腦小血管病患者運(yùn)動障礙與血清IMA LP-PLA2 BDNF 水平的相關(guān)性研究

王天舒 景黎君 滕軍放 牛瑞娜

鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 鄭州450052

腦小血管疾病（cerebral small vessel disease，CSVD）是指腦小動脈、微動脈、毛細(xì)血管、小靜脈等微小血管病變引起的腦部病變，病理改變表現(xiàn)為玻璃樣變、纖維素樣變壞死、小動脈硬化等，腦組織則可發(fā)生腔隙性梗死、腦微出血、腦白質(zhì)疏松、血管周圍間隙增寬等變化［1-3］。研究［4］表明CSVD 占所有腦部血管疾病的83.8%，因其發(fā)病隱匿，且進(jìn)展緩慢，早期易被忽視，預(yù)后欠佳。運(yùn)動障礙是CSVD預(yù)后不佳患者的常見癥狀，對患者工作、生活造成極大影響［5］。因此，通過了解影響CSVD 患者運(yùn)動障礙的相關(guān)因素，對于CSVD的治療指導(dǎo)、預(yù)后評價(jià)有重要意義。血液生化檢查是臨床常用的診療手段，在病變早期無影像學(xué)改變疾病的診斷、治療及預(yù)后評估有重要意義［6］。研究［7-9］發(fā)現(xiàn)血清缺血修飾清蛋白（ischemia modified albumin，IMA）、脂蛋白磷脂酶A2（lipoprotein-associated phospho-lipase A2，Lp-PLA2）、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）是與心腦血管疾病發(fā)生密切相關(guān)的因子，參與腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展。目前關(guān)于IMA、Lp-PLA2、BDNF的研究主要側(cè)重于心腦血管疾病的診斷、預(yù)后方面，而與CSVD患者運(yùn)動障礙的相關(guān)研究較少。本研究通過分析CSVD 患者運(yùn)動障礙與其血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平的相關(guān)性，以期為CVSD的診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2019-01—2020-01鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的CSVD患者82例為腦血管疾病組，另從同期來院體檢的健康者中選取80 例為對照組。腦血管疾病組男49例，女33例，年齡44～85（66.87±8.50）歲；疾病類型：腔隙性腦梗死30例，腦白質(zhì)病變12 例，微出血23 例，血管周圍間隙擴(kuò)大17例。對照組男43 例，女37 例，年齡42～80（65.80±9.02）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）腦血管病組均經(jīng)磁共振或腦部CT等影像學(xué)檢查確診，且符合國際血管改變神經(jīng)影像標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告小組提出的CSVD神經(jīng)影像學(xué)標(biāo)準(zhǔn)［10］；（2）無顱腦內(nèi)外動脈重度狹窄史；（3）均接受溶栓、抗血小板等保守治療手段。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）多發(fā)性硬化、中毒、嚴(yán)重的睡眠呼吸暫停綜合征等特殊原因造成的腦部影像學(xué)改變；（2）大面積腦梗死；（3）惡性腫瘤、腦外傷史及顱內(nèi)感染者。2 組性別、年齡資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。研究開始前已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，受檢者對本次內(nèi)容均知情同意，簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平檢測：抽取受檢者入院48 h 內(nèi)的空腹肘靜脈血，肝素抗凝，30 min內(nèi)以3 000 r/min離心15 min，離心半徑10 cm，取上層血清保存于－80 ℃待檢。以酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒（廣東中山生物工程有限公司）檢測IMA、Lp-PLA2、BDNF，嚴(yán)格按照試劑盒說明書步驟操作，將IMA、Lp-PLA2、BDNF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育，洗滌后加入親和素標(biāo)記過的過氧化物酶，再次溫育洗滌，取出未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入底物A、B，與酶結(jié)合物同時作用，于波長450 nm的酶標(biāo)儀上讀取吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待檢樣本濃度。

1.2.2 CSVD 患者運(yùn)動障礙診斷及分組：簡式Fugl-Meyer（FM）為運(yùn)動障礙診斷標(biāo)準(zhǔn)［11］，F(xiàn)M 包括上肢部分和下肢部分，總評分0～100分，分?jǐn)?shù)＜100分表示存在功能障礙，且分?jǐn)?shù)越低為運(yùn)動功能障礙越嚴(yán)重，Cronbach’s α系數(shù)0.75～0.82。所有患者入院病情穩(wěn)定后進(jìn)行FM評估，將FM評分＜100分納入運(yùn)動障礙組，否則納入未運(yùn)動障礙組。

