復方藤芷膏治療小鼠化療性靜脈炎的實驗研究1）

楊晉田，劉麗坤，王晞星，李宜放，戴筱杰，李躍華，杜雅莉

化療性靜脈炎是化療過程中常見的并發癥，目前治療方法較多，但是作用效果單一，中醫藥治療顯示出它的優勢。本研究應用中藥復方藤芷膏治療化療性靜脈炎取得了較好的臨床療效，通過觀察復方藤芷膏對長春瑞濱注射液導致的小鼠化療性靜脈炎的發生率和病理組織改變的影響，探討復方藤芷膏對化療性靜脈炎的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康昆明種小鼠，體重31g±2g，由山西省中醫藥研究院實驗動物室提供，合格證號：晉動（A）－003號。實驗前1周飼養于山西省中醫藥研究院動物實驗中心以適應實驗室環境，實驗室溫度20℃±2℃，相對濕度34%，持續12h明暗交替。小鼠雌雄分籠，自由活動，自由飲水，標準鼠食喂養。

1.2 實驗藥品及試劑 復方藤芷膏：山西省中醫藥研究院制劑室提供。羊毛脂：天津文申泰化學試劑有限公司，批號080301。凡士林：山西省中醫藥研究院制劑室提供。喜遼妥：德國三共藥廠（Sankyo Pharma GmbH），批號309001。酒石酸長春瑞濱注射液：江蘇豪森藥業股份有限公司，批號20080218。甲醛溶液：山西省中醫藥研究院中心實驗室提供。病理切片，HE染色試劑 ：70%乙 醇 ，75% 乙 醇 ，80%乙 醇 ，85%乙 醇 ，90% 乙 醇 ，95% 乙醇，100%乙醇，鹽酸乙醇，二甲苯，石蠟，蒸餾水，蘇木素，伊紅。

1.3 實驗主要器材 Olympus光學顯微鏡，日本Olympus公司。LEICA－2135型旋轉切片機，德國。MIAS－2000圖像分析系統，四川川大智勝軟件股份有限公司。

1.4 實驗方法

1.4.1 小鼠化療性靜脈炎模型的建立 參照文獻［1］和預實驗結果進行模型制備。小鼠尾靜脈右側進針注射長春瑞濱注射液。常規消毒備皮，微量注射器接4號針頭抽取少量生理鹽水，于小鼠尾靜脈的右側中、遠三分之一處向近心端穿刺，穿刺盡量一次成功，避免針頭在組織中探找靜脈。針頭進入血管后，先注射生理鹽水約0.1mL確保針頭在靜脈內藥物無外滲后，保持針頭位置不變，接內裝有長春瑞濱的注射器快速推注，隨后再注射少量生理鹽水沖洗靜脈。注射完成后檢查血管，疑有外滲者廢棄后再取小鼠重新造模。長春瑞濱使用劑量：根據長春瑞濱臨床常規用藥劑量通過藥理學公式換算［2，3］，按實驗小鼠體重算出小鼠用藥量為4.75mg／kg，按照7倍量注射（經此前預試驗結果，此量注射成模率100%，無動物死亡），注射量為0.01 mL／g。

1.4.2 分組及治療給藥 取化療性靜脈炎模型小鼠40只，隨機分為4組：模型對照組、喜遼妥對照組、治療高劑量組、治療低劑量組。造模72h后，小鼠尾靜脈自根部至尾端外涂治療用藥膏或賦形劑，每日2次，2次間隔時間6h，連續敷藥6d。每次涂藥前生理鹽水清潔尾部，然后將藥膏均勻涂于鼠尾四周，涂藥后尾部用抗敏膠帶包扎，保證藥物在局部停留6h，以利于藥物吸收。復方藤芷膏高、低劑量組外涂不同濃度復方藤芷膏，喜遼妥對照組外涂喜遼妥乳膏，模型對照組外涂賦形劑。

