朱 娟,周 英,唐少華
(1.中南大學湘雅三醫院檢驗科,長沙 410013;2.長沙市中心醫院檢驗科,長沙 410004)
急性髓性白血病(Acute Myeloid Leukemia,AML)是急性白血病中常見的類型之一,是臨床髓系造血干/祖細胞惡性疾病,其主要特征為骨髓、外周血中原始及幼稚髓樣細胞發生異常增生[1]。成人總體發病率75.3/10萬人,死亡率53.4/10萬人,發病率及死亡率在成人所有惡性腫瘤中位居第13位和第9位[2]。因此,研究AML發生發展的分子機制,提高AML的生存率,具有重要的臨床意義。
微小 RNA(MicroRNAs,miRNAs)是一類長度很短的非編碼調控單鏈小分子RNA,約22nt,通過5’端6~8個序列(種子序列)與其靶基因的mRNA分子的3’端非編碼區域(3’UTR)互補配對在轉錄后水平上對基因的表達進行負調控[3]。miRNA可導致mRNA的降解或翻譯抑制,從而進一步調控多種生物學行為如發育的進程、干細胞分化、細胞凋亡、疾病以及腫瘤發生等[4]。研究表明,miR-186在慢性淋巴細胞白血病、自身免疫溶血性貧血、多發性骨髓瘤以及AML患者中均有表達下調,其低表達與患者的不良預后密切相關[5],但其具體機制未見報道。因此,本研究對miR-186在AML細胞中的功能及作用機制進行探討。
1.1 骨髓標本收集中南大學湘雅三醫院和長沙市中心醫院2018年8月~2019年8月血液科初診為AML的患者骨髓標本(60例)。另外收集了20例正常供者骨髓標本作為正常對照。所有標本的使用獲得了醫院倫理委員會的同意和患者或家屬的知情同意。
1.2 主要試劑TRIZOL購自Invitrogen公司,逆轉錄試劑盒購自TaKaRa公司,熒光定量PCR試劑盒購自羅氏公司,MTT試劑盒購自……