蠶蛾公補酒矯味工藝研究

王雪瑩，王永紅，蔣燕霞，原歡歡，李紅亮，彭世陸，禹奇男

（太極集團重慶涪陵制藥廠有限公司，重慶 408000）

蠶蛾公補酒具有補腎壯陽、養(yǎng)血、填精功效，臨床多用于腎陽虛損、陽痿早泄、宮冷不孕、性功能衰退等癥的治療，雖療效確切，但口感差，有明顯麻舌感，嚴重影響患者服藥依從性。為改善口感，本研究中通過查閱文獻和麻味溯源，確定蠶蛾公補酒處方中蛇床子藥材為麻味的來源；以炮制后蛇床子素的量和麻舌感評分值為指標，采用正交試驗設(shè)計優(yōu)選最佳炮制工藝，加入不同矯味劑，以達到改善口感、矯味的目的。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

粉碎機、1260-DAD 型高效液相色譜儀（美國Agilent 公司）；AE240 型電子分析天平（梅特勒-托利多儀器＜上海＞有限公司）；KQ-500DE 型數(shù)控超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）；DFY-200C 型高速萬能粉碎機（上海皓莊儀器有限公司）。

1.2 試藥

蛇床子素對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為110822-201710，純度為99.5%）；白酒（江津白酒廠）；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純，水為純化水。雄蠶蛾（制）、人參、熟地黃、麩炒白術(shù)、當歸、枸杞子、淫羊藿、鹽補骨脂、仙茅、蛇床子、肉蓯蓉、菟絲子等藥材均購于桐君閣大藥房，經(jīng)太極集團重慶涪陵制藥廠楊修齊主任中藥師鑒定為正品。

2 方法與結(jié)果

2.1 麻味溯源

為確定麻味來源，將處方中可能產(chǎn)生麻味的5 味藥材（補骨脂、仙茅、蛇床子、肉蓯蓉、菟絲子）按蠶蛾公補酒工藝要求單獨滲漉，根據(jù)麻味感受情況制訂評分依據(jù)（見表1）。選取50 名志愿者對編號為1 ～5 的滲漉液進行感官評分，取平均值，蛇床子滲漉液麻味程度為重度，確定蛇床子藥材是蠶蛾公補酒中麻味的主要來源，詳見表2。

2.2 蛇床子素含量測定

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Spursil C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈-水（65 ∶35，V/ V）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：322 nm；柱溫：25 ℃[1]。

表2 藥材麻味評定結(jié)果Tab.2 Evaluation results of tingly sensation of medicinal materials

2.2.2 溶液制備

對照品溶液：取蛇床子素對照品適量，精密稱定，加乙醇制成質(zhì)量濃度為45 μg/mL 的對照品溶液。

供試品溶液：取蛇床子藥材粉末（過3 號篩）約0.1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇25 mL，密塞，稱定質(zhì)量，放置2 h，超聲（功率300 W，頻率50 kHz）處理30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用無水乙醇補足減失的質(zhì)量，搖勻；精密量取上清液5 mL，置10 mL 容量瓶中，加無水乙醇定容，搖勻，即得。

2.2.3 方法學(xué)考察

適用性試驗：取上述對照品溶液、供試品溶液各適量，按選定色譜條件進樣測定，色譜圖見圖1。結(jié)果理論板數(shù)按蛇床子素峰計應(yīng)不低于3000，分離度均大于1.5，基線分離良好。

圖1 高效液相色譜圖1.osthole A.Reference solution B.Test solutionFig.1 HPLC chromatograms

線性關(guān)系考察：分別精密量取2.2.2 項下對照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置5 mL 容量瓶中，加流動相定容，搖勻，制成系列對照品溶液。精密量取10 μL，按選定色譜條件進樣測定，記錄峰面積。以蛇床子素質(zhì)量濃度（X，μg/mL）為橫坐標、峰面積（Y）為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程Y= 4104.2X+274.2（r=0.9996）。結(jié)果表明，蛇床子素質(zhì)量濃度在12.663 ～126.63 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收試驗：按標準進行方法學(xué)考察，結(jié)果精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收試驗的RSD均小于2.0%，表明儀器精密度良好，供試品溶液在室溫放置12 h 內(nèi)基本穩(wěn)定，本方法重復(fù)性良好。

