乳腺癌中CDC25A和P57kip2蛋白表達與病理分級及臨床分期的關系

程波

（九江市第三人民醫院病理科，江西 九江 332000）

乳腺癌是威脅人類健康的癌癥之一。乳腺癌潛伏、發展時間較長，病情發展包括多個階段，并伴隨基因改變，但P57kip2、CDC25A 表達與臨床分期有無關系，現代臨床研究尚無定論[1]。有學者對P57kip2、CDC25A 進行研究發現[2]，CDC25A 能調節細胞運轉，促進 G1/S 期，P57kip2 對細胞增殖有阻礙作用，同時底物磷酸化受到抑制，細胞G1期持續時間延長。為進一步探析P57kip2、CDC25A與乳腺癌進程的相關性，本研究采用免疫組化法對癌細胞進行染色檢測，以探討蛋白表達與病理分級及臨床分期的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年4月至2019年5月本院收治的120例乳腺癌患者為研究對象。所有患者均為女性，年齡35～79歲，平均年齡（45.56±2.47）歲。按照UICC分期標準將患者分為Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期，各35例、40例、45例；按照WHO病理分級標準將患者分為Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級，各44例、36例、40例。患者臨床資料差異無統計學意義，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批同意。

納入標準：經CT、MRI等檢查確診為乳腺癌；患者知曉研究并簽署知情同意書；精神狀態正常可配合檢查者；近期未服用抗癌藥物進行化療。排除標準：拒絕參與研究者；對本研究試劑過敏者；有化療史者；無法全程配合檢查者。

1.2 方法 檢測試劑主要為P57kip2、CDC25A、EliVision試劑盒，并準備硝酸纖維素膜，所有試劑由福州邁新公司提供。

取患者乳腺癌組織放置在試管中（試管編號對應患者姓名），制成石蠟標本。將標本置于20℃條件下存儲，防止癌細胞繼續生長影響實驗結果。將標本切片進行染色，切片厚度為4μm，切片置于完全消毒的載玻片上，蓋上蓋玻片，在玻片一端滴入染色試劑，另一端用吸水紙吸引試劑快速染色，玻片中無氣泡表明染色成功，觀察組切片顏色，進而判斷其陰性、陽性。若顏色呈現棕黃色，則說明P57kip2蛋白、CDC25A表達率高，如果表達率下降，則顏色變暗，呈棕色、褐色。

1.3 觀察指標 統計患者年齡、臨床分期、病理分級及淋巴結轉移情況，記錄染色后陰性、陽性例數，分析P57kip2、CDC25A表達與上述因素的相關性。

1.4 統計學方法 采用SPSS 21.0統計軟件進行數據分析，計數資料用[n（%）]表示，比較采用Z檢驗，計量資料用“±s”表示，比較用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CDC25A 表達與病例分級及臨床分期的相關性分析患者年齡與CDC25A 表達無相關性；病理分級與CDC25A 表達有相關性，分級越高，CDC25A表達越低（P＜0.05）；臨床分析與CDC25A 表達存在相關性，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期CDC25A 表達率逐漸下降（P＜0.05）；淋巴結轉移與CDC25A 表達有相關性，轉移越多，CDC25A表達率越低（P＜0.05），見表1。

2.2 P57kip2 蛋白表達與病理分級及臨床分期的相關性患者年齡與P57kip2 蛋白表達無相關性；淋巴結轉移數越多，P57kip2 蛋白表達越低（P＜0.05）；臨床分期越低，P57kip2 蛋白表達率越高（P＜0.05）；病理分級越低，P57kip2蛋白表達率越高（P＜0.05），見表2。

表1 CDC25A表達與病例分級及臨床分期的相關性分析Table 1 Correlation analysis of CDC25A expression with pathological grade and clinical stage

表2 P57kip2蛋白表達與病理分級及臨床分期的相關性Table 2 Correlation between P57kip2 protein expression and pathological grade and clinical stage

3 討論

乳腺上皮細胞癌變稱之為乳腺癌，誘發癌變因素較多，目前臨床對其誘因尚無完整定論。乳頭溢液、腫脹等是乳腺癌早期癥狀，隨病情發展，癌細胞逐漸向周圍組織、器官擴散[3]。全球調查顯示[4]，發展中國家的乳腺癌發病率較高，女性為高發人群，發病率超過24%。Masuoka等[5]在1995年，采用雙雜交系統將P57kip2 蛋白成功克隆，經長期研究，發現P57kip2 是抑癌基因，在細胞增殖分化過程中，負責負性調控。人體染色體中的11p15.5是P57kip2的基因位置，57 KD為其分子量，能同時進行多個氨基酸多肽的編碼，最多編碼數量為316 個。在此之后，關于P57kip2 表達與乳腺癌發生發展的研究逐漸增多，有學者研究顯示[6]，P57kip2蛋白能與促進細胞增殖的相關因子進行結合，如cyclin E-CDK2，細胞增殖被抑制，長時間停滯在GI期，當癌癥發展到后期，P57kip2表達率逐漸下降[7-8]。這一結論與本研究結論一致，對臨床分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者的癌細胞陽性、陰性檢出率進行統計，發現隨分期程度、病理分級、淋巴結轉移程度加深，P57kip2 表達率逐漸下降（P＜0.05），但患者年齡與P57kip2表達無相關性。本研究對CDC25A表達與臨床分期、病理分級進行分析，發現其與P57kip2 蛋白一樣，在臨床分期、病理分級中CDC25A表達呈現線性變化[9-10]。本研究結果顯示，隨分期程度增加、分級程度增加及淋巴結轉移枚數增多，陽性檢出率越高，CDC25A 表達越低（P＜0.05）。由上述結果可知，CDC25A、P57kip2與癌細胞分化、癌癥發展密切相關，兩者在癌細胞Ⅰ期表達較多，患者陽性檢出率較低，隨分期增加陽性檢出率增加，兩者表達率降低。在癌癥發展中，CDC25A、P57kip2 有一定協同作用，但此結論尚需大樣本量的臨床研究證實。

綜上所述，乳腺癌發展過程中，CDC25A、P57kip2 表達會對癌癥進程產生影響，在臨床診斷中可將其作為診斷標記。