枳椇果序軸水提取液對NASH的預防和治療研究

＊周敏 吳琪珍

（贛南衛生健康職業學院 江西 341000）

引言

枳椇又名雞爪子、拐棗、萬子果、南枳椇，是鼠李科枳椇屬的高大落葉喬木。分布于安徽、江蘇、浙江、江西、福建、廣東、廣西、湖南、湖北等地。野生枳椇在江西廣泛分布于峰山、九連山、五指峰，吉安等贛南地區。

枳椇含有大量的葡萄糖和蘋果酸鈣，具有較強的利尿作用，能促進乙醇的分解，顯著降低血液中的乙醇濃度，并能清除體內由乙醇產生的自由基，防止過氧化氫酶的形成，從而減少酒精對肝組織的損害，避免因酒精中毒而導致的各種代謝異常。

中藥枳椇性平、入脾、胃經，具有止渴功能，一直被世代醫家用于止渴解酒，適用于過度飲酒、醉不醒、口干煩渴等。《本草綱目》稱之為“甘平無毒，治頭風，小腹拘急”。《唐本草》記載其“止渴除煩，潤五臟，利大小便，去膈上熱，功用如蜜”。《滇南本草》稱其“治一切左癱右瘓，風濕麻木，能解酒毒”。《本草拾遺》記載“木蜜樹生南方，人呼白石木，枝、葉俱甜。嫩葉可生啖，味如蜜。老枝細破，煎汁成蜜，倍甜，止渴解煩也”。《滇南本草圖說》記載“補中益氣。痰火閉結于胸中，用此可解”。煮粥服食之，對飲酒過量、口干煩渴者尤其適宜。

關于枳椇的藥用部位，古今文獻有不同的記載，如《廣東中藥》指出枳椇藥用部位為果實，《中藥材手冊》規定藥用部位為“果實及肉質膨大的花序軸”，《陜西中草藥》提出枳椇藥用“果梗或種子”等。目前對枳椇抗乙醇作用的研究主要集中在種子部位，研究表明枳椇子乙酸乙酯提取物具有明顯的抗乙醇作用，但對其他部位抗乙醇作用機理的研究較少。

脂質過氧化損傷導致的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的發病機制尚未完全弄清。但是研究表明脂質過氧化是納什均衡中最重要的因素。本研究旨在建立高脂飲食致NASH模型，檢測肝組織中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的含量，探討脂質過氧化損傷對NASH的影響，研究枳椇不同部位水提物對肝組織中SOD含量的影響。

1.實驗分析材料

(1)實驗分析動物

60只雄性SD大鼠，清潔級，重200-250g，由浙江省實驗分析動物中心提供，許可證號為SYXK（浙江）2005-0074，存放于浙江省醫學科學院實驗分析動物中心。

(2)主要試劑

超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒、丙二醛（MDA）試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）試劑盒（ADL），購自上海浙北生物科技有限公司。

(3)藥物制備

制備枳椇不同部位的水提取物：取自江西產枳椇不同部位壓平，放入小萃取器中，加水，萃取兩次，合并濾液，得到枳椇不同部位的水提取物0.2g/ml；制備聚烯磷脂酰膽堿和硫普羅寧的混合物：硫普羅寧片（凱西萊，批號：061207）和多烯磷脂酰膽堿片（易善復，批號：d8096，賽諾菲（北京）制藥有限公司。）制成粉末，加入蒸餾水，制備出含鈣石6mg和易善復13.68mg的混合溶液。

2.實驗分析方法

(1)造模

用高脂飼料（100g/kg豬油+膽固醇）喂養正常大鼠12周，建立實驗分析NASH模型。

(2)給藥及分組

將四十只SD大鼠隨機分為正常組、模型組、對照組、枳椇不同部位組。模型組每天給予10ml/kg蒸餾水，喂養2次；正常組每天給予標準飼料和10ml/kg蒸餾水，喂養2次；枳椇不同部位每天給予10ml/kg水提取物，然后服用2次。對照組給予多烯磷脂酰膽堿和硫普羅寧的混合物，每天10ml/kg，連續12周。

(3)觀察指標

處死大鼠，取肝組織上清液和生理鹽水（1:9）勻漿。化學比色法測定谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。采用He染色法對肝組織進行染色，根據脂肪肝和酒精性肝病（脂肪變性）診斷標準觀察肝組織病理變化。

(4)統計學處理

資料用（±s）表示，用spss13.0軟件包處理，用單因素方差分析。

3.實驗分析結果

(1)肝組織脂肪變性、炎癥程度積分

模型組肝組織脂肪變性及炎癥程度積分較正常組明顯增高，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01），提示造模成功。不同部位枳椇果序軸組、對照組肝組織脂肪變性及炎癥程度積分較模型組明顯減輕，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01）。不同部位枳椇果序組脂肪變性及炎癥程度與對照組比較，差異無顯著性意義（P＞0.05）。

(2)肝組織MDA、SOD、GSH-Px含量

模型組肝組織MDA較正常組明顯增高，SOD、GSH-Px較正常組明顯減低，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01）；不同部位枳椇果序軸組、對照組肝組織MDA較模型組明顯減低，SOD、GSH-Px較模型組明顯增高，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01）。不同部位枳椇果序軸組MDA、SOD、GSH-Px與對照組比較，差異無顯著性意義（P＞0.05）。

4.討論

目前對NASH的治療主要采用降脂藥、抗氧化劑、保肝藥和胰島素增敏劑等方法。由于病機復雜，診斷特異性差，療效不佳。

枳椇可以用作食物和藥物。“香甜，本草甘露，無毒”。解渴、清熱、滋潤五臟、緩解便秘。也可以用來滋養和保護肝臟。結果表明，枳椇不同部位對脂肪肝有較好的防治效果。近年來，筆者采用不同部位的枳椇治療非酒精性脂肪性肝炎，取得了良好的療效。結果表明，脂質過氧化在非酒精性脂肪性肝炎的發生發展中起重要作用，枳椇果序軸水提物對非酒精性脂肪性肝炎有良好的預防作用，其機制可能與阻斷脂質過氧化鏈反應、降低丙二醛生成、提高肝組織SOD水平和GSH-Px活性有關。

此外，在肝臟保護方面，也有不少學者進行了深入的研究。劉秀玲等研究了枳椇子提取物對基質金屬蛋白酶-13（MMP-13）和金屬蛋白酶組織抑制因子-1（TIMP-1）表達的影響。趙燕平等研究了枳椇子對高脂飲食誘導脂肪變性大鼠肝損傷的防治作用。宋娟觀察枳椇子對肝纖維化大鼠血脂脂質過氧化的動態影響。HASEK研究了長期乙醇喂養大鼠脂多糖（LPS）誘發的肝損傷。