1.2.3 收集CSVD 患者運(yùn)動障礙影響因素：收集CSVD患者的相關(guān)資料，包括性別、年齡、入院時BMI、吸煙史、飲酒史、高血壓、糖尿病、頸動脈粥樣硬化、CSVD 類型、總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triacylglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density cipoprotein-cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（hight density cipoprotein-cholesterol，HDL-C）、血同型半胱氨酸（Hcy）、血尿酸（uric acid，UA）、紅細(xì)胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、血紅蛋白（hemoglobin，HGB）、紅細(xì)胞比積（header convertor，HCV）、IMA、Lp-PLA2、BDNF。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）描述，數(shù)據(jù)比較采用校正χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2 組血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平比較 腦血管疾病組血清IMA、Lp-PLA2 水平均高于對照組，血清BDNF 水平低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 2 組相關(guān)因素比較 CSVD 患者中34 例發(fā)生運(yùn)動障礙為運(yùn)動障礙組，其余納入非運(yùn)動障礙組。運(yùn)動障礙組中頸動脈粥樣硬化占比及血清IMA、Lp-PLA2、Hcy水平高于對非運(yùn)動障礙組，血清BDNF水平低于非運(yùn)動障礙組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。2組性別分布、吸煙史、飲酒史、高血壓、CSVD類型、糖尿病占比，以及年齡、入院時BMI、TC、TG、LDL-C、HDL-C、UA、ESR、HGB、HCV 比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 Logistic 回歸分析CVSD 患者發(fā)生運(yùn)動障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素 將可能影響CSVD 患者發(fā)生運(yùn)動障礙的影響因素為自變量（X），是否發(fā)生運(yùn)動障礙為因變量（Y），對經(jīng)單因素分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素進(jìn)行賦值，發(fā)生運(yùn)動障礙計(jì)為1，未發(fā)生計(jì)為0，賦值結(jié)果見表3。Logsitic 回歸分析顯示，頸動脈粥樣硬化、血清IMA、Lp-PLA2、BDNF、Hcy 水平是導(dǎo)致CSVD變患者發(fā)生運(yùn)動障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見表4。

表1 2組血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum IMA，Lp-PLA2 and BDNF levels in two groups（±s）

表1 2組血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum IMA，Lp-PLA2 and BDNF levels in two groups（±s）

組別腦血管疾病組對照組t值P值n 82 80 IMA（μg/mL）50.32±10.33 80.37±15.25 14.716＜0.001 Lp-PLA2（mg/L）212.30±35.33 138.52±20.58 16.189＜0.001 BDNF（μg/L）10.02±2.28 13.58±3.20 8.137＜0.001

表2 2組相關(guān)因素比較Table 2 Comparison of related factors between two groups

表3 Logistic回歸分析賦值Table 3 Assignment of Logistic regression analysis

表4 Logistic回歸分析運(yùn)動障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素Table 4 Independent influencing factors of exercise disorder by Logistic regression analysis

2.4 CSVD 患者運(yùn)動障礙與血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平的相關(guān)性分析 CSVD運(yùn)動障礙患者的FM評分為（90.23±2.31）分。Pearson 相關(guān)性分析顯示CSVD 患運(yùn)動障礙患者的FM 評分與血清IMA、Lp-PLA2水平呈負(fù)相關(guān)（r= 0.756、0.670，P＜0.05），與血清BDNF水平呈正相關(guān)（r=0.602，P＜0.05）。見表5。

表5 CSVD患者運(yùn)動障礙與血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平的相關(guān)性分析Table 5 Correlation analysis of dyskinesia and serum IMA，Lp-PLA2，BDNF levels in CSVD patients

3 討論

隨著中國人口老齡化的加劇及生活方式的改變，腦血管疾病的危險(xiǎn)因素增多，CVSD 的發(fā)病率逐漸上升［12-13］。CVSD 進(jìn)展緩慢，臨床癥狀無特異性，多數(shù)患者因病情進(jìn)展到一定階段急性發(fā)作而就診，急性發(fā)作以腔隙性腦梗死和腦實(shí)質(zhì)出血最為常見，可使患者出現(xiàn)肌張力障礙、行走困難、震顫等運(yùn)動障礙表現(xiàn)，對生活質(zhì)量造成極大影響［14-15］。因CVSD的病變較輕，可自行緩解，但仍有部分患者預(yù)后較差，且自行緩解患者在早期仍會對工作、生活及家人造成負(fù)擔(dān)［16］。因此，了解CVSD患者運(yùn)動障礙的影響因素，及時做好預(yù)防準(zhǔn)備對減輕患者負(fù)擔(dān)有重要意義。

