2014-2018年江蘇省禽類外環境禽流感病毒監測結果分析

余慧燕，許 可，黃昊頔，祁 賢，鮑倡俊

禽流感是由禽流感病毒(avian influenza virus，AIV)在各種家禽及野生禽類中引起疫病的傳染性疾病[1]。目前主要有H5、H7、H9三類亞型禽流感病毒可以感染人類。近年來，全球多個國家或地區發生各種不同亞型的禽流感疫情，波及范圍很廣，對養殖業造成重大損失。同時某些亞型禽流感病毒可以跨越宿主屏障對人類造成感染，這對人類健康及公共衛生安全構成了嚴重威脅。江蘇省地處我國長三角區域，水網密布，湖泊眾多，養殖業發達，是受禽流感病毒影響較大的省份之一。科學研究表明，禽類接觸史是人感染禽流感病毒的重要因素[2]。通過對活禽市場、家禽養殖場等高危場所的監控，可以對禽流感的流行規律及防控措施提供重要的參考意義。因此，本文旨在分析2014-2018年江蘇省禽類市場外環境禽流感病毒時空流行病學特征的研究，對于開展江蘇省禽流感的防控工作具有重要的指導意義。

1 材料與方法

1.1標本采集 在全省13個市設立城鄉活禽市場、家禽屠宰加工廠、家禽散養戶集中地區、家禽規模養殖場(戶)、野生候鳥棲息地5類監測場所；根據監測方案要求，隨機選取籠具表面擦拭標本、糞便標本、宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭標本、禽類飲水、清晰禽類的污水、其他等6類不同類型外環境涂抹拭子標本，共采集禽流感外環境標本27 942份。按照《人感染H7N9禽流感疫情防控方案(第3版)》的要求，所有采集的標本在4 ℃環境下保存，并保證在24 h內送至實驗室于-80 ℃環境下保存備用。

1.2標本檢測 從外環境標本中提取病毒 RNA后(ABI 全自動核酸提取儀，磁珠法核酸提取試劑盒購自ABI公司，貨號為AMB1836-5)，采用實時熒光定量 PCR 方法對所有標本進行流感病毒A通用(FluA) 的核酸檢測，其中陽性標本再進行 H5、H7、H9 禽流感亞型的分型檢測，甲型流感病毒及禽流感病毒 H5/H7/H9 亞型核酸檢測試劑盒購自江蘇碩世公司，貨號分別是 JC10103 和 JC10301)。

1.3方法 利用描述性流行病學方法分析江蘇省禽流感病毒的流行特征，利用Excel及ArcGIS軟件對數據進行整理，利用Matlab軟件對數據進行統計分析，率的比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義，地圖繪制及結果可視化利用ArcGIS軟件完成。

2 結 果

2.1基本情況 2014-2018年累計檢測覆蓋江蘇省13個行政區域內禽流感外環境標本27 942份(圖1)，檢測出A型通用陽性標本3 867份，陽性率為13.84%。其中，H5亞型陽性標本330份，H9亞型陽性標本1 905份，H7亞型陽性標本986份， H5和H9混合亞型標本157份，H9和H7混合亞型陽性標本293份，H5和H7混合亞型陽性標本116份，H5、H9、H7混合亞型陽性標本61份。

圖1 江蘇省各大市樣本采集情況Fig.1 Sample collection in each city of Jiangsu Province

不同檢測場所的外環境檢測標本陽性率(表1)表明：城鄉活禽市場是A型禽流感病毒高發場所，禽流感病毒陽性率為19.18%。不同檢測場所禽流感病毒檢出率差異具有統計學意義(χ2=17.405 8，P<0.05)。

不同標本類型禽流感病毒檢測結果(表2)表明：宰殺或擺放禽肉案板表面和清洗禽類的污水的禽流感病毒檢出率較高，陽性率分別為23.30%和20.61%。不同檢測標本類型的禽流感病毒檢出率差異具有統計學意義(χ2=5.527 7，P<0.05)。

表1 不同檢測場所禽流感病毒檢測結果Tab.1 Positivity rate of the bird flu samples in the external environment in different areas in Jiangsu province from 2014 to 2018

表2 不同標本類型禽流感病毒檢測結果Tab.2 Positivity rate of different types of bird flu samples in the external environment in Jiangsu Province from 2014 to 2018

2.2時間分布情況 2014-2018年外環境禽流感A型通用檢出率分別為12.46%、10.81%、20.41%、13.00%、12.55%，不同年份禽流感病毒檢出率差異不具有統計學意義(χ2=3.18，P>0.05)。

