胰腺癌患者血清膜聯(lián)蛋白A2水平及與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系

謝小龍，陸艷艷，虞哲科，邱振明

[浙江大學(xué)臺(tái)州醫(yī)院（浙江省臺(tái)州醫(yī)院）1.普外科，2.手術(shù)室，浙江 臺(tái)州317000]

胰腺癌發(fā)病隱匿，早期臨床表現(xiàn)缺乏特異性，易被忽視；且胰腺癌缺乏特異的腫瘤標(biāo)志物，早期診斷困難[1]。多數(shù)胰腺癌患者確診時(shí)已經(jīng)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，僅少數(shù)病例存在手術(shù)機(jī)會(huì)，但術(shù)后生存率低[2]。探索胰腺癌早期診斷和預(yù)后評(píng)估的相關(guān)指標(biāo)具有重要意義。膜聯(lián)蛋白A2 （annexin A2，ANXA2）是一種鈣依賴性蛋白，在多種惡性腫瘤中發(fā)揮正向調(diào)節(jié)作用，促進(jìn)其發(fā)生、發(fā)展[3-4]。研究發(fā)現(xiàn)ANXA2 在肺癌等惡性腫瘤的診斷和預(yù)后評(píng)價(jià)中具有一定價(jià)值[5]。基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)ANXA2 可促進(jìn)胰腺癌的進(jìn)展[6]；胰腺癌中ANXA2 高表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的DNA 修復(fù)、細(xì)胞增殖關(guān)系密切[7]，但ANXA2在胰腺癌中的臨床價(jià)值尚不明確。本文對(duì)胰腺癌患者血清ANXA2 水平及與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行研究，探討其在胰腺癌中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

采用回顧性病例對(duì)照分析，選取2016年7月—2017年12月在浙江省臺(tái)州醫(yī)院就診的胰腺癌患者90 例作為胰腺癌組，同期本院健康體檢者90 例作為對(duì)照組。胰腺癌組男性56 例，女性34 例；年齡（57.46±9.47）歲。對(duì)照組男性53 例，女性37 例；年齡（56.81±10.32）歲。兩組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批，參與者均簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)胰腺癌患者均為首次就診患者，病理證實(shí)為胰腺導(dǎo)管腺癌，術(shù)前未進(jìn)行放、化療等其他治療，病例資料和隨訪資料完整。對(duì)照組體檢結(jié)果正常。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)合并其他惡性腫瘤、糖尿病、高血壓、冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病、肝病等其他內(nèi)外科疾病。對(duì)于隨訪過程中失訪的患者予以完全剔除。

1.3 方法

胰腺癌組采集患者入院次日空腹靜脈血，對(duì)照組采集體檢當(dāng)日空腹靜脈血，分離血清。采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清ANXA2 和糖類抗原19-9（carbohydrate antigen, CA19-9）水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)RD 公司。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)或方差分析，進(jìn)一步兩兩比較用LSD-t檢；繪制ROC曲線；采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，比較用Log-rank χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析用Pearson 法，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清ANXA2、CA19-9水平比較

兩組血清ANXA2、CA19-9 水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），胰腺癌組高于對(duì)照組。見表1。

表1 兩組血清ANXA2、CA19-9水平比較 （n=90，±s）

表1 兩組血清ANXA2、CA19-9水平比較 （n=90，±s）

組別ANXA2/（μg/L）CA19-9/（u/ml）對(duì)照組胰腺癌組t 值P 值3.89±1.34 17.58±3.52 34.482 0.000 26.31±4.35 39.57±4.63 19.801 0.000

2.2 胰腺癌患者血清ANXA2與CA19-9的相關(guān)性

胰腺癌患者血清ANXA2 與CA19-9 水平呈正相關(guān)（r=0.671，P=0.000）。

2.3 不同臨床病理特征胰腺癌患者血清ANXA2水平比較

不同年齡、性別、飲酒史、吸煙史、腫瘤部位、腫瘤大小、臨床分期、腫瘤分化程度、神經(jīng)浸潤(rùn)的胰腺癌患者血清ANXA2 水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)或方差分析，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。是否合并遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胰腺癌患者的血清ANXA2 水平比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清ANXA2 水平高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。見表2。

2.4 血清ANXA2、CA19-9對(duì)胰腺癌的診斷價(jià)值

血清ANXA2、CA19-9 診斷胰腺癌的ROC 曲線下面積（AUC）分別為0.826 和0.871，敏感性分別為76.67% （95% CI： 0.764， 0.771） 和83.33%（95% CI：0.829，0.836），特異性分別為78.89%（95% CI： 0.786， 0.792） 和85.56% （95% CI：0.853，0.859）。兩者聯(lián)合診斷胰腺癌的AUC 為0.924，敏感性為91.11%（95% CI：0.908，0.914），特異性為92.22%（95% CI：0.918，0.926）。見表3和圖1。

2.5 血清ANXA2水平對(duì)胰腺癌預(yù)后的影響

以胰腺癌患者血清ANXA2 水平的中位數(shù)為界分為ANXA2 高表達(dá)組45 例和低表達(dá)組45 例。ANXA2 低表達(dá)組患者的總生存期（overall survival，OS）和無病生存期（disease-free survival，DFS）的中位生存時(shí)間分別為10.86 個(gè)月和6.23 個(gè)月；ANXA2 高表達(dá)組患者的OS 和DFS 分別為29.43 個(gè)月和20.63 個(gè)月。ANXA2 低表達(dá)組的2年OS 比率和DFS比率均高于ANXA2高表達(dá)組（χ2=5.327 和7.021，P=0.011 和0.000）。見圖2。

