AQP4-IgG陽性與AQP4-IgG陰性NMOSD的臨床學比較研究

武國良，彭 濤

視神經脊髓炎譜系疾病(NMOSD)是一種嚴重的中樞神經系統炎癥性脫髓鞘疾病，主要影響視神經和脊髓。據估計，每10萬人中約有0.5～10人患NMOSD，其中偏愛亞洲人和女性[1]。可根據核心臨床特征、血清水通道蛋白抗體及神經影像學特征進行診斷[2]。NMOSD患者表現為單發或復發性視神經炎、縱向廣泛的橫向脊髓炎和腦部病變，可導致嚴重殘疾甚至死亡。有60%～90%符合NMOSD診斷標準的患者可以檢測到AQP4-IgG，甚至有專家學者提出AQP4-IgG陰性的NMOSD是否存在。然而，一些NMOSD患者在急性期使用高敏感的細胞分析法(CBA)進行重復檢驗，AQP4-IgG仍然陰性。同時，AQP4-IgG陰性NMOSD患者在臨床發病特點上不同于AQP4-IgG陽性患者，具體機制目前尚不清楚。

1 資料和方法

1.1 研究對象 對2015年9月至2019年9月鄭州大學第一附屬醫院神經內科收治的345例 NMOSD患者進行回顧性分析。所有患者均處于急性期(初次發病或復發1 m內)，并由至少兩位神經內科專家根據2015年NMOSD國際標準共同診治[2]。復發定義為新發癥狀持續24 h并有客觀的神經系統體征或新發的影像學改變。納入標準：(1)已知AQP4-IgG血清學狀態；(2)滿足2015年NMOSD國際診斷標準(見表1)。排除標準如下：(1)AQP4-IgG血清狀態未知；(2)隨訪數據缺失；(3)共存其他可能影響EDSS的神經或眼科疾病；(4)寡克隆免疫球蛋白(OCB)或副腫瘤相關抗體陽性；(5)共存其他可能影響診斷的疾病(如：淋巴瘤、脊髓血管病變、脊髓或腦部感染性病變等)。本研究經鄭州大學第一附屬醫院倫理委員會批準，獲得患者的知情同意。

表1 2015視神經脊髓炎譜系疾病(NMOSD)診斷標準

1.2 研究方法 記錄所有入組病例的人口學、臨床表現、血液學化驗、腦脊液化驗及磁共振影像學資料等。所有患者使用基于轉染細胞分析法(cell based assays，CBA)或間接免疫熒光法行血AQP4抗體檢測，部分患者同時行血MOG-IgG檢測。大部分患者同時送檢血樣檢測IgG寡克隆區帶(OCB)、抗核抗體、同型半胱氨酸、維生素B12、血沉、C反應蛋白及血常規等。同時大部分患者在入院后接受腰穿檢查，送檢腦脊液常規、生化、細胞學、OCB。采用3.0T MRI進行頭及脊髓MRI檢查，成像序列包括T1加權像、T2加權像、液體衰減反轉恢復序列(FLAIR)、彌散加權成像(DWI)。MRI檢查結果由放射科專家與神經內科專家一起評定。

2 結 果

2.1 一般資料 共有345例NMOSD患者，AQP4-IgG陽性組244例(71%)，AQP4-IgG陰性組101例(29%)；陽性組與陰性組分別有39和26例患者送檢MOG-IgG，其中陰性組出現2例MOG-IgG陽性患者。共有女性279例(81%)，其中陽性組214例，陰性組65例；男性66例(19%)，陽性組30例，陰性組36例。陽性組女性發病率明顯高于AQP4-IgG陰性組(P=0.000)。起病年齡10-82歲不等，平均起病年齡(41.20±16.60)，陽性組(42.15±15.78)，陰性組(38.93±18.31)。陽性組平均起病年齡高于陰性組，但組間差異不顯著(P=0.101)。AQP4-IgG陽性與AQP4-IgG陰性NMOSD患者臨床特征見表2。

表2 兩組NMOSD患者的臨床特點比較

2.2 臨床特點 臨床疾病進程中有脊髓炎發作者313例(91%)，陽性組225例，陰性組88例；有視神經炎者221例(64%)，陽性組141例，陰性組80例；有腦部病變者163例(47%)，陽性組95例，陰性組68例；既有視神經炎又有脊髓炎者195例(57%)，陽性組127例，陰性組68例。AQP4-IgG陰性組的腦部病變、視神經炎及既有視神經炎又有脊髓炎的發病率明顯高于陽性組(P=0.000；P=0.000；P=0.012)，脊髓炎發病率在兩組間無統計學差異(P>0.05)。

