重組抗原免疫印跡法及化學(xué)免疫發(fā)光法檢測梅毒假陽性價值比較

王揚

梅毒的診斷往往通過血清檢測得到結(jié)果,近年來生物監(jiān)測領(lǐng)域取得了較大的進步,因此對于梅毒診斷方法的研究也取得了一定進展。曾經(jīng)梅毒的血清檢測通常先將活的梅毒轉(zhuǎn)種提純后得到一種蛋白,這種蛋白存在特異性,它是抗原蛋白的一種,得到這種抗原蛋白后再進行免疫學(xué)印跡檢測,但是此方法受到了成本以及難度的限制,活梅毒的保存條件要求較為苛刻,病毒轉(zhuǎn)種需要耗費大量檢測成本,且經(jīng)過提純僅得到含量非常少的蛋白,并且配制人員在操作過程中被感染的可能性會大大提高,威脅檢測人員的生命安全。所以生物監(jiān)測中出現(xiàn)了基因工程抗原,它能夠取代天然抗原,從而對患者進行血清的檢查。近幾年出現(xiàn)了CMIA等多種檢測梅毒的方法,但是臨床研究結(jié)果顯示基因免疫方法檢測存在假陽性的幾率,對于無既往病史患者檢測結(jié)果的誤差會直接影響后續(xù)治療。因此RAWB用于無法進行解釋的陽性樣本的檢測,進一步排除假陽性的患者。為研究RAWB 及CMIA 檢測梅毒假陽性的價值,本文進行了較為細致的研究,現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取本院2018 年1～12 月63 份CMIA 檢測陽性樣本,根據(jù)患者年齡不同分為A 組(患者年齡19～50 歲,35 份)、B 組(患者年齡51～70 歲,12 份)、C 組(患者年齡71～100 歲,16 份)。有明確二期梅毒臨床表現(xiàn)患者(均為A 組)14 例,血清標(biāo)本16 份(其中2 例患者包括治療前及祛梅治療后的血清)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者樣本均為無既往梅毒病史的基因免疫檢測陽性樣本；②所有患者及家屬自愿同意并支持參加本次研究；③患者的認(rèn)知功能正常,可以正常溝通；④所有患者的肝腎功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并腫瘤；②無完整肝腎功能患者；③之前患有較為嚴(yán)重的呼吸系統(tǒng)疾病患者；④視力、聽力受損以及存在認(rèn)知障礙患者；⑤肝腎功能受損患者。

1.2 方法 對63 份樣本進行初篩梅毒血清試驗,包括CMIA、TPPA、RPR。CMIA 檢測全自動完成。對所有血清樣本進行抗-TP 檢測,按試劑說明書肉眼判讀結(jié)果,反應(yīng)孔中細胞沉積在孔中央呈光滑紐扣狀為陰性,反應(yīng)孔出現(xiàn)凝集為不規(guī)則沉積則陽性。對63 份樣本進行RAWB、歐蒙WB 檢測。重組梅毒螺旋體基因蛋白抗原免疫試劑采用基因重組蛋白抗原制備的 NC膜。根據(jù)梅毒印跡實驗方法進行血清樣本檢測,通過實驗NC 膜條質(zhì)控條帶及各抗原條帶的顯色結(jié)果進行結(jié)果判斷。陽性:質(zhì)控線顯色正常,抗原線有≥2 條顯色; 可疑:抗原線只有 1 條顯色; 陰性:抗原線均不顯色; 無效:質(zhì)控線不顯色,或顯色明顯減弱的。對 63 份血清標(biāo)本進行確證實驗,采用說明書中的判斷標(biāo)準(zhǔn),以WB 陽性結(jié)果為真陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察63 份樣本初篩梅毒血清試驗結(jié)果；對比63 份樣本CMIA、RAWB、歐蒙WB 檢測結(jié)果,三組的RAWB 與CMIA 檢測結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 63 份樣本初篩梅毒血清試驗結(jié)果 A 組CMIA檢測陽性率為94.29%,出現(xiàn)2 份弱陽性樣本,TPPA 與RPR 檢測該2 份樣本均為陰性；B 組CMIA 檢測陽性率為91.67%；C 組CMIA 檢測陽性率為81.25%。見表1。

2.2 63 份樣本三種方法檢測結(jié)果對比 RAWB 與歐蒙WB 檢測陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.133,P>0.05)。RAWB、歐蒙WB 檢測陽性率均低于CMIA,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=14.175、16.755,P<0.05)。見表2。

2.3 三組RAWB 與CMIA 檢測結(jié)果對比 A 組的RAWB 檢測陽性率與CMIA 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.729,P>0.05)；B 組、C 組的RAWB 檢測陽性率均低于同組CMIA,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=8.711、10.165,P<0.05)。見表3。

表1 63 份樣本初篩梅毒血清試驗結(jié)果［n(%)］

表2 63 份樣本三種方法檢測結(jié)果對比［n(%)］

表3 三組RAWB 與CMIA 檢測結(jié)果對比［n(%)］

3 討論

梅毒是人體感染了梅毒螺旋體后發(fā)作的一種傳染性較強的疾病,隨著吸毒人群以及同性戀數(shù)量的增加,梅毒的發(fā)病率逐漸上升。對梅毒的檢測具有一定的預(yù)防意義,因此對梅毒的有效檢測方法也一直是諸多醫(yī)學(xué)者的研究熱點［1,2］。目前常用檢測梅毒的方法主要有血清檢測,檢測包括兩部分：非梅毒螺旋體的抗原檢測以及梅毒螺旋體的抗原檢測［3,4］,TPPA、CMIA 都能夠?qū)γ范韭菪w進行抗原的血清檢測［5,6］,但是診斷準(zhǔn)確率受患者病史的影響較大。CMIA 對于孕婦以及中風(fēng)患者的陽性結(jié)果無法進行準(zhǔn)確分析,需要WB 方法進行協(xié)助診斷,避免假陽性影響患者的后續(xù)治療。

本研究結(jié)果顯示：A 組CMIA 檢測陽性率為94.29%,B 組CMIA 檢測陽性率為91.67%；C 組CMIA檢測陽性率為81.25%。RAWB 與歐蒙WB 檢測陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。RAWB、歐蒙WB 檢測陽性率均低于CMIA,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。A 組的RAWB 檢測陽性率與CMIA 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；B 組、C 組的RAWB 檢測陽性率均低于同組CMIA,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

綜上所述,CMIA 的檢測陽性率偏高,存在假陽性的幾率,對于無既往病史患者如CMIA 檢測結(jié)果為陽性,采用RAWB 能夠進行更為準(zhǔn)確的診斷,避免診斷失誤影響患者的治療。