2型糖尿病患者血清可溶性IL-2受體水平與糖尿病腎病相關性分析

黃若妃 陳天喜 呂靜平 夏靜瑤 徐琳琳

[摘要] 目的 探討2型糖尿病（T2DM）患者外周血可溶性白介素-2（sIL-2R）水平與糖尿病腎病（DN）的相關性。 方法 選取2018年9月至2019年7月在我院內分泌科收治的T2DM患者327例，其中正常蛋白尿（NA）組190例、微量白蛋白尿（MA）組87例、大量白蛋白尿（OA）組50例。檢測并比較三組患者年齡、性別、體質量指數（BMI）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、病程、外周血sIL-2R、血肌酐、腎小球濾過率（eGFR）、尿白蛋白/肌酐比值（UACR）水平差異。對比三組患者外周血可溶性白介素-2（sIL-2R）的水平差異，研究外周血可溶性白介素-2（sIL-2R）對糖尿病腎病的影響。 結果 血清sIL-2R在NA組、MA組及OA組中水平依次升高，組間比較及組內兩兩比較，差異均有統計學意義（P<0.05或P

[關鍵詞] 糖尿病腎病;可溶性IL-2受體;糖尿病;炎癥反應

[中圖分類號] R587.1? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）03-0025-04

Correlation between serum soluble IL-2 receptor level and diabetic nephropathy in the patients with Type 2 diabetes mellitus

HUANG Ruofei? ?CHEN Tianxi? ?LYU Jingping? ?XIA Jingyao? ?XU Linlin

Department of Endocrinology， Yongkang First People′s Hospital in Zhejiang Province， Yongkang? ?321300， China

[Abstract] Objective To explore the correlation between soluble interleukin-2（sIL-2R） level in peripheral blood and diabetic nephropathy（DN） in the patients with Type 2 diabetes mellitus（T2DM）. Methods A total of 327 patients with T2DM admitted to and treated in Department of Endocrinology of our hospital from September 2018 to July 2019 were selected， including 190 patients in the normal albuminuria（NA） group， 87 patients in the microalbuminuria（MA） group and 50 patients in the massive albuminuria（OA） group. The differences among the three groups of patients were examined through the comparison of age， sex， body mass index（BMI）， glycosylated hemoglobin（HbA1c）， course of disease， sIL-2R in peripheral blood， serum creatinine， glomerular filtration rate（GFR）， urinary albumin/creatinine ratio（UACR） levels. The levels of soluble interleukin-2（sIL-2R） in peripheral blood of the three groups of patients were compared for the study of the effect of soluble interleukin-2（sIL-2R） in peripheral blood on DN. Results The level of serum sIL-2R in the NA group， MA group and OA group increased in turn， and the differences were all significant no matter among the groups or within each group（P<0.05 or P<0.01）. Multiple stepwise regression analysis showed that the course of disease and sIL-2R were independent influencing factors of ACR（P<0.01）. Conclusion The level of sIL-2R in peripheral blood is an independent influencing factor of DN，which further confirms that cellular immunity may participate in the occurrence and development of DN.

[Key words] Diabetic nephropathy; Soluble IL-2 receptor; Diabetes mellitus; Inflammatory reaction

