雙重超聲造影評估胃癌細胞侵襲及血管生成的價值

龐娟娟 張永鳳 王 雪

目前，我國胃癌的發病率逐漸升高，大部分胃癌患者早期不會出現明顯癥狀，因此早期胃癌的診斷準確率較低［1］。臨床上以灶細胞活檢和病理結果作為診斷胃癌的金標準，但胃鏡檢查具有創傷性，無法作為常規篩查手段。楊琴［2］發現雙重超聲造影可通過造影劑和超聲影像反映腫瘤部位血流灌注情況，已應用于肝、肺、直腸癌等腫瘤疾病的診斷，但對于胃癌早期細胞侵襲和新生血管形成研究較少。基于此，本研究對40例胃癌患者行雙重超聲造影檢查，旨在探討超聲造影評估胃癌患者癌細胞增殖、侵襲功能及血管新生的臨床應用價值。

資料與方法

一、研究對象

選取2018年8月至2019年12月我院收治的40例胃癌患者（觀察組），男22例，女18例，年齡46～77歲，平均（62.25±5.74）歲，體質量49～81 kg，平均（60.65±6.65）kg；病理分化中低分化24例，中高分化16例。納入標準：①均經病理確診為胃癌；②3個月內未行胃鏡檢查，無放化療干預史；③不伴其他惡性腫瘤疾病。排除標準：①妊娠期或哺乳期患者；②存在認知功能障礙或無法正常溝通交流者；③合并凝血功能障礙疾病者；④對本研究方法或藥物不耐受者。另選同期行胃鏡檢查的健康成人50例（健康對照組），男27例，女23例，年齡44～79歲，平均（61.87±6.03）歲，體質量50～82 kg，平均（61.16±6.85）kg。兩組一般資料比較差異均無統計學意義。本研究經我院醫學倫理委員會批準，所有患者及家屬均簽署知情同意書。

二、儀器與方法

1.雙重超聲造影：使用麥迪遜Accuvix XQ彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率3.5～5.0 MHz。檢查前受檢者禁食8 h，取仰臥位，常規超聲觀察其空腹狀態下肝脾腎胃膽及盆腔等部位是否存在異常回聲［3］；然后服用造影劑600 ml（1.5%泛影葡胺，南京正大天晴制藥有限公司），觀察食管、胃部灌注情況，于不同體位下掃查胃底部、胃中部、胃竇，明確病變部位，記錄胃部形態和病灶信息（位置、體積、回聲、形態、浸潤程度等），調整圖像直至出現腫瘤病灶最清晰、最大橫截面。經肘正中靜脈注入造影劑（碘帕醇注射液，南京正大天晴制藥有限公司）2.4 ml與生理鹽水5.0 ml混合液，隨即注射生理鹽水5.0 ml沖管，啟動計時器，觀察病灶區域動態造影圖像并儲存。造影過程為5 min，觀察腫瘤病灶與正常組織的超聲造影感興趣區，分析儀器內置時間-強度曲線（TIC），獲得超聲造影參數增強時間（ET）、峰值時間（TTP）、曲線上升支斜率（WIR）。

2.實驗室檢查：①胃癌細胞侵襲基因mRNA表達檢測使用熒光定量法，操作流程嚴格按照KAPA Express Extract試劑盒（廣州燕嘉生物科技有限公司）說明書，檢測指標包括真核起始因子4E（EIF4E）、CD44基因、E-鈣黏蛋白（E-cadherin）、泛素樣含PHD和環指域蛋白1（UHRF1）的mRNA侵襲表達量；②血管新生指標檢測使用酶聯免疫吸附法，操作流程嚴格按照試劑盒（上海滬震實業有限公司）說明書，檢測指標包括內皮生長因子（VEGF）、促生長因子（IGF-1）、α-1-微球蛋白-胰蛋白酶抑制劑前體（AMBP）、可溶性E-鈣黏蛋白（SE-CAD）等。

三、統計學處理

結 果

一、兩組雙重超聲造影檢查情況

超聲造影顯示觀察組胃壁廣泛不規則增厚，胃腔嚴重狹窄，呈“面包圈”征，強化部分與鄰近正常組織界限不明顯；病灶區域局部血流速度加快，造影劑強化時間縮短。觀察組ET、TTP水平均低于健康對照組，WIR高于健康對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。見表1和圖1。

表1 兩組超聲造影參數比較（±s）

表1 兩組超聲造影參數比較（±s）

ET：增強時間；TTP：峰值時間；WIR：曲線上升支斜率

組別健康對照組觀察組t值P ET（s）15.44±1.89 9.29±1.01 18.556＜0.001 TTP（s）29.62±3.35 23.17±2.54 10.075＜0.001 WIR 5.28±0.73 7.86±0.93 14.356＜0.001

二、兩組實驗室檢查指標比較

觀察組EIF4E、CD44、UHRF1水平均高于健康對照組，E-cadherin水平低于健康對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。觀察組VEGF、IGF-1、AMBP、SE-CAD水平均高于健康對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。見表2。

圖1 兩組雙重超聲造影圖

表2 兩組實驗室檢查指標比較（±s）

表2 兩組實驗室檢查指標比較（±s）

EIF4E：真核起始因子4E；E-cadherin：E-鈣黏蛋白；UHRF1：泛素樣含PHD和環指域蛋白1；VEGF：內皮生長因子；IGF-1：促生長因子；AMBP：α-1-微球蛋白-胰蛋白酶抑制劑前體；SE-CAD：可溶性E-鈣黏蛋白

