CXCR7、KIF18A蛋白、miR-1269對(duì)胃癌的診斷研究

安志強(qiáng)

(濮陽(yáng)市人民醫(yī)院，河南 濮陽(yáng) 457000)

胃癌為臨床較為常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，具有較高的病死率，其發(fā)生及病情進(jìn)展被認(rèn)為癌基因與抑癌基因平衡、細(xì)胞增殖周期調(diào)控等因素有關(guān)[1]。近年來(lái)，CXCR7作為基質(zhì)細(xì)胞衍生因子的受體，在多種腫瘤中參與了細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖等過(guò)程[2]。微小RNA(miR)被認(rèn)為在轉(zhuǎn)錄后能調(diào)控靶基因表達(dá)形式，參與了腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程[3]。此外，細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制失調(diào)可導(dǎo)致基因表達(dá)異常從而使細(xì)胞周期紊亂，細(xì)胞過(guò)度繁殖引起惡性轉(zhuǎn)換[4]。鑒于此，本研究分析了CXCR7、KIF18A蛋白、miR-1269對(duì)胃癌的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1一般資料 收集2018年4月至2019年4月本院收治的40例胃癌患者的臨床資料，其中男28例，女12例；年齡62～81歲，平均(73.46±3.41)歲；病程3～12個(gè)月，平均(7.14±1.23)個(gè)月；TNM分期：Ⅰ期5例，Ⅱ期13例，Ⅲ期10例，Ⅳ期12例。

1.1.2納入標(biāo)準(zhǔn) (1)經(jīng)臨床病理學(xué)檢查確診為胃癌，且癌旁組織病理學(xué)為陰性；(2)臨床資料完整且有病理組織切片封存。

1.1.3排除標(biāo)準(zhǔn) (1)罹患其他腫瘤疾病；(2)術(shù)前接受放、化療等相關(guān)治療者。

1.2方法

1.2.1組織標(biāo)本來(lái)源 胃癌組織標(biāo)本取自胃癌患者原發(fā)病灶處，癌旁組織取自距離胃癌病灶5 cm處胃組織，正常胃部組織來(lái)源于距離胃癌病灶5 cm外胃組織(經(jīng)病理組織檢查顯示為正常組織)。所有組織標(biāo)本均在術(shù)中離體30 min后完成封存，組織標(biāo)本取材整個(gè)過(guò)程均由專業(yè)人員在嚴(yán)格無(wú)菌技術(shù)下完成。

1.2.2CXCR7表達(dá) 標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定后進(jìn)行石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片后采用免疫組織化學(xué)的鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)法檢測(cè)3種組織CXCR7的表達(dá)。陽(yáng)性判定：0分為無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞，1分為陽(yáng)性細(xì)胞大于0～<30%，2分為陽(yáng)性細(xì)胞30%～<60%，3分為陽(yáng)性細(xì)胞大于或等于60%；染色強(qiáng)度分為0分(不著色)、1分(淺黃色)、2分(棕黃色)、3分(深棕黃色或褐色)等。陽(yáng)性細(xì)胞范圍與染色強(qiáng)度評(píng)分乘積結(jié)果小于2分表示陰性，≥2分表示陽(yáng)性。

1.2.3KIF18A蛋白表達(dá) 采用免疫組織化學(xué)檢測(cè)3種組織KIF18A蛋白的表達(dá)。著色程度分為0分(與染色背景一致)、1分(淺黃色)、2分(棕黃色)、3分(深褐色)等；陽(yáng)性判定：0分為陽(yáng)性細(xì)胞，1分為陽(yáng)性細(xì)胞小于25%，2分為陽(yáng)性細(xì)胞25%～<50%，3分為陽(yáng)性細(xì)胞50%～<75%，4分為陽(yáng)性細(xì)胞大于或等于75%。染色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞乘積結(jié)果為0分表示陰性，>0分表示陽(yáng)性。

1.2.4miR-1269表達(dá) 對(duì)3種組織進(jìn)行液氮冷凍處理后置于-80 ℃環(huán)境中待檢，根據(jù)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行相關(guān)步驟操作，并計(jì)算miR-1269表達(dá)水平。