糖尿病作為常見的慢性非傳染性疾病，其患病率、致殘率和病死率在慢性病中居第三位。我國患者人數已居全球首位，截止2011年初，我國18歲及以上人群樣本中，糖尿病發病率為11.6%，約有1.139億患者[1]。糖尿病腎病（Diabetic nephropathy，DN）是糖尿病常見并發癥，20%～40%的2型糖尿病患者最終會發展成糖尿病腎病，其主要特征為持續的蛋白尿、腎功能進行性減退以及較高的心血管疾病發病率和死亡率[2]。美國數據庫研究顯示，糖尿病腎病的全因死亡率為31.1%，心血管死亡率為19.6%[3]。晚期糖基化終末產物（Advanced glycationend products，AGEs）導致的炎癥反應是糖尿病腎病的發生發展的重要機制[4]，但具體機制尚有待研究。基礎研究顯示AGEs能促進CD4+T細胞分化，加重炎癥反應[5]。因此本研究推測CD4+T細胞參與了DN的發生發展。而CD4+T細胞的活化、炎癥反應與外周血可溶性IL-2受體（sIL-2R）水平密切相關[6]。本研究通過比較2型糖尿病（T2DM）患者不同蛋白尿水平狀態下血清可溶性IL-2受體水平的變化，探討sIL-2R與DN的相關性及其可能的致病機制，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2018年9月至2019年7月永康市第一人民醫院內分泌科收治的2型糖尿病患者327例。其中男195例，女132例，平均年齡（59.69±13.15）歲。納入標準[7]：診斷標準依據2017版中國2型糖尿病防治指南（采用WHO1999糖尿病診斷、糖代謝分類標準），入選對象對本研究有知情權并在同意書上簽字。排除標準[8-9]：其他腎病史、合并自身免疫疾病、免疫抑制狀態、惡性腫瘤、嚴重肝功能損傷、感染等其他可引起sIL-2R水平升高的疾病。依據尿白蛋白/肌酐比值（Albumin to creatinine ratio，ACR）將T2DM患者分成三組：ACR<30 mg/g Cr的正常白蛋白尿（NA）組;30 mg/g≤ACR≤300 mg/g Cr的微量白蛋白尿（MA）組;ACR>300 mg/g Cr的大量白蛋白尿（OA）組。其中正常蛋白尿（NA）組190例、微量白蛋白尿（MA）組87例、大量白蛋白尿（OA）組50例。本研究經本院醫學倫理委員會批準且患者知情同意。各組研究對象一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

1.2 方法

根據ACR將糖尿病患者分為三組，收集并記錄所有受試者的年齡、性別、BMI、病程、HbA1c、外周血sIL-2R、血肌酐、eGFR、尿白蛋白肌酐比值（UACR）等。

1.3 觀察指標

收集T2DM患者的晨尿標本及空腹靜脈血標本。運用免疫比濁法使用羅氏c701及其配套試劑測定尿白蛋白及尿肌酐，計算UACR。sIL-2R采用R&D公司安圖酶標儀及其配套試劑，ELISA法檢測。HbA1c采用BIO-RAD糖化血紅蛋白測試系統（D-10 Hemog lobin A1c program）及其配套試劑，離子交換高壓液相法測定。血肌酐檢測采用Siemens ADVIA 2400全自動生化分析儀及其配套試劑，肌氨酸氧化酶法測定。操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行統計分析。正態分布資料以（x±s）表示，偏態分布資料以[M（P25，P75）]表示。正態分布資料多組間比較用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗，率的比較采用χ2檢驗;偏態分布資料多組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗。組間兩兩比較用Nemenyi檢驗;變量間的關系采用Pearson相關分析及多元逐步回歸分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 T2DM不同程度尿蛋白組一般資料及各指標比較

病程（P=0.142）、BMI（P=0.525）、HbA1c（P=0.811）計量資料方差齊（P>0.05），呈正態分布，采用單因素方差分析;血肌酐（P=0.000）、UACR（P=0.000）、sIL-2R（P=0.000）、eGFR（P=0.000）計量資料方差不齊（P<0.05），呈偏態分布，采用非參數檢驗。

NA組、MA組及OA組間性別、年齡、BMI、HbA1c比較，差異無統計學意義（P>0.05）。其余病程、血肌酐、UACR、sIL-2R、eGFR等指標的組間比較，差異均有統計學意義（P<0.01）。與NA組比較，MA組的病程、血肌酐、UACR、sIL-2R均升高，eGFR降低（P<0.05）。與NA組比較，OA組的病程、血肌酐、UACR、sIL-2R均升高，eGFR降低（P<0.05）。與MA組比較，OA組的病程、血肌酐、UACR、sIL-2R均升高，eGFR降低（P<0.05）。見表2。

2.2 血清sIL-2R與其他指標的相關性分析

Pearson相關分析顯示，T2DM中，sIL-2R與BMI無相關性（P>0.05）;與年齡、病程、HbA1c、血肌酐、UACR呈正相關（P<0.05或P<0.01）;與eGFR呈負相關（P<0.01）。見表3。