組別健康對照組（50）觀察組（40）t值P組別健康對照組（50）觀察組（40）t值P EIF4E 97.32±9.55 215.48±25.55 30.204＜0.001 VEGF（μg/L）74.92±9.04 253.87±59.07 68.404＜0.001 CD44 98.32±10.20 223.71±25.49 31.783＜0.001 IGF-1（μg/L）103.40±13.78 332.88±46.43 33.209＜0.001 E-cadherin 99.86±10.15 23.29±2.89 46.190＜0.001 AMBP（μg/ml）5.26±0.78 10.33±1.63 19.410＜0.001 UHRF1images/BZ_27_1538_476_1538_477.png103.31±11.64 243.18±29.01 31.137＜0.001 SE-CAD（μg/L）10.61±1.76 25.68±4.27 22.687＜0.001

三、相關性分析

Pearson相關分析顯示，ET、TTP與E-cadherin均呈正相關，與EIF4E、CD44、UHRF1、VEGF、IGF-1、AMBP、SE-CAD均呈負相關（均P＜0.001）；WIR與Ecadherin呈負相關，與EIF4E、CD44、UHRF1、VEGF、IGF-1、AMBP、SE-CAD均呈正相關（均P＜0.001）。見表3。

表3 超聲造影參數與胃癌細胞侵襲、血管生成指標的相關性分析

討 論

胃癌是消化道常見惡性腫瘤之一，近年來我國發病率逐漸增高。血管新生是胃癌局部腫瘤惡性發展的重要特征，測定局部病灶組織內的微血管密度可獲取其血管新生程度，進而確定病灶惡性發展程度。病灶血管新生檢測方法多采用細胞組織活檢法觀察其微血管數量，過程復雜易出錯，且會對患者造成二次傷害［4］。近年來，雙重超聲造影逐漸運用于胃癌的診斷和血管新生評估，其可清晰顯示局部病灶內的血流灌注情況。本研究通過分析超聲造影參數與胃癌細胞侵襲基因mRNA和胃部新生血管組織間的關系，旨在探討雙重超聲造影評估胃癌患者癌細胞侵襲和血管新生的臨床應用價值。

正常生理狀態下的胃腔含大量氣體和黏液，胃壁無法形成清晰的反射面，導致超聲無法成為胃部疾病患者的常規檢查手段。雙重超聲造影通過向胃腔內靜脈注射造影劑，消除胃腔內胃氣和黏液，可較清晰地顯示胃壁內各層次組織。超聲造影參數ET、TTP、WIR表示病變組織內浸潤侵襲程度，當局部病灶組織血管內的血流速度越快、流量越大，造影劑強化時間就越短，通過比較造影劑灌注情況可分析局部腫瘤細胞侵襲程度和血管新生情況［5-6］。本研究選取40例胃癌患者作為觀察對象，與健康對照組比較，胃癌患者的超聲造影參數ET、TTP均降低，WIR升高，差異均有統計學意義（均P＜0.05），表明雙重超聲造影能夠反映胃癌病灶與正常組織間的差異。馬林偉等［7］發現，在疾病惡化進展過程中，胃癌病灶內出現大量新生血管，為病灶組織的惡性生物學行為提供營養支持，同時為病灶局部浸潤和細胞遠處轉移提供物質支持。張海峰等［8］發現，VEGF、IGF-1作為腫瘤病灶內表達特異性最高的血管新生因子之一，是誘導增加促血管生長因子釋放的關鍵因素。VEGF可通過直接刺激血管內皮細胞誘導其大量生成血管結構；IGF-1具有促有絲分裂作用，可刺激細胞快速增殖。此外，AMBP、SE-CAD等具有細胞侵襲功能的多種因子均具有促血管新生成作用。本研究觀察組VEGF、IGF-1、AMBP、SE-CAD均高于健康對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），表明胃癌患者局部腫瘤病灶內的血管新生程度顯著增多，細胞侵襲程度顯著升高。

基因特殊表達也是病灶內組織細胞病變的重要表現，如胃癌病灶內的mRNA基因EIF4E、CD44、UHRF1高表達及E-cadherin低表達，均是通過調控基因異常表達加快腫瘤細胞病變轉移［9］。本研究結果顯示，觀察組EIF4E、CD44、UHRF1水平均高于健康對照組，E-cadherin水平低于對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），表明胃癌惡化發展與細胞侵襲基因特殊表達有關，可作為胃癌病灶惡性發展的判斷指標。本研究相關性分析發現，ET、TTP與E-cadherin均呈正相關，與EIF4E、CD44、UHRF1、VEGF、IGF-1、AMBP、SE-CAD均呈負相關（均P＜0.05）；WIR與E-cadherin呈負相關，與EIF4E、CD44、UHRF1、VEGF、IGF-1、AMBP、SE-CAD均呈正相關（均P＜0.05）。提示雙重超聲造影參數ET、TTP、WIR與胃癌細胞侵襲、血管新生存在一定相關，與劉婕和賀海玲［10］的研究結論一致。

綜上所述，超聲造影參數ET、TTP、WIR能準確評估胃癌患者癌細胞侵襲和血管新生，具有較好的臨床應用價值。今后需進一步納入不同分期胃癌患者進行超聲造影對比分析，為臨床治療提供更加準確的參考依據。