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杠板歸水浸液對小白鼠生長性能、血液生化指標及臟器病變的影響

2021-03-01 09:15:52李華坤
現代畜牧獸醫 2021年1期
關鍵詞:中草藥小鼠

李華坤

(徐州生物工程職業技術學院,江蘇 徐州 221006)

杠板歸是蓼科蓼屬植物,又名蛇倒退、刺犁頭、刺蓼。杠板歸性微寒、味酸,歸肺、膀胱經,具有抗炎、抗病毒、止咳祛痰、保肝、抗腫瘤、抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性、抑制乙酰膽堿酯酶活性等藥理作用,常用于瀉痢、疔瘡腫痛、蛇蟲咬傷等癥[1]。近年來,中藥藥源性肝損傷事件引起醫藥界、制藥業、管理部門及公眾的高度關注[2]。本試驗以小白鼠為研究對象,通過研究杠板歸對小白鼠的生長性能、血液生化指標、臟器病變等的影響,旨在為臨床合理使用杠板歸提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗動物為昆明小白鼠。杠板歸全草來自廣東揭陽。藥敏試紙購自杭州濱和微生物試劑有限公司。

1.2 儀器與試劑

普通營養瓊脂購自天津市英博生化試劑有限公司、SX-500高壓滅菌鍋購自日本TOMY公司、DRI-CHEM NX500iVC全自動干式生化分析儀購自北京安普生化科技有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 小白鼠飲水給藥

將杠板歸水浸液濃縮至1 g/mL藥液。 根據半數致死量(LD50)分級法,無毒中藥LD50>50 g/kg,把小白鼠最大給藥量定為50 g/kg, 按照組間劑量比值為 1∶0.7設計3個劑量組,分別0.75、0.50、0.35 g。等濃度灌胃給藥,給藥容積分別為 0.75、0.50、0.35 mL。取雌、雄性小鼠6只,體重(15.0±0.1) g,隨機分成3組,每組2只,雌、雄各1只。給藥前小鼠禁食12 h,自由飲水。按劑量設計分別單次灌胃給予小鼠杠板歸藥液,給藥后立即觀察小白鼠活動狀態變化。

健康清潔級小白鼠,選擇雌、雄鼠各6只,體重在19~21 g,分為3組,雌5只為1組、雄5只為1組,其余2只為空白對照組。空白對照組小白鼠正常飲水喂料7周,其余2組停止飲水、正常喂料,每天用10%杠板歸200 mL給小白鼠飲用,第2 d更換新的藥物并計算出藥物消耗劑量。大約每只老鼠飲用4mL/d,連續7周,觀察小白鼠活動狀態變化。對死亡的小鼠剖檢觀察臟器病變,對未死亡的小白鼠心臟采血,測定生化數值,未死亡小白鼠糞便采集做藥敏試驗,后將小白鼠致死觀察臟器病變。

1.3.2 小白鼠血液生化指標定

灌胃杠板歸7周的小白鼠稱量體重,仰臥保定后用注射器進行心臟采血0.6 mL,將血液放入指型管中,10 000 r/min離心2 min,取上清液至另一指型管內在生化分析儀上測定。

1.3.3 藥敏試驗

采集灌胃杠板歸7周的小鼠鮮糞0.4 g放入試管中,加入1 mL生理鹽水浸泡,用玻璃棒搗碎,3 000 r/min離心3 min,取上清液作為藥敏試驗用菌液。用滅菌棉拭子蘸取制備好的菌液,涂布到培養基表面。用鑷子將藥敏片分別貼在各組培養基的表面,37 ℃溫箱內培養24 h測定抑菌圈的大小。

2 結果與分析

2.1 半數致死量(LD50)

灌胃給藥0.75 g的小鼠30 s左右全身抽搐死亡,灌胃給藥0.50 g和0.35 g的小鼠無死亡。說明杠板歸LD50在16~50 g/kg之間是小毒中藥。

2.2 杠板歸對小白鼠生長性能的影響(見表1)

表1 杠板歸對小白鼠生長性能的影響Tab.1 The effect of Gangbangui on the growth performance of mice 單位:g

飼喂7周后,空白組2只和飲用杠板歸10只小白鼠均未死亡,小鼠活動狀態無差異、排糞尿、飲水吃料等均正常,每周體重平均增加2.7g左右。飼喂7周試驗小白鼠期間小鼠活動狀態無差異、運動靈活、排糞尿、飲水吃料等均正常。由表1可知,試驗小白鼠平均每天增重0.4 g左右,對照組小白鼠增長重量比飲用杠板歸小白鼠增長重量多,杠板歸可能影響動物機體生長。

2.3 杠板歸對小白鼠血液生化指標的影響(見表2)

由表2可知,使用杠板歸的小白鼠血液中總蛋白、白蛋白、肌酐、堿性磷酸酶、總膽固醇、鈣水平降低。

2.4 杠板歸對小白鼠糞便藥敏試驗結果(見表3)

由表3可知,腸道菌對杠板歸中介,對四環素、頭孢噻肟、卡那霉素、氯霉素敏感,對苯唑西林耐藥,說明杠板歸不易產生耐藥性。

表2 杠板歸對小白鼠血液生化指標的影響Tab.2 The effect of Gangbangui on the blood biochemical indexes of mice

表3 杠板歸對小白鼠糞便藥敏試驗結果Tab.3 Results of drug sensitivity test of Gangbangui to mice fecess

2.5 杠板歸對小白鼠臟器病變的影響(見圖1、表4)

由表4、圖1可知,對照組小鼠剖檢心臟、腎臟、肺等均無異常,飲用杠板歸的小白鼠肝臟上有結節,其余臟器均正常。

表4 杠板歸對小白鼠臟器病變的影響Tab.4 The effect of Gangbangui on the lesions of organs in mice

3 討論

小鼠生長發育受飼料影響較大[3]。本試驗結果表明,杠板歸對小白鼠生長性能性能產生影響。景志忠等[4]采用4個不同營養標準的飼料配方,飼養繁殖昆明仔鼠,其增重規律為:在1~20、40~60日齡間仔鼠生長發育較慢,增生幅度較小;120~140日齡間生長發育較快,增重幅度較大;雄鼠增重速度快于雌鼠;營養與小鼠生長呈正相關,且在20~40日齡間,不同營養組間差異顯著或極顯著。

本研究結果顯示,使用杠板歸的小白鼠血液中總蛋白、白蛋白、堿性磷酸酶和肌酐含量異常,說明杠板歸對肝臟有影響。中草藥成分復雜,在臨床中很少有病原菌對中草藥產生耐藥性,這也是臨床上經常使用中草藥防病治病的重要原因。中草藥長期不規范使用才出現對肝臟的損傷,所以不易被人們認識到。中藥藥源性肝損傷的發生具有較大隱匿性,為臨床常見的藥物不良反應之一[5]。調查顯示,中草藥肝損傷病例中多數是由于病患不去正規醫院就診而濫用中草藥所致。

中草藥飼料添加劑對動物生產性能、免疫指標及肉品質均有影響。在飼糧中添加0.2%的中草藥,不僅能夠顯著提高北京鴨的生長性能、屠宰性能以及機體免疫,還能改善鴨肉品質[6]。正確使用中草藥使動物飼料的利用率、動物的繁殖性能、抗應激能力等都顯著提高[7]。大量的中草藥在養殖企業中應用,本試驗了解到中草藥不易產生耐藥性的優點和潛在肝損害的缺點,為臨床合理用藥提供建議。

4 結論

杠板歸LD50在16~50 g/kg之間是小毒中藥,對小白鼠有一定毒性。

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