2 結(jié) 果

2.1各種組織KIF18A蛋白、CXCR7表達(dá)情況比較 3種組織中KIF18A蛋白、CXCR7陽(yáng)性率比較，胃癌組織陽(yáng)性率最高，其次由高至低依次為胃癌旁組織、正常組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各種組織KIF18A蛋白、CXCR7表達(dá)情況比較[n(%)]

2.2各種組織miR-2169表達(dá)比較 正常組織miR-2169表達(dá)量為(1.73±0.76)，胃癌旁組織miR-2169表達(dá)量為(3.89±0.81)，胃癌組織miR-2169表達(dá)量為(6.16±0.95)。胃癌組織miR-2169表達(dá)量較胃癌旁組織、正常組織高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=275.661，P=0.001)。

2.3KIF18A蛋白、CXCR7、miR-2169表達(dá)的診斷效能 KIF18A蛋白的AUC為0.875[95%可信區(qū)間(95%CI)：0.773～0.977]，靈敏度為87.50%，特異度為75.00%；CXCR7的AUC為0.825(95%CI：0.728～0.922)，靈敏度為88.50%，特異度為80.00%;miR-2169的AUC為0.832(95%CI：0.737～0.928)，靈敏度為97.50%，特異度為80.00%。見圖1～3。

圖1 KIF18A蛋白表達(dá)ROC

圖2 CXCR7表達(dá)ROC

圖3 miR-2169表達(dá)ROC

3 討 論

胃癌作為臨床常見的惡性腫瘤，因早期無(wú)明顯臨床表現(xiàn)，導(dǎo)致患者在臨床確診時(shí)多已至中晚期，且胃癌經(jīng)手術(shù)及放、化療等輔助治療后還具有較高的轉(zhuǎn)移率及復(fù)發(fā)率，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[5]。腫瘤的發(fā)生及發(fā)展受多種因素影響，特別是與基因的異常表達(dá)及細(xì)胞周期凋亡、紊亂密切相關(guān)[6-7]。

KIF18A作為驅(qū)動(dòng)蛋白之一，其異常表達(dá)能導(dǎo)致有絲分裂過(guò)程中的相關(guān)染色體分離發(fā)生異常，從而致使腫瘤的發(fā)生[8]。miR作為非編碼小RNA，可在轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因表達(dá)形式，導(dǎo)致mRNA抑制降解或翻譯作用，從而參與了腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程[9]。已有大量研究證實(shí)，miR參與了胃癌腫瘤細(xì)胞的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程[10-12]。CXCR7作為基質(zhì)細(xì)胞衍生因子的獨(dú)立受體，在胃癌的侵襲與轉(zhuǎn)移過(guò)程中具有重要意義[13]。CXCR7能激活蘇氨酸激酶信號(hào)通路，從而抑制腫瘤細(xì)胞死亡，間接增加了腫瘤細(xì)胞的生存[14-15]。

本研究結(jié)果顯示，3種組織中KIF18A蛋白、CXCR7陽(yáng)性率比較，胃癌組織陽(yáng)性率最高，其次由高至低依次為胃癌旁組織、正常組織，且胃癌組織miR-2169表達(dá)量較胃癌旁組織、正常組織高。提示KIF18A蛋白、miR-1269在胃癌組織中呈高表達(dá)。本研究進(jìn)一步繪制ROC，結(jié)果顯示，KIF18A蛋白的AUC為0.875，靈敏度為87.50%，特異度為75.00%；CXCR7的AUC為0.825，靈敏度為88.50%，特異度為80.00%；miR-2169的AUC為0.832，靈敏度為97.50%，特異度為80.00%。提示KIF18A蛋白、CXCR7、miR-2169在胃癌的診斷中均具有重要的臨床價(jià)值。

綜上所述，miR-2169在胃癌中呈高表達(dá)，而KIF18A蛋白、CXCR7在胃癌組織中陽(yáng)性率較高，三者均可作為診斷胃癌及評(píng)估患者預(yù)后的重要指標(biāo)。