化學發光法與酶聯免疫吸附法診斷乙肝病毒感染的臨床價值對比

杜明娟 陳 萍

山東省淄博市張店區第二人民醫院檢驗科,山東 淄博 255000

乙肝病毒在臨床上擁有較高的感染率，若不及時采取有效的措施控制，病情發展會不斷進展成肝硬化、肝炎、肝癌等嚴重性肝病，威脅患者身體健康與生命安全。近年來，我國乙肝的發病率呈現出有所上升的趨勢，如何預防和治療乙肝已經成為醫學界亟待解決的重大問題。臨床上檢驗乙肝病毒感染的血清標志物檢測技術以化學發光免疫分析技術(CLIA)與酶聯免疫吸附法(ELISA)最為常見，本文就二者用于乙肝病毒感染診斷中的價值展開對比。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧分析我院于2018年1月至2019年12月這段時間收治的行乙肝病毒血清標志物檢驗的64例患者臨床資料，男、女分別為38例、26例，年齡23歲～75歲，中位年齡(53.64±5.34)歲。

1.2方法

1.2.1CLIA 儀器與試劑均為深圳新產業提供的化學發光儀及配套試劑；采集患者晨起空腹肘部靜脈血5.0ml，分別將校準品、樣本加80微升,熒光素標記物加100微升,磁性微球溶液加20微升，混勻，37℃環境下溫育10分鐘，上磁分離器分離4分鐘，倒去上清；不取掉磁分離器，輕輕地沿試管壁加工作洗液400微升,靜置60秒，倒去上清，將上述步驟重復2次后再加入發光標記物100微升，混勻，37℃環境下溫育10分鐘，上磁分離器分離4分鐘，倒去上清。不取掉磁分離器，輕輕地沿試管壁加工作洗液400微升，靜置60秒，倒去上清，將上述步驟重復2次后放在化學發光儀上測定發光的強度，整個過程嚴格按照儀器及試劑說明書規范開展。

1.2.2ELISA 采集患者晨起空腹肘部靜脈血5.0ml，離心后取上清液用TEC ANSPECTRA的酶標儀檢測，將試劑和微孔反應條在室溫的環境下放置30min，再將待檢血清樣本加入至微孔反應條內，用封片將其封鎖處理，再放置為溫度為37℃的水浴箱中，1h后將其取出，去除微孔反應條內的液體，反復洗滌五次后，將試劑加入至反應條中將其放置在溫度為37℃的水浴箱中，30min后再取出，加入終止液，嚴格按照儀器和試劑的說明書開展[1]。

1.3觀察指標 統計兩種方法乙肝病毒感染的準確率以及HBsAg(乙型肝炎表面抗原)、HBsAb(乙型肝炎表面抗體)、HBeAg(乙型肝炎e抗原)、HBeAb(乙型肝炎e抗體)、HBcAb(乙型肝炎核心抗體)檢出率。

1.4統計學方法 數據統計分析應用SPSS21.0數據統計學軟件，n表示患者例數，以平均數和百分數表示計量資料和計數資料，用t和x2值進行檢驗，當P低于0.05時，表示統計的數據之間存在顯著差異。

2 結 果

2.1兩種方法診斷乙肝病毒感染的準確率 CLIA法檢出乙肝病毒感染共62例，準確率為96.88%；ELISA法檢出乙肝病毒感染共53例，準確率為82.81%，兩種方法的準確率比較具有統計學意義(P<0.05)。

2.2兩種方法陽性檢出率對比 CLIA法檢出HBsAg38例(59.38%)、HBsAb12例(18.75%)、HBeAg22例(34.38%)、HBeAb14例(21.88%)、HBcAb50例(78.13%)；ELISA法檢出HBsAg20例(31.25%)、HBsAb12例(18.75%)、HBeAg14例(21.88%)、HBeAb4例(6.25%)、HBcAb52例(81.25%)CLIA法在HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性檢出率明顯高于ELISA，且P<0.05，二者在HBsAb、HBcAb陽性檢出率方面無顯著差異(P>0.05)。

3 討 論

乙肝嚴重威脅人們的身體健康和生命安全，并且伴隨著我國近年來乙肝發病率呈現增長趨勢，乙肝發生的主要原因是感染乙肝病毒，其屬于嗜肝DNA病毒科，具有耐紫外線、耐低溫、耐熱等特征，治療難度大。臨床上如何預防和治療乙肝病毒感染已經成為社會各界研究的重大課題。但是無論采取何種治療手段，其前提均是建立在準確的診斷結果基礎上的。

乙肝病毒血清標志物作為掌握機體免疫情況的重要指標，其中HBsAg為乙肝患者血清中首先出現的病毒標志物，可作為乙肝的早期診斷。通常在感染乙肝病毒后1～2周內出現，并且在2～6個月水平顯著升高。HBsAb則是受到HBsAg的刺激而形成的對應抗體，其能夠和HBsAg進行結合。HBe Ag作為乙肝病毒核心顆粒中一類可溶性蛋白質，也是乙肝病毒感染的一大重要指標，HBeAg的水平反應了乙肝病毒復制的活躍度。當HBe Ag 結果為陽性時標志著患者有較強的傳染性和感染性。HBe Ab是人體感染乙肝病毒后，繼乙肝核心抗體產生而出現的另一抗體，是乙肝病毒感染的又一標志物，HBe Ab陽性預示患者的傳染性已顯著或相對降低，病毒復制程度已明顯或緩解降低。HBc Ab是一種敏感的血清標志物，也是乙型肝炎急性感染的早期標志。由此可見，通過血清標志物水平用于判斷乙肝病毒感染情況，臨床上對上述血清標志物檢測的方法以CLIA和ELISA檢測最為常見[2]。在本文中，對二者在乙肝病毒感染中的臨床價值進行了比較，結果顯示：CLIA檢出陽性率96.88%高于ELISA法82.81%，CLIA法在：HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性檢出率明顯高于ELISA法，且差異顯著(P<0.05)，提示CLIA診斷價值更高。與ELISA相比，CLIA法的優勢主要體現在：(1)CLIA法將化學發光技術和免疫測定技術有機結合起來，進一步拓寬了檢測的范圍，提高了檢測結果的靈敏度。(2)CLIA法檢測信號速率變化比ELISA法更快，充分有效的彌補了ELISA法閾值附近時的漏診或錯檢。(3)CLIA法可以借助微小直徑的磁顆粒來增加反應面積，從而提高檢驗的靈敏度。(4)CLIA法用于HBsAg靈敏度的測定中可以降至0.1ng/mL以下。