超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定水中甲草胺等六種酰胺類除草劑殘留

張建平，呂警(.新疆昌源水務科學研究院有限公司，新疆 烏魯木齊 830000；. 烏魯木齊市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心，新疆 烏魯木齊 830000)

0 引言

隨著我國農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化的發(fā)展，耕作方式趨向于規(guī)模化和集約化，對農(nóng)藥的需求量顯著增加，而除草劑是發(fā)展最為迅猛的一類農(nóng)用化學品，其中酰胺類除草劑作為其中重要的一類，因其高效、高選擇性得到了廣泛的應用。與此同時，酰胺類除草劑在環(huán)境和作物中的持效期長，其在農(nóng)作物中的殘留可被土壤和沉積物吸附，通過滲漏進入地表水和地下水，并對人類健康和環(huán)境有一定的毒害作用。研究表明，乙草胺和丁草胺具有弱的基因毒性，美國環(huán)境保護局已將乙草胺定為B-2類致癌物[1]，我國GB 5749—2006《生活飲用水衛(wèi)生標準》[2]把甲草胺列為毒理指標，其限值為0.02 mg/L。由于環(huán)境中酰胺類除草劑的含量較低，因此環(huán)境樣品需要進行富集，富集方法主要有固相萃取法[3](SPE)、AES法[4]、固相微萃取法[5]和QuEChERS[6]法等。目前，環(huán)境中酰胺類除草劑的分析方法主要有氣相色譜法[7](GC)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[8](GC-MS)、液相色譜法[9](HPLC)法等。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC/MS/MS)由于靈敏度高，抗干擾能力強，是目前農(nóng)殘分析的首選方法[10]，但目前較少有固相萃取法聯(lián)合LC/MS/MS法檢測水樣中酰胺類除草劑的報道。文章通過C18固相萃取柱富集洗脫，結(jié)合LC/MS/MS法，建立了同時檢測水中甲草胺等6種酰胺類除草劑的快速檢測方法。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Waters Acquity H-Class超高效液相色譜儀、xevo TQD三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀、配電噴霧離子源。甲醇、乙腈、甲酸均為色譜純，所有實驗用水均為超純水，甲草胺、乙草胺、二甲草胺、異丙草胺、丁草胺、吡氟酰草胺標準品均購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所。

1.2 標準溶液

分別移取濃度為100 μg/mL標準溶液1 mL，用乙腈在100 mL棕色容量瓶中定容至刻度，得1.0 μg/mL標準儲備液。標準儲備液用乙腈-水(1:1)稀釋成100 μg/L中間使用溶液混標；分別吸取0.20、0.50、1.00、2.00、5.00 mL上述混標于10 mL容量瓶中，用乙腈-水(1:1)定容至刻度。此系列標準溶液濃度為2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 μg/L，臨用時現(xiàn)配。

1.3 樣品采集與處理

實驗用樣品為環(huán)境水樣，用干凈的100 mL棕色玻璃瓶采集，4 ℃冷藏保存，72h內(nèi)分析。選用C18小柱，小柱經(jīng)5 mL甲醇-5 mL水活化，樣品以約4～5 mL/min 的速率過柱富集；再用13～15 mL的丙酮，以約0.4～0.5 mL/min 的速率進行洗脫，洗脫液濃縮并氮氣吹除水至近干后用乙腈-水(1：1)定容至1 mL，裝入進樣瓶分析。

1.4 超高效液相色譜分析條件

色譜柱為Acquity UPLC BEH C18 (2.1 mm×100 mm，1.7 μm)；柱溫40 ℃，流動相為乙腈(A)和0.1% 甲酸-水(B)，流速0.3 mL/min，進樣量為5 μL，流動相梯度洗脫程序見表1。

1.5 質(zhì)譜條件

離子源為電噴霧電離源(ESI)；毛細管電壓3.2 kV；離子源溫度150 ℃；脫溶劑氣溫度350 ℃；脫溶劑氣流量：800 L/h；錐孔氣流量50 L/h；采用多反應離子監(jiān)測模式(MRM)，6種酰胺類除草劑的多反應監(jiān)測(MRM)條件如表2。

表1 梯度洗脫程序

表2 6種酰胺類除草劑的多反應監(jiān)測(MRM)條件

圖1 6種酰胺類除草劑的TIC圖

1.6 線性關系及檢出限

在上述色譜條件下，對不同濃度標準溶液分別進樣，得到響應值，以響應值為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線，6種酰胺類除草劑在2～100 μg/L范圍內(nèi)線性關系良好，其相關系數(shù)(r)均大于0.999，線性方程、相關系數(shù)見表3。

表3 線性方程、相關系數(shù)和檢出限

按照HJ 168—2020要求，并考慮儀器靈敏度，重復7次空白試驗，將測定結(jié)果換算為樣品中的含量，計算7次平行測定的標準偏差S，按公式MDL=3.143×S計算方法檢出限，得到檢出限為：甲草胺0.02 μg/L，乙草胺0.02 μg/L，二甲草胺0.05 μg/L，異丙草胺0.09 μg/L，丁草胺0.05 μg/L，吡氟酰草胺0.06 μg/L。

1.7 精密度與準確度

用蒸餾水按照以上檢測方法進行加標回收實驗，添加3個不同水平的混合標樣，每個添加濃度重復6次，計算添加回收率以及測定結(jié)果的相對標準偏差，結(jié)果見表4。精密度與準確度實驗顯示采用該方法測定平均回收率70.0%～103%，相對標準偏差為2.6%～7.9%，均符合殘留分析的要求。

表4 6種酰胺類除草劑在水中添加的精密度與準確度

2 結(jié)語

文章建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定水中6種酰胺類除草劑多殘留的檢測方法，該方法簡便、快速，結(jié)果準確、可靠，具有良好的靈敏度和理想的精密度，具有顯著的實用價值。經(jīng)精密度實驗和方法驗證實驗，證明該方法完全滿足農(nóng)藥殘留檢測的要求，適合于水中多種酰胺類除草劑殘留量的同時檢測。