2.3 多元逐步回歸分析

以UACR為因變量，以年齡、病程、BMI、HbA1c、血肌酐、sIL-2R、eGFR為自變量，進行多元逐步回歸分析，結果顯示，病程（B=31.961）、sIL-2R（B=1.173）是UACR的獨立影響因素（P<0.05）。見表4。

3 討論

DN作為糖尿病的常見并發癥，是造成患者死亡的主要原因。T2DM引起腎損害的發病機制和病因尚未完全闡明。目前認為，其在遺傳因素的背景下和其他危險因素共同作用導致發病，涉及多種可能的因素，包括遺傳因素、糖代謝紊亂、氧化應激、血流動力學改變、微循環障礙、脂代謝異常、蛋白激酶c的激活、細胞免疫、慢性炎癥及炎癥細胞因子的參與等。這些影響因素中，細胞免疫及炎癥細胞因子的作用近來越來越受到研究者們的重視[10-12]。

CD4+T細胞又稱輔助性T細胞（T helper），在免疫調節中起著主要作用。Th細胞前體在抗原的刺激下，分化為中間階段的Th0細胞。在不同的微環境中，Th0細胞選擇性分化為Th1或Th2細胞。Th1細胞參與細胞免疫和遲發性超敏性炎癥反應，Th2可輔助B細胞分化為抗體分泌細胞，參與體液免疫應答[13]。多個臨床研究顯示Th1和Th2細胞分泌的細胞因子與糖尿病腎病相關[14-15]。DN患者外周血中CD4+T細胞數量高于健康人群，CD8+T細胞數量低于健康人群，CD4+/CD8+比值高于糖尿病患者[16]，因此本研究推測CD4+T細胞的活化是糖尿病患者發生腎功能損傷的重要環節。

sIL-2R是T細胞活化的重要標志。當T細胞表面的T細胞受體被抗原活化時，體內IL-2增多，IL-2可以正反饋使IL-2Rα鏈表達明顯增多。IL-2Rα鏈可從細胞膜上脫落進入血清形成可溶性IL-2R（sIL-2R）。因此血清sIL-2R水平可用于T細胞活化和IL-2R鏈表達的替代標志，可作為評價T細胞介導的炎癥損傷在疾病發展中作用的指標[17]。臨床研究顯示，外周血sIL-2R與炎癥反應或自身免疫導致的腎功能損傷有較強的相關性。病例對照研究顯示，腎小球疾病患者血清sIL-2R水平較健康對照高，且sIL-2R水平與24 h肌酐清除率負相關[18]。隊列研究顯示，移植前sIL-2R水平與腎移植患者1年后腎功能相關[19]。橫斷面研究顯示，血漿sIL-2R水平與糖尿病腎病患者24 h尿蛋白正相關[20]。但是該研究樣本量太小（僅12例），且未校正混雜因素。因此本研究選擇大樣本的研究來證實sIL-2R水平與DN的關系。本研究顯示2型糖尿病患者中，隨著sIL-2R的增加，尿白蛋白排泄量水平增高，sIL-2R水平與VACR正相關，差異有統計學意義（P<0.05）。進一步證實sIL-2R是糖尿病患者發生DN的風險因素，為DN高危人群篩查、早期干預，控制危險因素提供臨床證據。

為了排除ACR的影響因素，本研究將所有可能影響ACR 的自變量均納入多元回歸方程，校正了年齡、BMI、HbAlc等影響因素后，發現病程、sIL-2R是UACR的獨立影響因素，在糖尿病腎病患者病情診斷以及病情進展監測中均具有較高的應用價值。

綜上所述，本研究通過sIL-2R與ACR之間的關系，進一步證實細胞免疫參與DN的發生和發展，sIL-2R可用于高危人群篩查和提供治療靶點的理論依據。

[參考文獻]

[1] Xu Yu.Prevalence and control of diabetes in Chinese adults[J].JAMA，2013， 310（9）：948.

[2] Rossing P，Persson F，Frimodt-MLler M.Prognosis and treatment of diabetic nephropathy：Recent advances and perspectives[J]. Néphrologie & Thérapeutique， 2018，14：S31-S37.