2.3 工藝優(yōu)選

2.3.1 正交試驗

以潤制時間（A，min）、炒制時間（B，min）、炒制溫度（C，℃）為考察因素，以麻舌感評分、蛇床子素含量為考察指標，采用L9（34）正交試驗設(shè)計優(yōu)選蛇床子藥材的制備工藝[2-4]。因素水平見表3，L9（34）正交試驗設(shè)計與結(jié)果見表4，方差分析結(jié)果見表5。

由表4、表5 可知，對麻舌感影響順序由強到弱為C ＞B ＞A，3 個因素對蛇床子素含量均無顯著影響。最終確定最佳組合為A2B3C3。即蛇床子藥材去麻味炮制工藝為加石灰水潤制30 min，炒制45 min，炒制溫度100 ℃。

表3 因素與水平Tab.3 Factors and their levels

表4 L9（34）正交試驗設(shè)計與結(jié)果Tab.4 Design and results of L9（34）orthogonal test

表5 方差分析結(jié)果Tab.5 Analysis of variance results

2.3.2 驗證試驗

精密稱取炮制后蛇床子藥材樣品粉末5.0 g，按2.1.2 項下方法制備供試品溶液，取適量，按選定色譜條件測定蛇床子素，并計算含量。結(jié)果樣品中蛇床子素的平均含量為1.43%，1.56%，1.47%，炮制后藥材的滲濾液麻舌感均減弱，說明該炮制工藝合理。

2.4 矯味工藝考察

2.4.1 甜度劑量

分別取樣品各1 L，分別加入1，4，7，10，13，16，20 g蔗糖，考察口感。結(jié)果每1 L 樣品中加入10 g 蔗糖時甜度適宜，口感最佳。

2.4.2 甜味劑

分別取樣品1 L，根據(jù)不同甜味劑的甜度倍數(shù)[15]（見表6），加入甜度相當于10 g 蔗糖的不同甜味劑。對比不同甜味劑對蠶蛾公補酒口感的改善情況，進行人工感官評價。結(jié)果，添加50 mg/L 甜菊素時蠶蛾公補酒甜度適宜，可有效遮蔽劑型中的微麻味，降低由酒精度引起的辛辣、刺激感。

表6 不同甜味劑的甜度倍數(shù)Tab.6 Sweetness times of different taste-modifyimg prescriptions

2.4.3 驗證試驗

分別取樣品各1 L，共3 批，分別加入50 mg 甜菊素，制得的蠶蛾公補酒麻味評分為2 ～4 分，輕度麻味，不影響服用，可接受。較原工藝制得的樣品麻味減輕，甜度適宜。

3 討論

蛇床子藥材的炮制始見于《雷公炮炙論》，唐代后炒制成了蛇床子藥材的主要炮制方法。《本草綱目》記載：“凡服食，即去皮殼，取仁微炒殺毒，即不辣也。”有文獻報道，蛇床子藥材的麻味主要為香豆素類成分[5-9]，比較蛇床子生品、炮制品理化性質(zhì)和蛇床子素含量，發(fā)現(xiàn)炒、炙的炮制方法可降低蛇床子素含量[10-12]，就是傳統(tǒng)炮制描述的“改變其燥性”，這也是炮制后降低蛇床子藥材毒性的一個方法。

藥典收載的中藥材大多具有不良口感，矯味研究將是解決口服制劑中藥“粗、大、黑、苦”的重要思路之一。在研究過程中，需綜合考慮多方面因素，本研究中通過藥材炮制及添加矯味劑工藝改善蠶蛾公補酒的口感，以蛇床子素含量和麻舌感評分為指標，優(yōu)化蛇床子藥材炮制工藝，從源頭去除麻味；適宜的甜度可以遮蔽蠶蛾公補酒中的麻味、苦味或不良氣味，蠶蛾公補酒處方中原使用單糖漿、煉蜜矯味，但劑量不夠、調(diào)節(jié)作用有限，補加甜味劑可以有效地改善口感，降低由酒精度引起的辛辣、刺激感[13-15]。最終確定蛇床子藥材去麻味炮制工藝為：加石灰水潤制30 min，炒制45 min，炒制溫度100 ℃，每1 L 蠶蛾公補酒中加入甜菊素50 mg。該工藝操作簡便，精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、耐用性好，可用于蠶蛾公補酒的矯味。