甲醇循環(huán)制冷凍切片；③二氧化碳冰凍切片；其中低溫恒冷箱冰凍切片的應用范圍最廣、效果最佳。冰凍切片技術的操作過程簡單，不需要進行固定、脫水和包埋等，可有效縮短制片時間；該技術不會影響標本組織的結構、類脂以及脂肪等成分，可以準確判斷腫瘤疾病的良性和惡性，方便后續(xù)方案的制定[7]。呂雪瓊等[8]在研究中發(fā)現(xiàn)冰凍切片技術用于腫瘤疾病的診斷效果顯著，能夠準確診斷出腫瘤的良惡性，這與本次研究結果相似。本次研究發(fā)現(xiàn)，研究組經(jīng)冰凍切片技術檢查后，其準確率明顯高于采用常規(guī)石蠟切片技術檢測的對照組（P＜0.05），提示冰凍切片技術檢測的診斷效果更佳。

王曉艷[9]在一項研究中將56 份病理組織樣本作為研究對象，經(jīng)快速冷凍切片技術與常規(guī)石蠟切片技術處理后，研究結果發(fā)現(xiàn)，在清晰度、細胞結構以及細胞形態(tài)評分上，快速冰凍（8.34±0.64）分、（8.11±1.02）分、（8.51±0.56）分明顯高于常規(guī)石蠟（6.27±1.20）分、（7.02±0.85）分、（6.84±1.25）分，這與本次研究結果相似。本次研究發(fā)現(xiàn)，在清晰度評分、細胞結構評分以及細胞形態(tài)評分上，研究組高于對照組（P＜0.05），表明冰凍切片技術可以更加清晰地觀察標本組織的細胞形態(tài)與細胞結構，提高切片質(zhì)量，從而提升檢出率。需要注意的是，雖然冰凍切片技術的病理診斷價值較高，但是在實際操作過程中制成連續(xù)切片和較薄的切片較為不易，若是操作人員在冷凍過程與切片過程中的操作不規(guī)范都會影響檢測結果，比如：①切片獲取標本組織的體積過大會影響切片和染色效果；②冷凍時間過長，會導致標本出現(xiàn)水結晶情況，從而影響組織細胞的形態(tài)、結構以及清晰度[10]。因此，需要嚴格要求病理科技術人員，定期組織技術人員進行學習和培訓，確保可以熟練掌握冷凍切片技術，防止出現(xiàn)誤差，影響檢測結果的準確性與真實性。

綜上所述，相較于常規(guī)石蠟切片技術，冰凍切片技術用于腫瘤病理的診斷效果理想，檢出率更高，可以更加清晰地觀察到組織細胞的形態(tài)和結構，準確判斷出良惡性腫瘤，為后續(xù)治療提供參考，具有較好的臨床推廣意義。