本研究顯示腦血管疾病組血清IMA、Lp-PLA2水平均高于對照組，BDNF水平低于對照組，說明CVSD患者存在血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平異常。IMA最早以心肌缺血標(biāo)志物受到灌注，機(jī)體發(fā)生缺血/再灌注時生成大量的氧自由基破壞血清白蛋白的氨基酸序列，血清白蛋白與過渡金屬結(jié)合能力改變，更易被生物化學(xué)因素降解而破壞，這種因缺血缺氧而被降解修飾的血清白蛋白即IMA［17-19］。CVSD患者中因腦血管病變可造成腦組織能量代謝障礙，導(dǎo)致自由基過度生成，可引起IMA水平升高［20］。MENON等［21］研究發(fā)現(xiàn)腦卒中患者血清IMA 明顯高于對照組，可作為早期缺血性卒中篩查的一個敏感和快速的生物標(biāo)志物。Lp-PLA2是由血管內(nèi)膜細(xì)胞中巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和肥大細(xì)胞分泌的促進(jìn)氧化磷脂水解的磷脂酶，能氧化水解低密度脂蛋白（ox-LDL）中的氧化磷脂，生成脂類促炎物質(zhì)，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞死亡及功能異常，參與心血管病變［22-23］。研究［24］證實(shí)Lp-PLA2是氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)的生物標(biāo)志物，其水平的升高可增加心血管疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。BDNF是具有神經(jīng)營養(yǎng)作用的蛋白質(zhì)，在神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛表達(dá)［25］。研究［26］發(fā)現(xiàn)腦血管疾病患者因存在腦部能量供應(yīng)障礙，發(fā)生炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激等一系列病理改變，神經(jīng)功能受損，BDNF 被過度消耗，血清水平下降。上述研究證實(shí)IMA、Lp-PLA2、BDNF參與CVSD的發(fā)生。

本研究中運(yùn)動障礙組中頸動脈粥樣硬化占比及血清IMA、Lp-PLA2、Hcy 水平高于對非運(yùn)動障礙組，血清BDNF 水平低于非運(yùn)動障礙組；Logistic 回歸分析顯示頸動脈粥樣硬化、血清IMA、Lp-PLA2、Hcy、BDNF 水平均是CVSD 患者發(fā)生運(yùn)動障礙的獨(dú)立影響因素，說明血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平的異常可增加CVSD 患者運(yùn)動障礙風(fēng)險(xiǎn)。IMA 的產(chǎn)生與缺血缺氧造成的能量代謝障礙有關(guān)，其水平越高提示缺血缺氧造成的能量代謝障礙越嚴(yán)重，對神經(jīng)細(xì)胞、腦皮質(zhì)及錐體束等影響機(jī)體運(yùn)動功能的組織損傷越嚴(yán)重，因此是導(dǎo)致CVSD 患者運(yùn)動障礙的危險(xiǎn)因素［27-28］。Lp-PLA2 造成的血管內(nèi)皮功能損傷可刺激黏附因子和細(xì)胞因子的生成，通過趨化炎癥細(xì)胞進(jìn)一步產(chǎn)生自我強(qiáng)化的循環(huán)，加重促炎因子的分泌，形成惡性循環(huán)［29-31］。因此Lp-PLA2可加重CVSD損傷，增加運(yùn)動障礙風(fēng)險(xiǎn)。腦損傷發(fā)生后BDNF是促進(jìn)神經(jīng)元存活和分化的關(guān)鍵，其水平下降能導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，引起神經(jīng)功能障礙，增加運(yùn)動障礙風(fēng)險(xiǎn)。研究認(rèn)為BDNF修飾的神經(jīng)干細(xì)胞移植可影響脊髓損傷大鼠的軸突再生與后肢運(yùn)動功能，說明BDNF水平異常參與運(yùn)動障礙的發(fā)生［32-40］。此外，本研究中Pearson相關(guān)性分析證實(shí)CVSD發(fā)生運(yùn)動障礙患者的FM評分與血清IMA、Lp-PLA2呈負(fù)相關(guān)，與BDNF水平呈正相關(guān)，與上述研究觀點(diǎn)一致，證實(shí)血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平參與CVSD患者運(yùn)動障礙的發(fā)生。

CVSD 患者存在血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平異常，且血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平是其運(yùn)動障礙的影響因素，而FM評分與血清IMA、Lp-PLA2水平呈負(fù)相關(guān)，與血清BDNF水平呈正相關(guān)。因此可考慮將IMA、Lp-PLA2、BDNF 作為CVSD 的診斷及預(yù)后預(yù)測標(biāo)志物。