表2 不同臨床病理特征胰腺癌患者血清ANXA2水平比較 （μg/L，±s）

表2 不同臨床病理特征胰腺癌患者血清ANXA2水平比較 （μg/L，±s）

臨床病理特征性別n ANXA2 t 值P 值男女34 17.42±3.68年齡≥60歲<60歲飲酒史41 49 18.13±4.01 17.26±4.23有無18 72 17.95±3.66 17.32±3.71吸煙史有無14 76 17.86±3.85 17.37±3.64腫瘤部位胰頭胰體尾腫瘤大小≥4 cm<4 cm臨床分期Ⅰ期、Ⅱ期73 17 17.26±3.37 18.02±3.54 64 26 17.95±4.01 16.34±3.73 67 16.53±4.53 56 17.81±3.76 0.481 0.632 0.995 0.322 0.646 0.520 0.459 0.647Ⅲ期、Ⅳ期分化程度低分化中分化高分化神經(jīng)浸潤(rùn)22 17.16±3.57有無18 72 18.47±3.54 16.87±3.33遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有10 19.87±3.31 0.830 0.409 1.760 0.082 23 18.61±4.45 1.908 0.060 14 54 18.21±3.68 17.62±3.42 0.388 0.680 1.801 0.075無80 14.32±3.18 5.181 0.000淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有無25 65 19.42±3.45 14.73±3.37 5.875 0.000

表3 血清ANXA2、CA19-9對(duì)胰腺癌的診斷價(jià)值

圖1 血清ANXA2、CA19-9診斷胰腺癌的ROC曲線

圖2 不同血清ANXA2表達(dá)水平胰腺癌患者OS和DFS的Kaplan-Meier生存曲線

3 討論

胰腺癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，患者年齡也呈年輕化趨勢(shì)；由于胰腺癌早期診斷困難且容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致胰腺癌為惡性程度最高的實(shí)體惡性腫瘤[8-10]。手術(shù)是治療胰腺癌的有效方法，但多數(shù)患者在就診時(shí)已出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，錯(cuò)過根治性切除機(jī)會(huì)[11-12]；即使進(jìn)行根治性手術(shù)，仍有大部分患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重影響了胰腺癌的治療效果[13-14]。目前診斷胰腺癌主要靠超聲、CT、磁共振等影像學(xué)檢查，同時(shí)聯(lián)合血清腫瘤標(biāo)志物。影像學(xué)檢查對(duì)早期胰腺癌、腹腔隱匿性轉(zhuǎn)移灶、血管侵犯等診斷的準(zhǔn)確性仍存在一定限制，故探索方便、廉價(jià)、有效的胰腺癌腫瘤標(biāo)志物具有重要意義[15-16]。

ANXA2 具有多種調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的作用，如調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、凋亡、血管生成、細(xì)胞入侵、遷移、黏附等[17]，在惡性腫瘤的發(fā)病過程中發(fā)揮正向調(diào)節(jié)作用[18-19]。ANXA2 為一種外分泌蛋白，其被釋放到外周血中，并能夠從血清中檢出。研究發(fā)現(xiàn)多種惡性腫瘤血清ANXA2 水平升高，如鄭張軍等[20]研究發(fā)現(xiàn)胃癌患者血清ANXA2 水平升高，血清ANXA2 水平與胃癌的臨床分期、浸潤(rùn)程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，認(rèn)為血清ANXA2 為評(píng)價(jià)胃癌發(fā)生、發(fā)展的有效指標(biāo)；徐冬云等[21]研究發(fā)現(xiàn)ANXA1 在膽道腫瘤患者血清中升高，并有望成為判斷膽道腫瘤殘存及預(yù)測(cè)病情發(fā)展的潛在標(biāo)志物；岑美婷等[22]研究發(fā)現(xiàn)血清ANXA2 水平對(duì)胃癌診斷的敏感性和特異性優(yōu)于CEA 和CA19-9，認(rèn)為血清ANXA2 水平可輔助診斷胃癌。上述研究表明血清ANXA2 在胃癌、膽道腫瘤等惡性腫瘤中具有潛在腫瘤標(biāo)志物的作用。本文對(duì)胰腺癌患者血清ANXA2 水平進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)胰腺癌患者血清ANXA2 水平升高，血清ANXA2 水平診斷胰腺癌的AUC、敏感性和特異性雖然低于CA19-9，但是兩者聯(lián)合診斷胰腺癌的AUC、敏感性和特異性均顯著提高。因此，ANXA2 可能參與胰腺癌的發(fā)病過程，與CA19-9 聯(lián)合可提高胰腺癌的診斷效能。

ANXA2 與血纖溶酶原、組織纖溶酶原激活物相結(jié)合，導(dǎo)致纖溶酶原向血纖維蛋白溶酶轉(zhuǎn)化，血纖維蛋白溶酶可降解細(xì)胞外基質(zhì)，激活基質(zhì)金屬蛋白酶，從而在惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[23-24]。ANXA2 在乳腺癌等惡性腫瘤中高表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[25]。本文從臨床研究中證實(shí)，血清ANXA2 水平與胰腺癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，血清ANXA2 低表達(dá)患者OS和DFS 均高于ANXA2 高表達(dá)組。因此ANXA2 參與胰腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移過程，血清ANXA2 水平高的胰腺癌患者容易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重影響患者預(yù)后。綜上所述，胰腺癌患者血清ANXA2 水平升高，檢測(cè)血清ANXA2 水平在胰腺癌的診斷、病情進(jìn)展和預(yù)后評(píng)估中具有一定輔助和指導(dǎo)價(jià)值。