野生動物沙門氏桿菌的檢疫方法

李依然

（東北林業(yè)大學野生動物與自然保護地學院，哈爾濱150040）

沙門氏桿菌病又稱副傷寒，是由沙門氏桿菌引起的各種野生動物、家畜、家禽的多種疾病的總稱。該病對幼齡動物及禽類危害較大，常引起急性敗血癥、胃腸炎及其他局部炎癥。成年動物及禽類往往呈散發(fā)或局灶性感染。

1 臨診檢疫

根據(jù)動物的種類、年齡、機體的抵抗力、病原的毒力和數(shù)量等不同可出現(xiàn)多種類型的臨床癥狀，大體上可以分為急性、亞急性和慢性3類。

急性型：多見于仔獸，有的病例未出現(xiàn)任何明顯的臨床癥狀突然死亡，從感染到死亡一般不超過24 h。對疾病抵抗力稍強者，3~5 d出現(xiàn)癥狀，通常表現(xiàn)為食欲減退并很快絕食，體溫升高達41~42℃并持續(xù)。病獸四肢無力，喜躺臥不愿動，偶爾走動時弓背、腳步移動緩慢、兩眼流淚。較明顯的臨床癥狀為嚴重的下痢，有時嘔吐，嘔吐物含較多黏液。病程稍長者可出現(xiàn)脫水癥狀，眼窩塌陷，流淚。病程從初期的興奮，很快轉為沉郁，最后體溫下降，可達正常體溫以下，痙攣抽搐，全身衰竭，在昏迷狀態(tài)下死亡。病程一般不超過2~3 d。急性病例多以死亡告終，偶有幸存者可轉為慢性。

亞急性型：潛伏期一般7~14 d，病獸體溫高達40~41℃，呼吸淺表頻數(shù)，精神沉郁，食欲減少至廢絕。有的病例出現(xiàn)化膿性結膜炎、眼結膜潮紅，流眼淚并有膿性分泌物。最主要的癥狀為胃腸機能高度紊亂、下痢，便出含有大量卡他性黏液的液狀或水樣稀便，個別病例的稀便中含有血液。有的病例出現(xiàn)嘔吐。下痢和嘔吐嚴重病獸很快脫水，眼睛下陷無神，被毛粗糙，蓬亂無光澤，并污染糞便，尤以后肢和肛門周圍為重。病獸四肢軟弱無力，以后肢為重，喜躺臥，運動障礙，患病后期出現(xiàn)后肢不全麻痹，最后可癱瘓，在嚴重衰竭下死亡。病程一般為7~14 d。北極狐和銀黑狐患病時常出現(xiàn)黃疸，特別是感染豬霍亂沙門氏桿菌時尤為嚴重。其他動物則沒有或僅有輕微黃疸出現(xiàn)。水貂和毛絲鼠感染沙門氏菌時常發(fā)生敗血癥，導致死亡。

慢性型：慢性病例可由急性或亞急性病例轉變而來，也有的一開始就呈慢性經(jīng)過。癥狀不明顯、不劇烈，患病動物主要表現(xiàn)為消化機能紊亂，食欲不同程度的減弱，下痢，糞便常混有卡他性黏液，可見惡臭的茶色或綠褐色稀便。有的病例出現(xiàn)化膿性結膜炎。患病動物精神沉郁、呆滯、進行性消瘦、貧血、失水眼窩下凹、運動減少減慢、多萎縮于圈角或小室內(nèi)。被毛粗糙、蓬亂無光澤，并被糞便所污染，甚至粘結成塊，肛門周圍尤其嚴重。病獸最后在極度衰竭的情況下死亡。病程多為28 d，有的可達數(shù)月之久。臨床康復后可成為帶菌者。在交配與妊娠期感染本病的母獸，出現(xiàn)大批的空懷，空懷率可達18%左右；受孕后的母獸多在產(chǎn)前5~15 d流產(chǎn)，流產(chǎn)母獸出現(xiàn)輕微不適的癥狀或根本觀察不出異常表現(xiàn)而流產(chǎn)，流產(chǎn)率可達15%，即使不流產(chǎn)，仔獸生后也發(fā)育不良，多數(shù)在生后10 d內(nèi)死亡。哺乳期發(fā)病的仔獸表現(xiàn)萎靡、衰竭和吸吮乳頭無力；同窩仔獸散亂趴臥到籠舍的各處，有時呈游泳式運動，發(fā)出輕微的呻吟和鳴叫，有的發(fā)生抽搐與昏迷，多數(shù)病仔獸持續(xù)2~7 d后死亡。耐過者發(fā)育遲緩，恢復后長期帶菌。

2 實驗室檢疫

細菌學檢查：通常以腹瀉為主的胃腸炎，患病動物生前可采直腸糞便或新鮮排糞，尤其帶血和黏液的糞樣；死后取病變腸段內(nèi)容物或腸黏膜及相關腸系膜淋巴結；敗血癥患病動物應采血液及病變臟器組織。未污染的樣品可直接接種在腸道桿菌鑒別或選擇培養(yǎng)基上分離單個菌落，污染病料應先增菌（常用的增菌培養(yǎng)基有：四硫磺酸鈉煌綠培養(yǎng)基、亞硒酸鹽胱氨酸培養(yǎng)基），再在選擇或鑒別培養(yǎng)基上進行平板分離。從選擇或鑒別培養(yǎng)基上挑選可疑的菌落作純培養(yǎng)，同時接種到三糖鐵斜面上培養(yǎng)。

選擇培養(yǎng)基是能抑制革蘭氏陽性菌及大腸桿菌的培養(yǎng)基，如SS瓊脂、去氧膽酸鹽瓊脂、亞硫酸鉍瓊脂和HE瓊脂等。鑒別培養(yǎng)基能抑制革蘭氏陽性菌生長，但腸桿菌科的細菌通常都能生長，大腸桿菌及其他發(fā)酵乳糖的細菌生長出有色菌落，而沙門氏菌及其他不發(fā)酵乳糖的細菌，生長出無色菌落，常用的這類培養(yǎng)基有麥康凱、遠藤氏瓊脂和伊紅美藍瓊脂等。

沙門氏桿菌在三糖鐵斜面上生長，可使斜面上部為紅色，而斜面底部為黃色，如該菌能產(chǎn)生H2S，還可使斜面出現(xiàn)黑色。經(jīng)三糖鐵斜面培養(yǎng)后，進一步確認可能為沙門氏桿菌后，將被檢菌株繼續(xù)做生化試驗，再進行抗原測定。抗原測定也可與生化試驗同時進行。抗原測定時，采用沙門氏桿菌多價O血清與被檢菌進行玻板凝集試驗（應注意除Vi抗原的影響）。

血清學檢查：除平板凝集試驗外，還有瓊脂擴散試驗和熒光抗體試驗等。