不同程度頸動脈狹窄對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響

向入平，陳 瓊，崔 嶸，余輝云，周美君，李 枝，黃玉涓，余 成

（湖南師范大學(xué)附屬長沙醫(yī)院/長沙市第四醫(yī)院，長沙 410006）

缺血性腦卒中（ischemic stroke，IS）是神經(jīng)系統(tǒng)的常見病和多發(fā)病，具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率等特點，是目前人類疾病主要死亡原因之一［1］。現(xiàn)有研究表明，30%的缺血性腦卒中是由頸動脈狹窄（carotid artery stenosis，CAS）引起的［2］；頸動脈狹窄程度與缺血性腦卒中發(fā)生率呈正相關(guān)，常被作為卒中患者危險性的評估依據(jù)之一［3］。CAS 可以導(dǎo)致IS 發(fā)生，但目前關(guān)于CAS 對腦缺血再灌注損傷的影響及作用機制尚不清楚，本研究通過建立不同程度大鼠頸動脈狹窄缺血再灌注模型，通過觀察缺血再灌注后缺血半暗區(qū)病理、神經(jīng)細胞凋亡和XIAP、Smac 蛋白表達的變化，探討不同程度頸動脈狹窄對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響及其機制。

1 資料與方法

1.1 實驗動物與實驗試劑 SPF 級健康雄性SD 大鼠，8 周齡，體重260～310 g，均購自于湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（湘）2016-0002。Smac 抗體和XIAP 抗體，均購自于北京博奧森生物技術(shù)有限公司。TUNEL 細胞凋亡檢測試劑盒購自于上海七海復(fù)泰生物科技有限公司。總RNA 提取試劑盒購自于北京索萊寶科技有限公司；通用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒和Realtime PCR 熒光定量試劑盒均購自于上海翊圣生物科技有限公司。顯微鏡和成像系統(tǒng)購自于日本尼康公司。

1.2 動物模型的制備與實驗分組 參照Zhou［4］等的方法制備輕、中、重度頸動脈狹窄大鼠模型。大鼠于術(shù)前8～12 h 禁食，自由飲水，經(jīng)乙醚誘導(dǎo)麻醉，仰臥固定，頸正中去……