海水池塘養殖縊蟶病原研究

袁 甜

(丹東市漁業發展服務中心，遼寧 丹東118000)

縊蟶(Sinonovacula constricta)在遼寧省丹東地區俗稱“小人仙”，主要分布在中國、日本和朝鮮等國的沿海地區。縊蟶作為中國四大海水養殖貝類之一，養殖歷史悠久。縊蟶營埋棲生活，具有生長快、產量高、味道鮮美且營養豐富的特點，深得廣大消費者的喜愛。因縊蟶的濾食性特點，在北方海水池塘養殖中常將縊蟶作為底層貝類與魚、蝦、海蜇等經濟生物進行混養。隨著縊蟶養殖規模的擴大、密度的增加，生長緩慢、死亡等現象日趨嚴重，這就直接導致了養殖戶經濟收入的下降甚至虧損。本文對海水池塘養殖縊蟶進行病原研究，旨在通過本研究查找死亡原因，“對癥下藥”盡早預防，提高縊蟶產量和減少養殖戶經濟損失。

一、材料與方法

1.試驗材料

選取丹東東港縊蟶海水養殖池塘5口，池塘分布在4個沿海鄉鎮，平均面積為5.3公頃、水深1.8米，池底為泥沙底，含泥量為80%左右，利用池底10%面積做的蟶田進行縊蟶養殖，縊蟶放苗時間相同，苗種來源一致。養殖模式為縊蟶、中國對蝦、海蜇混養。在縊蟶易發病季節即7－9月，平均每10天采集縊蟶樣品1次，采集數量為150枚。感染試驗用健康縊蟶取自東港某健康養殖場。

2.試驗方法

(1)測量及解剖鏡下觀察。將采集回實驗室的縊蟶稱重、測量，并在解剖鏡下觀察，記錄體重以及鏡檢狀態。

(2)細菌分離。取有病癥的活縊蟶，在無菌條件下用一次性無菌接種針取縊蟶鰓、外套膜和消化道，劃線在TSC和TCBS培養基上培養，25℃恒溫培養24小時，挑取優勢單菌落在TSC平板上純化培養后移入試管斜面中保存。

(3)細菌鑒定。生化鑒定選用法國梅里埃生物公司生產的微生物自動分析系統進行生化特征分析。分子生物學鑒定為將分離菌擴增、16s rDNA基因序列測序后進行Blast比對，結果顯示菌株與相應基因相似率達99%。

3.人工感染試驗

選擇健康的縊蟶供感染試驗用。將培養約18小時的供試菌制成菌懸液，離心(3 000轉/分)8分鐘，棄上清液，用無菌生理鹽水制成菌懸液。試驗組和對照組水體均為10升，試驗組和對照組縊蟶數量為50個，試驗組水體中將菌稀釋為約107CFU/毫升，溫度控制在(23±0.5)℃，鹽度20，連續充氣，觀察縊蟶發病癥狀及死亡情況。

4.水質理化指標的測定

用便攜式水質分析儀檢測水溫、溶氧、鹽度、pH，用多參數水質分析儀檢測氨氮、亞硝酸鹽、磷酸鹽、化學耗氧量。

二、結果與分析

1.縊蟶生長情況

根據3個月的生長跟蹤，5口池塘縊蟶表現出不同的生長情況，9月30日取樣測量情況(表1)可以看出，1號和5號池塘縊蟶長勢良好，2、3、4號池塘縊蟶長勢均表現不佳。并且在跟蹤調查中發現2、3、4號池塘縊蟶均有不同程度的發病以及死亡現象。

表1 縊蟶生長情況

2.分離菌株的檢定

從縊蟶鰓、外套膜、腸道分離得到24株菌株，用全自動細菌分析儀對病原菌初步鑒定，結果分別為殺鮭氣單胞菌、溶藻弧菌。將分離菌擴增、16s rDNA基因序列測序后進行Blast比對，結果顯示菌株與相應基因相似率達99%。

3.人工感染試驗

人工感染24小時后縊蟶開始出現死亡，感染48小時后，溶藻弧菌菌株感染縊蟶死亡率達到100%，殺鮭氣單胞菌菌株感染縊蟶死亡率達到48.8%。感染縊蟶主要表現為閉殼肌松弛、開合無力、對外界刺激反應遲鈍。對每組感染死亡的縊蟶解剖，取鰓、外套膜、腸道分離得到的細菌與感染菌株一致。對照組縊蟶無死亡。

4.水質指標和病原菌對縊蟶生長情況的影響

池塘水溫22～28℃、溶氧4.7～5.6毫克/升，但是根據監測顯示2、3、4號塘口氨氮和亞硝酸鹽含量超標(表2)，同時在2、3號塘口分別檢測出殺鮭氣單胞菌和溶藻弧菌。這一檢測結果與縊蟶生長情況吻合，2、3、4號塘口生長不佳，2、3號塘口出現患病死亡縊蟶。

表2 水質指標和病原菌對縊蟶生長情況比對

三、討論

縊蟶作為海水池塘底層養殖的主要品種，其產量的多少決定了池塘的經濟效益，通過3個月的生長跟蹤發現，水質指標中氨氮和亞硝酸鹽反映了池塘水質的好壞，同時也是造成縊蟶增減的原因之一，導致縊蟶發病以及死亡的主要病原菌為殺鮭氣單胞菌和溶藻弧菌。在養殖過程中病害防治應該始終貫徹“預防為主、防治結合”的方式，建議養殖戶堅持每年翻新蟶田，利用冬季充分曬田，選擇優質蟶苗，適時地進行水質調節、底質改良等。