2.3 MRI影像學特點 脊髓病變常累計頸胸髓，且常同時受累，腰髓極少受累。脊髓病變節段數介于1～20不等，以長節段病變為主，可不連續；平均脊髓病變節段數(7.23±4.30)，陽性組(7.19±4.28)，陰性組(7.34±4.37)；共有9例患者累計腰髓，陽性組6例，陰性組3例，脊髓病變節段及腰髓受累在兩組間無統計學意義(P>0.05)。腦部病灶形態多樣，多呈斑片狀、點片狀分布，邊界清晰或模糊，呈長T2信號，部分病灶可呈斑點狀、條片狀強化。延髓是最常見的受累部位，腦干、大腦皮質、丘腦、橋臂、基底節、小腦半球、側腦室旁白質、胼胝體、大腦腳、半卵圓中心等部位也可受累。共有78例患者累計延髓，陽性組44例，陰性組34例，AQP4-IgG陰性組延髓受累率明顯高于陽性組(P=0.003)。幕上病變患者80例，陽性組43例，陰性組37例，兩組間差距不明顯(P>0.05)。

2.4 血及腦脊液化驗結果 抗核抗體譜陽性患者143例(41%)，陽性組122例，陰性組21例；AQP4-IgG 陽性組抗核抗體譜陽性率明顯高于陰性組(P=0.000)。平均維生素B12濃度(1140.39±719.80)，陽性組(1345.74±1518.18)，陰性組(876.08±656.96)；平均同型半胱氨酸濃度(13.30±10.80)，陽性組(11.84±4.85)，陰性組(17.11±18.85)；平均血沉(15.05±16.29)，陽性組(16.55±16.52)，陰性組(10.92±14.96)。平均C反應蛋白濃度(6.96±19.94)，陽性組(6.68±18.14)，陰性組(8.12±24.27)。AQP4-IgG陽性組維生素B12、血沉明顯高于陰性組(P=0.015；P=0.009)，AQP4-IgG陰性組同型半胱氨酸明顯高于陽性組(P=0.001)，C反應蛋白在兩組間無統計學意義(P>0.05)。平均白細胞計數(7.42±2.95)，陽性組(7.30±3.03)，陰性組(7.71±2.73)；平均血紅蛋白濃度(124.62±14.52)，陽性組(123.01±14.88)，陰性組(128.44±12.90)；平均血小板計數(232.17±72.78)，陽性組(228.18±75.71)，陰性組(241.68±64.62)。AQP4-IgG陰性組血紅蛋白值明顯高于陽性組(P=0.002)，白細胞及血小板計數在兩組間差異不大(均P>0.05)。腦脊液白細胞計數(19.97±47.98)，陽性組(21.34±51.54)，陰性組(18.27±39.96)；腦脊液淋巴細胞百分數(0.73±0.13)，陽性組(0.733±0.137)，陰性組(0.729±0.114)；腦脊液蛋白定性陽性患者95例，陽性組67例，陰性組28例。腦脊液中的白細胞數、淋巴細胞比率及蛋白定性在AQP4-IgG 陽性與陰性組間均無統計學差異(均P>0.05)。

2.5 共患其他自身免疫性疾病 共患其他自身免性疫疾病患者41例(12%)，陽性組37例，陰性組4例。AQP4-IgG 陽性組其他自身免疫性疾病共患率明顯高于陰性組(P=0.003)。

2.6 治療及轉歸情況 急性期兩組患者均采用大劑量激素沖擊治療，對激素不敏感患者加用免疫球蛋白治療，效果可；緩解期兩組患者均口服小劑量潑尼松；共有166例(47%)患者使用免疫抑制劑，陽性組127例，陰性組39例；陽性組免疫抑制劑使用率明顯高于陰性組(P=0.025)。總隨訪時間(40.45±19.90)月，陽性組(40.26±19.04)，陰性組(40.71±21.295)；隨訪時間在兩組間差距不大(P>0.05)。隨訪時間內共有213例(62%)患者復發，陽性組154例，陰性組59例；總發作次數(2.43±1.77)，陽性組(2.52±1.84)，陰性組(2.22±1.60)。復發例數及總發作次數在兩組間無差距(P>0.05)。最低點EDSS評分(4.244±2.08)，陽性組(4.304±2.1)，陰性組(4.162±2.1)；最后1次隨訪時EDSS評分(1.444±1.16)，陽性組(1.543±1.3)，陰性組(1.39±1.0)；兩次EDSS評分在兩組間均無統計學意義(均P>0.05)。

