不同培養時間對決明子芽菜生物學產量 和黃酮含量的影響

◎ 陳紅芝，郭中甲，趙 琴

（河南科技學院新科學院，河南 新鄉 453003）

決明子為豆科植物決明或小決明的干燥成熟種子，作為一種保健食品的原料越來越被人們重視，極具開發應用價值[1]。芽菜是指利用植物種子或營養器官，在陽光的照射或黑暗的條件下培育出的可以食用的幼苗、幼莖。因其綠色無污染、食用安全，部分芽菜更具一定的藥用或保健價值[2-3]，深受歡迎。決明子芽菜生長周期短，產率高，口感較好，可以作為蔬菜食用。黃酮類化合物具有抗菌、抗光敏、抗氧化、解毒和增白等作用[4]，決明子功能與其含有的黃酮密切相關。本文通過研究培養時間對決明子芽苗菜生物學產量以及黃酮含量的影響，為充分發揮芽菜便于栽培成本低的優點，提高決明子的醫療藥用價值，制定合適的采收期提供了參考依據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料、試劑與儀器

材料：當年飽滿度和大小基本一致的決明子種子。

試劑：蘆丁、無水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁和氫氧化鈉。

儀器：722N 可見分光光度計（上海儀電儀器分析有限公司）、JCD-001 家用自動豆芽苗菜機（浙江健龍科技永康市建龍健身器材廠）。

1.2 實驗方法

選取當年飽滿度和大小一致發芽率高的決明子種子，恒溫60 ℃溫水中浸泡20 min，濃度1 000 mg·L-1的二氧化氯溶液浸泡30 min 進行消毒處理，之后用清水沖洗干凈備用。

每個培養期設置3 個重復，標注為A1、A2、A3，分別取決明子種子15 g 播種于不同的豆芽菜自動培養機發芽盒中，插電在20 ℃下培養，每隔1 h 澆水一次。每隔1 d 按上述處理播種一次，第2 批為B1、B2、B3， 第3 批 為C1、C2、C3， 第4 批 為D1、D2、D3，第5 批為E1、E2、E3。

每天為豆芽機進行換水處理，觀察芽苗菜的生長狀況，播種5 次。在13 d 時一同收割，并在同一時間進行黃酮的提取和測定。第1 批生長期為13 d，第2批為11 d，第3 批為9 d，第4 批為7 d，第5 批為5 d。采摘后進行生物學產量的測定，烘干粉碎放置備用。

1.3 制作標準曲線

配 制 濃 度 為0.0101 mg·mL-1、0.0202 mg·mL-1、0.0303 mg·mL-1、0.0404 mg·mL-1和0.0505 mg·mL-1的蘆丁對照品溶液，繪制蘆丁標準曲線[5]。

1.4 超聲波提取

將決明子芽菜分別放入電熱恒溫干燥箱中60 ℃下烘干6 h，再用高速多功能粉碎機進行粉碎。稱取粉碎好的決明子芽菜1 g，用65%的乙醇溶液作溶劑，按照料液比1 ∶40（g·mL-1），在20 ℃下用超聲波清洗機提取25 min，后用真空泵抽濾。用65%的乙醇定容到50 mL 的容量瓶中，移取濾液1 mL 于50 mL 的容量瓶中，用65%的乙醇溶液稀釋至25 mL，然后加入5%的亞硝酸鈉溶液1.50 mL 搖勻，放置5 min；移取10%的硝酸鋁溶液1.50 mL，搖勻，放置5 min；移取1 mol·L-1氫氧化鈉溶液20.00 mL，各移取65%的乙醇溶液定容至刻度線，搖勻，放置15 min 待測。

2 結果與分析

2.1 標準曲線

配制一定濃度梯度的蘆丁對照品溶液，繪制蘆丁標準曲線。可得回歸方程為Y=9.652.1X+0.008，相關系數R2=0.997 1。蘆丁標準曲線見圖1。

圖1 蘆丁標準曲線圖

2.2 不同生長期決明子芽菜的生物學產量

由表1 可知，不同生長期決明子芽菜的胚根長度、子葉長度、胚軸長度、單株鮮重和單株凈菜重在7 d采收時均高于5 d 采收，且差異顯著，7 d 后各指標數值雖呈增加趨勢，但是差異不顯著，如果單從生物學產量上來講決明子芽菜7 d 就可以采收。

表1 不同生長期決明子芽菜的生物學產量表

2.3 不同生長期黃酮含量的測定

通過超聲波輔助法對決明子芽菜中黃酮進行提取，每個生長期做3 個重復，使用分光光度計在510 nm處測定黃酮的吸光度，通過蘆丁標準曲線方程Y=0.101 2X計算樣品中黃酮的含量，結果如表2、表3 所示。

表2 不同生長期決明子芽菜的黃酮的吸光度表

表3 不同生長期決明子芽菜的黃酮含量表

由表3 可知，黃酮含量隨生長期增長不斷增加，但在5 d、7 d、9 d 和11 d 之間差異不顯著，13 d 時黃酮含量最高為16.17 mg·g-1，且與之前不同生長期差異顯著。但綜合考慮時間成本和黃酮含量，決明子芽菜7 d 天采收比較合適。

3 結論

實驗結果表明，決明子發芽7 d 以后生物學產量差異不顯著，從時間和成本考慮，第7 d 采收比較合適，雖然此時決明子芽菜內黃酮的含量為12.14 mg·g-1，但是與第9 d 天決明子芽菜內黃酮的13.43 mg·g-1，11 d天的決明子芽菜內黃酮的13.69 mg·g-1之間差異不顯著。第13 d 決明子芽菜內黃酮的含量雖然為最大值16.17 mg·g-1，但從實際生產角度考慮，培養時間較長，在生長期容易感染。總之，綜合考慮生物學產量、黃酮含量和時間成本，決明子芽菜7 d 采收比較合適。