飼料中金黃色葡萄球菌活菌的快速檢測

白延波

（河北省邢臺市農業農村局，河北 邢臺 054001）

金黃色葡萄球菌的大多數菌株都會產生血漿凝固酶，所以在其他疾病以及應激因子的嚴重影響下，很容易引起免疫抑制，并打破宿主與病原之間的平衡狀態，降低宿主自身的抵抗能力，該菌可直接進入血液，引發關節、滑液囊等機體組織的炎癥。

1 材料

（1）采樣隨機采取一定數量的飼料廠仔豬顆粒飼料，并將其放置在密封袋中進行備用。（2）培養基以及試劑制備。準備7.5%的氯化鈉肉湯、鮮血瓊脂平板、7.5%氯化鈉甘露醇瓊脂平板、葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖、M.R、V-P、H2S、枸櫞酸鹽、硝酸鹽、尿素、三糖鐵以及吲哚等生化類培養基和滅菌性生理鹽水，并以實驗室自制的方法，為過氧化氫酶以及血漿凝固酶等實驗提供充足的試劑保障。采集免疫臟血還需要采取健康兔子的心臟血漿，并通過分離處理，再將其放置于4℃的冰箱內進行儲存。

2 方法

2.1 稀釋樣品

稱取不同的樣品各25g，并加入到225mL的滅菌生理鹽水中，并通過越夜浸泡，制成比例為1:10的樣品菌液。無菌吸取5mL的樣品菌液，接種于7.5%的氯化鈉肉湯中，再將其放置于37℃培養18～24h。

2.2 細菌分離純化分別提取增菌液2環，無菌接種到鮮血瓊脂平板中，于37℃培養24h后，再提取1/3的疑似菌落涂片，進而通過染色鏡檢實驗，實現對細菌的純化處理。另外，提取相應的純培養物質，并接種到生化培養基中，置于37℃培養48h。提取部分菌落并放置于載玻片中，再將3%的過氧化氫滴到載玻片上，觀察過氧化鈉酶的實驗結果。……