AFP、GGT、AST/ALT在肝細胞癌中的診斷價值研究

陽思濤，秦雪

（1.廣西醫科大學，廣西 南寧 530021；2.廣西生物醫藥協同創新中心，廣西 南寧 530021；3.廣西醫科大學第一附屬醫院 檢驗科，廣西 南寧 530021）

0 引言

肝細胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是世界上發病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一，至今仍然是人類健康的主要威脅，給患者帶來了沉重的心理壓力和經濟負擔。自20世紀80年代AFP引入以來，其在醫療實踐中的應用以及對肝癌中作用的認識不斷發展和擴大，它也是目前世界上應用最廣泛的HCC血清生物標志物。然而，其自身的局限性，許多晚期肝癌患者的AFP檢測結果呈陰性。當前，有效的肝癌治療手段，手術切除和肝移植，其5年總生存率也僅為7%[1]。HCC患者的預后效果與能否準確、早期診斷密切相關。雖然當今計算機斷層掃描（CT）和磁共振成像（MRI）技術的進步極大地提高了肝癌的診斷性能，但是它們成本高昂，且不利于早期發現檢測和篩查[2]。血細胞計數和肝功能檢查作為當今常規體檢項目，目的在于反映機體免疫水平和營養狀況[3]，這項研究回顧性分析了甲胎蛋白（AFP）、血清γ-谷氨酰轉移酶（GGT）和天冬氨酸氨基轉移酶和丙氨酸氨基轉移酶比值（AST/ALT）在肝臟疾病患者和健康體檢者中的差異表達情況，目的探討AFP、GGT、AST/ALT在肝臟疾病中的診斷價值，為肝臟疾病診斷和檢查者的早期監測提供依據，具體分析如下。

1 資料和方法

1.1 納入患者基本資料

1.1.1 研究對象

將2019年1月至2019年12月在廣西醫科大學第一附屬醫院接受治療的肝細胞癌患者選定為研究小組，選擇同一時期肝硬化和健康體檢者作為對照群體，進行回顧性分析研究。

1.1.2 研究組

選擇根據《病毒性肝炎防治方案》中符合肝癌診斷標準經本院確診為肝細胞癌，以及排除可能影響檢驗指標的癌癥患者，共110例，其中男性58例，女性52例，平均年齡（51.87±10.11）歲。

1.1.3 對照組

把同一時期本院肝硬化患者和體檢中心體檢結果無臨床異常意義的人群作為對照組，其中肝硬化組(LC)52例，男性36例，女性16例，平均年齡（51.13±13.24）歲；健康體檢組(HG)83例，男性43例，女性40例，平均年齡（48.63±11.46）。

1.2 方法

AFP、GGT、AST/ALT均采用電化學發光法檢測，使用美國雅培全自動生化免疫分析流水線系統及其配套試劑。

1.3 統計學處理

使用IBM SPSS 23.0和GraphPad Prism 5 軟件進行統計分析。計數資料運用卡方檢驗，結果用率表示。連續變量分析結果用均值±標準差表示。對各組數據進行正態性檢驗測試，正態分布資料選擇單因素方差分析，結果表示為±s；多組別非正態分布資料選擇Kruskal-Wallis H 檢驗，結果用四分位數［M(P25-P75)］表示，P＜0.05為差異具有統計學意義。Spearman 秩相關分析各指標之間關聯性。繪制單獨以及聯合檢測受試者工作曲線（ROC）曲線計算曲線下面積(AUC)比較各指標診斷效能。

2 結果

2.1 基本資料比較

三組間年齡和性別比較差異沒有統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 各組研究對象年齡和性別比較

2.2 各組AFP、GGT、AST/ALT檢測結果比較

肝細胞癌組、肝硬化組AFP、GGT、AST/ALT均明顯高于健康體檢組(P＜0.05)，見表2。

表2 不同組別中 GGT、AFP、AST/ALT 的四分位數比較［M(P25-P75)］

2.3 AFP、GGT、AST/ALT在肝細胞癌中診斷效能評價

2.3.1 GGT、AFP、AST/ALT診斷肝細胞癌的受試者工作曲線分析

單獨檢測時AFP的ROC曲線下面積AUC(95% CI)最大，為0.840(95% CI 0.781-0.899)，差異具有統計學意義(P＜0.05)。聯合檢測時，AFP+GGT+AST/ALT的AUC最大，為0.953(95% CI 0.926-0.981)(見表3、圖1、圖2)。