3 討 論

NMO最初被稱為毀滅性的視神經脊髓炎癥性脫髓鞘疾病，是指同一患者視神經炎和脊髓炎的共同發生。2004年發現了AQP4-IgG這一種特定的疾病生物標志物，從而對這種疾病有了新的認識，該生物標志物最初被稱為“NMO-免疫球蛋白G”(NMO-IgG)，第二年確定了其靶抗原水通道蛋白-4(AQP4)。隨后AQP4-IgG被正式納入2006年診斷標準[3]，盡管NMO的診斷仍然需要視神經炎和脊髓炎這兩個條件。術語“NMOSD”首次被引入是在2007年[4]，當時發現AQP4-IgG與NMO相關。2015年國際專家組(IPND)在診斷標準中提出了整個臨床綜合征的術語“NMOSD”，并將該疾病分為AQP4-IgG陽性NMOSD和AQP4-IgG陰性NMOSD(或未知血清狀態)[2]。但現已有多項研究證實了AQP4-IgG陰性與陽性NMOSD患者存在很多差異[5，6]。

在我們的研究中，女性與男性發病率之比約4∶1，陽性組約7∶1，陰性組約2∶1。兩組的女性發病率都明顯高于男性，但陽性組的女性發病率顯著高于陰性組。這與其他研究相一致[7，8]。陽性組與陰性組的平均發病年齡分別為42和39歲，陽性組的起病年齡稍大于陰性組，但差異不明顯[8]。另一項研究發現AQP4-IgG陰性患者發病年齡較小，女性比例較高[9]。

我們發現脊髓炎是最常見的臨床發作形式，視神經炎及腦部病變次之。91%的NMOSD患者經歷過至少1次橫貫性脊髓炎發作，陽性組92%，陰性組87%；64%的NMOSD患者有視神經炎，陽性組與陰性組分別有58%和80%；47%的NMOSD患者有腦部病變，陽性組39%，陰性組67%；57%的NMOSD患者或同時或先后經歷過脊髓炎和視神經發作，其中陽性組52%，陰性組67%。與陽性組相比，陰性組患者更容易出現視神經炎、腦部病變及脊髓炎和視神經炎[10]。其他研究亦發現血清陰性組同時發生視神經炎和脊髓炎更為常見[8，11]。另一項關于AQP4-IgG陽性與陰性NMOSD患者長期MRI表現的研究[12]發現血清陰性組有更多患者在起病時發生腦損害，血清陽性組患者隨著時間的推移容易發生腦損害，之后隨訪時兩組間差異消失。廣泛腦病變的存在可能預示著更高的疾病活動性和更差的預后，在NMOSD患者中，全身炎癥可能是廣泛腦病變形成的關鍵因素[13]。

NMOSD常表現為長節段橫貫性脊髓炎(LETM)，多累及頸胸髓，腰髓受累較為少見，軸位上病灶多位于脊髓中央。我們發現陽性組與陰性組的腰髓受累率及脊髓病變節段數相似[10]。但我們在以前的研究中注意到血清陽性患者脊髓受累節段數更多[8，12]，未來需要其他研究來驗證。腦部病灶形態多樣，多呈斑片狀、點片狀分布，邊界清晰或模糊，呈長T2信號，部分病灶可呈斑點狀、條片狀強化。延髓是最常見的受累部位，腦干、大腦皮質、丘腦、橋臂、基底節、小腦半球、側腦室旁白質、胼胝體、大腦腳、半卵圓中心等部位也可受累。延髓受累在陰性組更常見，但惡心嘔吐等極后區綜合征較少見；幕上病變在兩組間無明顯差距。其他研究發現陽性與陰性患者在幕上腦病變、腦干病變方面無統計學差異[8]。

在我們的研究中，143例NMOSD患者抗核抗體譜陽性，在內分泌科專家的協助診斷下，41例患者滿足SS/SLE等常見自身免疫性結締組織病的診斷標準，陽性組37例，陰性組3例。其中干燥綜合征最常見，系統性紅斑狼瘡次之，類風濕性關節炎、甲亢、重癥肌無力、強直性脊柱炎等相對少見。我們的結果與既往研究一致，AQP4-IgG陽性NMOSD患者常與SS/SLE或非器官特異性自身抗體并存，但其是一個獨立的疾病實體，而不是SS/SLE的血管病變或其他并發癥[14]。對中國NMOSD及MS患者進行抗核抗體譜篩查，NMOSD患者的血清陽性率明顯高于MS患者，抗核抗體和AQP4-IgG顯著提高了NMOSD診斷試驗的敏感性，而不影響特異性，并可能促進早期干預[15]。