[3] Buyadaa Oyunchimeg，Magliano Dianna J，Salim Agus，et al. Risk of rapid kidney function decline，all-cause mortality，and major cardiovascular events in nonalbuminuric chronic kidney disease in type 2 diabetes[J].Diabetes Care，2020，43（1）：122-129.

[4] Menini Stefano，Iacobini Carla，de Latouliere Luisa，et al. Theadvanced glycation end-product N-carboxymethyllysine promotes progression of pancreatic cancer：Implications for diabetes-associated risk and its prevention[J]. The Journal of Pathology，2018，245（2）：197-208.

[5] Gagliani Nicola，Huber Samuel. Basic aspects of T helper cell differentiation[J]. Methods in Molecular Biology （Cli-fton，N.J.），2017，1514：19-30.

[6] Ma Hongshuang，Yuan Yi，Zhao Ling，et al. Association of γδ T cell compartment size to disease activity and response to therapy in SLE[J].PloS One，2016，11（6）：e0 157 772.

[7] 中華醫學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南（2017年版）[J].中國實用內科雜志，2018，38（4）：34-86.

[8] 胥佳佳，王燕，孫賀，等.可溶性白細胞介素2受體α鏈的檢測與類風濕關節炎疾病活動性評估[J].北京大學學報（醫學版），2018，50（6）：33-38.

[9] 王冬嬌，王菊娟，楊向綢，等.血清可溶性白細胞介素-2受體在急性白血病的表達及臨床意義[J].臨床血液學雜志，2017（1）：56-58，62.

[10] Waasdorp Maaike，Duitman JanWillem，Florquin Sandrine，et al.Protease activated receptor 2 in diabetic nephropathy：A double edged sword[J].American Journal of Translational Research，2017，9（10）：33 030.

[11] 王衛民.2型糖尿病腎病患者血中炎性因子與尿微量白蛋白的關系[J].中國綜合臨床，2012，28（10）：1019-1021.

[12] Denhez Benoit，Rousseau Marina，Dancosst David Alexandre，et al.Diabetes-Induced DUSP4 reduction promotes podocyte dysfunction and progression of diabetic nephropathy[J].Diabetes，2019，68（5）：1026-1039.

[13] Narsale Aditi，Moya Rosita，Davies Joanna Davida.Human CD4+CD25+CD127^{cells and the Th1/Th2 phenotype[J].Clinical Immunology（Orlando，Fla），2018， 18：188.}

[14] Cuiping Zhang，Chunchun Xiao，Peng Wang，et al.The alteration of Th1/Th2/Th17/Treg paradigm in patients with type 2 diabetes mellitus：Relationship with diabetic ne-phropathy[J].Human Immunology，2014，75（4）：289-296.

[15] Gowrishankar A，Rathinam V，Vishwanathan M，et al.Increased IL-12 and decreased IL-33 serum levels are associated with increased Th1 and suppressed Th2 cytokine profile in patients with diabetic nephropathy（CURES-134）[J].International Journal of Clinical and Experimental Pathology，2014，7（11）：8008-8015.

[16] 陳燁.流式細胞術檢測T細胞亞群在2型糖尿病及糖尿病腎病患者中的應用[J].國際檢驗醫學雜志，2012， 33（4）：491-492.

[17] Kalia V，Sarkar S，Subramaniam S，et al.Prolonged interleukin-2Rα expression on virus-specific CD8+T cells favors terminal-effector differentiation in vivo[J].Immunity，2010，32（1）：91-103.

[18] Sugimoto H，Hashimoto N，Suzuki S，et al.Serum levels of soluble interleukin-2 receptor in patients with various renal diseases[J].The Tohoku Journal of Experimental Medicine，1998，184（4）：1088-1096.

[19] Morales-Indiano C，Lauzurica R，Pastor MC，et al.Greater posttransplant inflammation and oxidation are associated with worsening kidney function in patients with pretransplant diabetes mellitus[J].Transplantation Proceedings，2009，41（6）：2120-2128.

[20] Wu CC，Chen JS，Lu KC，et al.Aberrant cytokines/chemokines production correlate with proteinuria in patients with overt diabetic nephropathy[J].Clinica Chimica Acta，2010，411（9-10）：700-704.

（收稿日期：2020-08-20）