不同月份外環境禽流感病毒檢測情況見表3所示。各月份禽流感A型通用陽性率在0～26.68%之間，其中，2014年8月份陽性檢出率最低(0.43%)，2016年3月份陽性檢出率最高(26.68%)。

表3 2014-2018年不同月份外環境禽流感病毒陽性率檢出情況(%)Tab.3 Positivity rate of the bird flu samples in the external environment in Jiangsu Province in each month from 2014 to 2018 (%)

2014-2018年月平均外環境禽流感病毒陽性率檢出情況及變化趨勢如圖2所示。1月份和12月份禽流感外環境樣本A型禽流感病毒陽性檢出率最高，6-8月份禽流感外環境樣本A型禽流感病毒陽性檢出率最最低，全年各月份平均禽流感外環境樣本A型病毒檢出率呈“U”型分布，不同月份外環境禽流感A通用型檢出率差異具有統計學意義(χ2=24.39，P<0.05)。

圖2 2014-2018年月平均外環境禽流感病毒陽性率檢出情況及變化趨勢Fig.2 Average positivity rate of the bird flu samples in the external environment in Jiangsu Province in each month from 2014 to 2018

2.3地域分布情況 各行政區域外環境禽流感病毒標本檢測情況如圖3所示，江蘇省13個地級市行政區劃均有通用A型禽流感病毒核酸陽性檢出，陽性率在3.58%～22.37%之間。其中，淮安市禽流感A通用型陽性檢出率最低(3.58%)，鎮江市禽流感A通用型陽性檢出率最高(22.37%)其次是常州市(21.98%)和南京市(21.96%)，不同行政區域外環境禽流感A通用型檢出率差異具有統計學意義(χ2=26.61，P<0.05)。

圖3 各行政區域禽流感標本檢測情況Fig.3 Cases with avian influenza virus infection in each region of Jiangsu Province

3 討 論

自2013年中國發生人感染H7N9禽流感疫情以來，各地禽流感外環境監測工作被作為禽流感防控體系建設中的一項重要內容正逐漸得到重視[3]，相關研究證實禽流感病毒在外環境中大量存在，同時，人感染禽流感病毒與活禽市場和禽類暴露有關[4-5]。加強禽流感外環境病毒監測，對于動態跟蹤外環境中禽流感病毒的污染情況及指導相關部門有針對性的采取防控措施具有重要的指導意義。

研究結果表明，2014-2018年全年均有陽性禽流感病毒檢出，其中以12月(18.39%)和次年1月(20.58%)為較高，與季節性流感相似，呈現出明顯的冬季和春季的外環境禽流感病毒高發模式，該研究結果與以往研究結果一致[5-7]。因此，我們應加大每年春季和冬季的禽流感病毒監測力度，做好高發季節人感染禽流感病毒的防控工作。

通過對禽流感亞型進行分型發現，H9亞型是江蘇省禽流感外環境中主要存在的類型，與國內其他地區的相關研究報道一致[8-9]。

從地區分布上看，江蘇省不同行政區禽流感外環境樣本陽性檢出率具有顯著性差異，位居前3的分別為鎮江市(22.37%)、常州市(21.98%)和南京市(21.96%)。究其原因，主要是這些地區人口密度較大，活禽市場及交易攤位多，人員復雜，市場存在著監管不到位現象[10-11]。因此，應加強對陽性高發區的活禽交易市場的監管和指導。

活禽市場是人感染禽流感病毒的主要來源地[12-13]。本文通過比較不同監測場所的禽流感外環境標本發現城鄉活禽市場的禽流感病毒檢出陽性率最高，同時，不同類型標本的比較表明宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭標本以及清洗禽類的污水的禽流感病毒陽性檢出率最高。提示在禽類的宰殺和清洗環節中，暴露人員存在感染的風險，因此在禽流感防控工作中，要加強對城鄉活禽市場的管控，對宰殺或擺放禽肉的案板及清洗禽類的污水要及時進行消毒。同時，要通過各種媒體宣傳的形式，加強對大眾的健康教育宣傳，提醒禽流感病毒的傳播方式，預防措施和治療方法等，盡可能減少人感染禽流感病毒的風險。關閉活禽交易市場能有效降低人感染禽流感病毒的風險[14]，但是，單個城市的短期關閉活禽市場只能作為一種應急措施，短時期內降低市場環境對禽流感病毒傳播的風險，想要最大程度降低人感染禽流感病毒的風險，應采取區域性多個城市同步關閉活禽交易市場的措施[15]。此外，采用集中交易和宰殺的禽類交易模式是對政府和相關部門的一個考驗，政府應出臺相應的政策，對市場進行全方位監管，建立高效的應急響應機制，提高資源調度和利用水平。

利益沖突：無