鎖陽對少弱精大鼠模型精液質量及性激素水平的影響

顧娟，厲振北，祁玉娟，曹義娟

（江蘇省徐州市中心醫院生殖醫學中心，江蘇 徐州221000）

男性不育癥的發病率在世界范圍內均呈上升趨勢，遺傳、內分泌紊亂、感染、免疫功能障礙、環境因素可能是導致該疾病的病因[1-2]。其中，精子數量減少、活力減弱的少弱精癥患者比例最高，占男性不孕癥患者的46%左右[3]。有研究指出[4]，在西方國家，每年精力密度下降幅度為2.6%，每年精子活力下降速度為0.3%，而在我國，每年精子質量的下降幅度為1%[5]。家庭對生育的的需求以及逐漸上升的發病趨勢，使得少弱精癥的治療成為臨床研究的熱點與難點。中醫上，腎主藏精，腎氣的強弱決定生精功能的強弱，其中陽虛型主要表現為少弱精癥，是臨床最常見的類型，也是目前重點研究的方向。鎖陽具有補腎、益精、潤燥功效，主治陽痿滑精、腰膝痿軟、腸燥便秘。現代醫學也從鎖陽提取物中發現了大量發揮藥理作用的化學成分，包括萜類、有機酸類、黃酮類等[6]，也有相關研究分析其對生殖系統的作用[6-7]。本研究分析鎖陽水提取物對生殖系統的影響，旨在進一步闡釋其作用機制，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料SPF級SD健康雄性大鼠60只，6～8周齡；平均體質量約（250±10）g，由徐州醫科大學實驗動物中心提供[動物許可證號SYXK（蘇）2010-0011]。

1.2 方法

1.2.1 鎖陽水提取物的制備鎖陽原藥材中加入10倍量的0.9%NaCl溶液，先浸泡1 h，再煎煮30 min，用濾布過濾，收集濾液；殘渣加入5倍量的0.9%NaCl溶液，浸泡30 min煎煮20 min，過濾得到濾液；殘渣再加入5倍量的0.9% NaCl溶液，浸泡30 min煎煮10 min，過濾得到濾液。合并3次濾液并再次過濾，濃縮濾液至1 mL溶液（相當于0.5 g生藥），冷藏備用。

1.2.2 動物分組及處理60只SD大鼠按照隨機數字法分為空白組、模型組和鎖陽實驗組，每組20只。空白組大鼠正常飼養；模型組和鎖陽實驗組大鼠予以環磷酰胺腹腔注射，劑量為30 mg/（kg·d），持續1周，繼續飼養1周后，兩組各選取1只大鼠處死，觀察睪丸組織，驗證造模成功。鎖陽實驗組大鼠再予以鎖陽水提取物灌胃，劑量0.5g/（kg·d），每天1次，空白組與模型組予以等量的0.9%NaCl溶液灌胃，療程均為4周。

1.3 觀察指標①比較3組大鼠精子質量：干預結束后，使用精子質量分析系統檢測附睪尾部精子密度、精子活率、精子活力以及直線運動速度。②比較3組血清性激素水平：用EP管取大鼠靜脈血0.8 mL，室溫放置，凝固后分裝，按照試劑盒檢測方法檢測大鼠血清睪酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）水平。

1.4 統計學方法采用SPSS 22.0統計軟件進行數據分析，計量資料以“±s”表示，比較采用t/F檢驗，計數資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組大鼠精液質量情況比較3組大鼠精子密度、精子活率、精子活力以及直線運動速度比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。空白組大鼠精子密度、精子活率、精子活力以及直線運動速度均高于模型組與鎖陽實驗組，差異有統計學意義（P＜0.05）；鎖陽實驗組大鼠精子密度、精子活率、精子活力以及直線運動速度高于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 3組大鼠精液質量情況比較（±s）Table 1 Comparison of semen quality of rats among three groups(±s)

表1 3組大鼠精液質量情況比較（±s）Table 1 Comparison of semen quality of rats among three groups(±s)

注：與空白組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

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2.2 3組大鼠性激素水平情況比較3組大鼠血清T、FSH、LH水平比較差異有統計學意義（P＜0.05）。模型組血清T水平低于空白組與鎖陽實驗組，血清FSH、LH水平高于空白組與鎖陽實驗組，差異有統計學意義（P＜0.05）；鎖陽實驗組血清T水平低于空白組，血清FSH、LH水平高于空白組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 3組大鼠性激素水平情況比較（±s）Table 2 Comparison of sex hormone levels among three groups(±s)

表2 3組大鼠性激素水平情況比較（±s）Table 2 Comparison of sex hormone levels among three groups(±s)

注：與空白組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

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3 討論

目前，少弱精癥所致不育癥的發病率呈上升趨勢，臨床上多采用輔助生殖技術以解決生育問題，而針對其病癥的治療尚缺乏明確的藥物及手段[8-9]。在傳統醫學與現代醫學不斷融合的發展趨勢下，越來越多的中藥被研究應用于臨床各類疾病。鎖陽自古以來是補腎助陽的良藥，腎氣的虛衰與生殖能力密切相關。現代分子生物學的發展進一步揭示了鎖陽的生物活性成分、藥理作用等[10]，也有眾多基礎及臨床研究報道其各類生物學作用，包括對生殖系統的影響[11]。研究發現[12-15]，鎖陽對大鼠模型具有促進成骨分化、保護神經細胞、降血糖等作用。曹義娟[16]研究發現，鎖陽水提取物有助于少弱精癥大鼠模型精子數目、精子活率的恢復，可能通過降低脂質過氧化產物及活性氧水平改善精子活力，其對卵泡刺激素分泌有促進作用，進而促進相關基因的表達及精原干細胞的增殖。

本研究結果表明，相較于模型組，鎖陽水提取物組在精子密度、精子活率、精子活力以及直線運動速度上均有明顯提高，但仍低于空白組，說明鎖陽水提取物對提高少弱精癥大鼠的精子質量有顯著作用，但不能使其完全恢復到正常水平。進一步分析大鼠激素水平發現，鎖陽水提取物組睪酮水平較模型組顯著提高，FSH、LH分泌水平降低，接近空白組。睪酮水平的提高與精子質量的提高相關，FSH、LH水平的降低說明少弱精癥大鼠的性激素負反饋調控系統運作趨于正常，病理性的促性腺激素大量分泌問題得到改善[16]。鎖陽水提取物干預后的模型大鼠較正常大鼠仍存在差異，針對此不足，可從提高藥物濃度、聯合用藥等方面進一步改進研究。

綜上所述，鎖陽水提取物可以顯著提高少弱精癥大鼠模型的精子密度、精子活率、精子活力以及直線運動速度，并促進大鼠睪酮的分泌，抑制FSH和LH的異常分泌而調節性腺激素水平。