AQP4-IgG陰性組的同型半胱氨酸(Hcy)及血紅蛋白值明顯高于陽性組，陽性組的維生素B12及血沉值明顯高于陰性組；同時，陽性組的Hcy及陰性組維生素B12均值都高于正常值范圍，兩組的血沉及血紅蛋白值均在正常值范圍。目前關于Hcy對免疫系統影響的研究較少，但Hcy與T、B淋巴細胞等免疫細胞的相關性是明確的[16，17]。Hcy可通過多條炎癥通路損傷血管內皮細胞，破壞血腦屏障，還可以影響內皮細胞釋放細胞因子，激活或募集中性粒細胞等炎性細胞到達局部，進一步加重對血腦屏障的損傷[18]。因此，高同型半胱氨酸(Hhcy)可能通過上述機制，使炎性細胞及炎性因子大量進入中樞，對神經細胞造成損傷。有研究發現HHcy與阿爾茨海默病、帕金森病等神經變性疾病相關，但具體機制仍不是很清楚[19，20]。此外，血漿Hcy水平升高不僅在MS患者中觀察到，而且與MS的進展有關[21]。其他研究發現EDSS評分≥4的急性期NMOSD患者Hcy和ESR水平顯著升高[22]。維生素 B12可能通過參與“葉酸循環”而對Hcy的代謝起著關鍵作用。VitB12含量不足時Hcy無法繼續合成甲硫氨酸，導致大量Hcy蓄積于血液之中，因而推測VitB12可能通過調節Hcy的代謝而影響炎癥過程。故維生素B12及同型半胱氨酸可能在NMOSD患者的發病過程中發揮一定的作用。有研究發現在伴有廣泛腦損害的NMOSD患者中，平均EDSS評分與ESR存在顯著正相關，這一結果提示了炎癥與疾病活動和NMOSD臨床殘疾之間的潛在聯系[13，22]。與陰性組相比，陽性組血紅蛋白值較低可能與血液系統免疫性疾病有關，也可能是由較低的維生素B12造成的。陽性組有1例患者合并自身免疫溶血性貧血，曾有過關于NMOSD合并自身免疫性溶血的個案報導[23]。此外，腦脊液白細胞、淋巴細胞百分數、蛋白定性在兩組間差距不明顯[8]。

2011年Mader等人第一次報告發表了AQP4-IgG血清陰性NMOSD患者中發現MOG-IgG介導的免疫應答；而在AQP4-IgG介導的體液免疫應答中，MOG不是目標抗原。現已有多項研究發現MOG-IgG陽性與AQP4-IgG陽性NMOSD在發病機制、臨床發病特點及治療反應方面均存在很大的差異。病理上，AQP4-IgG陽性NMOSD是一種自身免疫性星形細胞病變，而MOG-IgG陽性NMOSD是一種炎癥性脫髓鞘疾病。大約1/3至1/4的AQP4-IgG血清陰性NMOSD患者存MOG-IgG[24]，但我們僅在7%的AQP4-IgG陰性NMOSD患者中發現MOG-IgG。MOG-IgG陽性NMOSD有較高比例的男性，較年輕的發病年齡，多為白種人，以及在影像學上更有可能累及圓錐和深灰質結構。他們更多的表現為視神經炎和橫向脊髓炎，多為雙側同時發生視神經炎，單相病程較常見，預后更好[25]。

所有患者在急性期采用大劑量激素或免疫球蛋白治療后效果可，我們發現兩組患者急性發作期癥狀最重時的殘疾程度(EDSS評分)相當；緩解期47%的患者使用免疫抑制劑控制病情進展，陽性組患者的免疫抑制劑使用率明顯高于陰性組，硫唑嘌呤最常用，嗎替麥考酚酯分散片次之，環磷酰胺、他克莫司、利妥昔單抗相對少用。經過40個月左右的隨訪后，62%的患者復發，但復發患者例數、總發作次數及最后1次隨訪時的EDSS評分在兩組間差距不明顯[10，26]。其他研究發現血清陰性患者更常見的是單相病程，陽性患者更常見復發[8]。這可能跟我們陰性組患者的免疫抑制劑使用率低有關。

我們的研究有一些局限性：首先，這是一項回顧性研究，我們的數據是基于我們醫院的病歷記錄。其次，只有小部分患者進行了MOG抗體檢測，所以我們的數據不足以分析MOG抗體陽性患者亞群。最后，由于是單中心研究，結果可能不能推廣到其他人種。未來需要進一步的設計研究來更加詳細具體的探討NMOSD及各亞組患者的疾病特征。

4 結 論

雖然2015版NMOSD的診斷標準把血清AQP4-IgG陽性與陰性患者都歸為NMOSD，但兩組患者的臨床疾病特征還是存在差異的。AQP4-IgG陽性組女性發病率、血清抗核抗體譜陽性率及其他自身免疫性疾病共患率更高，其維生素B12及血沉值也高于陽性組；AQP4-IgG陰性組更常見視神經炎、腦病變及既有視神經炎又有脊髓炎，其同型半胱氨酸及血紅蛋白值更高。隨著MOG-IgG在AQP4-IgG陰性NMOSD患者中的出現，多項研究證實了其與AQP4-IgG陽性患者在發病機制、臨床發病特點方面存在差異，使人們開始意識到NMOSD患者可能應該被重新分類。但是關于陰性NMOSD患者的發病機制、臨床特點、治療及其預防復發等仍存在很多未知，需要進一步的研究。