表3 GGT、AFP、AST/ALT單獨及聯合檢測診斷肝細胞癌的AUC(95% CI)對比

圖1 單獨檢測診斷肝細胞癌的ROC曲線分析

圖2 聯合檢測診斷肝細胞癌的ROC曲線分析

2.3.2 AFP、GGT、AST/ALT的約登指數比較

AFP、GGT、AST/ALT約登指數最大值對應的診斷臨界值以及此時的敏感度和特異性，見表4。

表4 GGT、AFP、AST/ALT 診斷HCC時的約登指數比較

2.3.3 AFP、GGT和AST/ALT診斷肝細胞癌的相關性分析

所有研究對象在Spearman 秩相關分析中，AFP、GGT和AST/ALT三項指標之間都具有相關性，見表5。

表5 AFP、GGT和AST/ALT診斷肝細胞癌的相關性分析

3 討論

肝細胞癌（HCC）是最常見的肝癌類型[4]，其主要風險因素是乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染以及過量飲酒和黃曲霉毒素B1暴露，發病率和病死率較高，約占原發性肝癌的90%[5]。每年新增的HCC確診病例大約有50多萬例，篩查和早期診斷是降低肝癌高死亡率的關鍵。磁共振成像等成像技術和AFP等腫瘤標記物是目前推薦的非侵入性診斷方法。AFP屬于血清蛋白家族，是最早發現的蛋白腫瘤標志物之一，也是診斷HCC的主要血清學標志物[6]，通常認為人類的AFP病理閾值為血漿濃度20ng/mL，血漿濃度400 ng/mL以上是肝癌的可靠診斷指標。HCC患者AFP血漿水平和HBV感染、腫瘤較大、細胞分化不良和血管侵犯正相關。腫瘤進展過程中AFP升高，在轉移性腫瘤患者中檢測到最高水平[7]。然而，肝癌診斷和很多循環腫瘤標記物一樣面臨敏感性和特異性的雙重問題，AFP不僅在肝癌患者中上升，慢性肝病，胃腸道腫瘤，生殖器官惡性腫瘤患者以及妊娠期女性中也可以觀察到AFP增加，尤其是，AFP在慢性乙型肝炎患者中陽性率為30%，乙型肝炎后肝硬化患者中陽性率為34%，這表明其特異性不高[8]。高達40%的肝癌患者尤其是疾病早期患者中，AFP結果為陰性，這反映了其低敏感性[9]。除此之外，肝癌的篩查還存在檢測到的腫瘤通常預后不良，治療方法極少的問題。

有研究指出，即使慢性乙型肝炎和乙肝后肝硬化患者AFP檢測結果為陰性，GGT、AST/ALT＞1（即AST＞ALT）升高時，也要警惕肝細胞癌的發生。GGT、AST/ALT在肝臟疾病篩查中屬于重要酶學指標，在各種肝臟疾病診斷中具有重要價值[10]。此次研究結果顯示，肝細胞癌、肝硬化患者血清AFP、GGT、AST/ALT明顯高于健康體檢對照者。AFP、GGT、AST/ALT在鑒別診斷肝細胞癌與非肝細胞癌之間具有重要意義,且三者之間存在明顯相關性，此外，三項指標聯合檢測具有最佳診斷性能。GGT廣泛存在于人體的各組織臟器中，血清GGT大部分來源于肝臟，GGT水平在肝癌以及肝內阻塞患者中都會顯著上升，癌細胞也合成GGT。但是，GGT在肝細胞癌診斷中假陽性率很高，膽囊炎，膽結石[10]，胰腺腫瘤或硬化性膽管炎，急慢性肝炎以及肝硬化患者中也有可能升高。ALT主要存在于肝細胞的非線粒體中，在肝臟、腎臟、心臟、骨骼肌中含量依次遞減。而大約80%的AST存在于肝細胞的線粒體中，AST含量上升，通常反映更加嚴重的肝臟損傷。患有肝細胞癌的患者由于癌細胞的侵襲，正常的肝細胞受到損害，ALT和AST水平升高，并且AST/ALT比值通常＞1。研究報道，結合分析血清GGT水平和AST/ALT對肝細胞癌具有重要的診斷價值[11]。增加AST/ALT可有效消除膽囊炎，膽結石，胰腺腫瘤和硬化性膽管炎引起的假陽性，提高診斷準確性。這也和此次研究相似，三項聯合檢測時診斷性能最佳。總之，AFP結合分析血清GGT活性和AST/ALT可有助于早期診斷肝細胞癌及早期診斷AFP陰性的肝細胞癌和健康體檢者的自我監控。但由于本次研究納入的研究對象地區比較局限，人數較少，往后還需要進一步實驗研究探討出HCC診斷的最佳依據。