miR-1307在豬卵巢顆粒細胞周期中的作用

李建，姚望，杜星，潘增祥，李齊發(fā)

(南京農業(yè)大學動物科技學院，江蘇 南京 210095)

微小RNAs(microRNAs，miRNAs)是一類長度20～22個核苷酸的非編碼RNA分子(non-coding RNAs，ncRNAs)。研究發(fā)現(xiàn)，miRNAs主要通過轉錄后水平沉默靶基因表達，進而在各種組織和器官的多種細胞生理和病理過程中發(fā)揮至關重要的作用[1-2]。在哺乳動物卵巢組織中，miRNAs在卵母細胞、體細胞(如顆粒細胞)和卵泡液中廣泛表達，并調控多種卵巢功能，從原始卵泡庫的維持和起始，到排卵、黃體形成和卵巢老化[2-4]。在各種卵巢細胞中，卵巢顆粒細胞中miRNAs的研究最為深入，涉及各種顆粒細胞功能，如顆粒細胞增殖[5]、顆粒細胞凋亡[2]、顆粒細胞自噬[6]、類固醇激素分泌[7]和細胞周期等[8]。目前靶向卵巢顆粒細胞凋亡的miRNAs研究最多，如miR-26b[5]、miR-425[9]、miR-1306[10]和miR-204[11]等。基因內miR-126通過靶向抑制TGFB2基因，抑制卵巢顆粒細胞中TGF-β信號通路，進而促進顆粒細胞凋亡和卵泡閉鎖，介導高繁殖力候選基因NORFA對豬繁殖性能的調控[2]。眾所周知，芳香化酶P450arom是卵巢顆粒細胞中雌激素合成通路的限速酶，其編碼基因CYP19A1被發(fā)現(xiàn)受多個miRNAs如miR-1275[5]、miR-10b[12]和miR-27a-3p[13]等的直接或間接調控，從而介導miRNAs對顆粒細胞雌激素分泌的調控。但目前關于靶向調控卵巢顆粒細胞周期的miRNAs研究較少[8,14]。本文以豬卵巢顆粒細胞為研究對象，利用流式細胞技術分析miR-1307在顆粒細胞周期中的作用，以期為解析哺乳動物細胞周期的miRNAs調控網(wǎng)絡提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗用新鮮卵巢來自南京祿口機場屠宰場的成年杜長大商品母豬。用75%酒精消毒后的手術剪將剛屠宰的母豬輸卵管末端的卵巢剪下，簡單清洗后將卵巢浸泡在37 ℃的生理鹽水中，盡快運送回實驗室。……