1.4.3 樣品采集 實驗用藥6d結束后，小鼠脫臼處死，取鼠尾自尾端2cm以上截取2cm，用10%甲醛固定，常規石蠟包埋。

1.5 觀察指標

1.5.1 靜脈炎分級 記錄動物整體情況、靜脈顏色改變、局部組織腫脹及消退情況。參考國際靜脈輸液護理學會（INS）臨床分級標準及國內高玉珍等［3］的實驗，用藥6d后分別對小鼠化療性靜脈炎進行臨床評價。0級為正常無靜脈炎發生；Ⅰ級為穿刺點出現紅斑和或水腫，靜脈無條索狀改變，未觸及硬結；Ⅱ級為穿刺點出現紅斑和／或水腫，沿靜脈出現條索狀改變（腫脹、變紅），未觸及硬結；Ⅲ級為穿刺點紅斑和／或水腫，靜脈有條索狀改變，可觸及硬結或出現潰爛。

1.5.2 病理組織學觀察 臨床評價后脫臼處死，取鼠尾自尾端2cm以上截取2cm，用10%甲醛固定，HE染色，鏡下觀察尾靜脈組織學病理變化。

1.6 統計學方法 采用SAS 9.0統計軟件包對結果進行統計學分析。各組靜脈炎發生率用構成比描述，統計推斷采用非參數檢驗，組間差異比較用秩和檢驗，組內差異用符號秩和檢驗。

2 結果

2.1 光鏡下可見結果

2.1.1 模型對照組 ①受損靜脈淤血，血管腔擴大，內皮層不完整，內膜可脫落；②白細胞邊集并大量附著于血管內表面，血管壁全層及周圍結締組織內可見較多炎細胞浸潤，以巨噬細胞和淋巴細胞為主含少量中性粒細胞；③血管周圍組織水腫，組織間隙增大，可有少量出血。

2.1.2 喜遼妥對照組 大部分小鼠可見：①受損靜脈淤血，血管腔擴大，內皮層不完整，內膜可脫落；②血管周圍組織水腫，組織間隙增大，可有少量出血。

2.1.3 治療高劑量組 有輕微炎性改變，內皮層不完整，有個別可見血管周圍組織水腫，組織間隙增大，可有少量出血。

2.1.4 治療低劑量組 炎性改變較明顯，大部分可見白細胞邊集并少量附著于血管內表面，血管壁全層及周圍結締組織內可見炎細胞浸潤。

2.2 治療前各組靜脈炎炎癥程度比較（見表1）

表1 治療前各組靜脈炎炎癥程度比較 只（%）

2.3 治療后各組靜脈炎炎癥程度比較（見表2）

表2 治療后各組靜脈炎炎癥程度比較 只（%）

3 討論

化療性靜脈炎是化療過程中出現的一種并發癥，根據肌膚灼熱、疼痛、局部顏色青紫呈條索狀改變等表現，屬中醫學“脈痹”范疇。中醫學認為，人體氣血運行“如環無端”，血脈只有處于“如水之流”的狀態才能發揮正常的作用?；熕幬飳儆跓岫局罚拘扒忠u人體血脈，熱毒與血互結成瘀，阻塞絡脈，導致血凝不流，血脈阻塞，引起靜脈炎。化療性靜脈炎的病理學表現為受損靜脈淤血，白細胞邊集并大量附著于血管內表面，血管周圍組織水腫等，從微觀角度也提示化療性靜脈炎與瘀毒之關系。因此，化療性靜脈炎的病機在于瘀毒凝滯血脈，即瘀毒內阻，脈絡不通.復方藤芷膏為臨床經驗用方，方中以藤黃為君藥、白芷為主要藥物，再配合冰片、生軍、薄荷等藥物達到清熱祛濕，解毒排膿，消腫止痛，活血祛瘀、通經絡的目的。本實驗結果證實，高劑量復方藤芷膏對小鼠化療性靜脈炎有抗炎、修復、活血止痛、消腫的作用。該藥直接局部外敷，保留一定的時間，藥物直達病所，滲透靜脈血絡，消除病變部位癥狀，使藥物發揮最大功效，是治療靜脈炎的最佳用藥途徑。本實驗為臨床的應用提供了可觀依據，為化療性靜脈炎的治療提供了新思路、新方法。

［1］ 黃吉春，郭勇，余鴻.化療性靜脈炎小鼠模型的建立［J］.四川動物，2007，26（3）：693－696.

［2］ 陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.北京：人民衛生出版社，1993：30－36.

［3］ 高玉珍，廖蔓云，孫宇寧，等.中藥治療靜脈炎的臨床應用與觀察［J］.護理學雜志，1993，8（4）：265.