痰液結核分枝桿菌檢測診斷肺結核①

馬劍鋒

(洛陽市澗西區疾病預防控制中心<傳染病預防控制所>,河南 洛陽 471003)

肺結核是嚴重威脅人類生命健康的呼吸道傳染性疾病,肺結核感染使機體的免疫能力減弱,免疫應答功能紊亂。在肺結核患病的早期進行診斷和治療有利于患者康復,早期明確診斷、合理用藥對改善肺結核患者的預后有意義[1-2]。因此,準確、可靠的診斷方法是關鍵[3]。筆者探討細菌培養、涂片抗酸染色、熒光定量聚合酶鏈式反應(TB-PCR)與結核分枝桿菌/利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增檢測技術(Xpert MTB/RIF)檢測肺結核的效能。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2018年3月至2019年3月洛陽市澗西區疾病預防控制中心收治的60例肺結核的患者,男38例,女22例;年齡30~70歲,平均(52.7±14.4)歲?；颊卟∏榉戏谓Y核診斷標準[2],無其他感染,無心、肺功能障礙。

1.2 方法

采集患者痰液樣本,分別采用MTB培養法、涂片抗酸染色法、熒光定量聚合酶鏈式反應(TB-PCR)及結核分枝桿菌/利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增技術(Xpert MTB/RIF)檢測MTB。

1.2.1 儀器與試劑 酸性改良羅氏培養基,分枝桿菌(Middlebrook 7H9)培養基干粉(美國Becton Dickinson公司),抗酸染色試劑盒(濟南百博生物技術股份有限公司),結核分枝桿菌PCR擴增試劑盒(上海宏錦公司);熒光定量PCR儀(美國應用生物公司)。

1.2.2 樣本檢測 ①MTB培養法:痰液標本高速離心5 min,洗滌沉淀后,接種于培養管;每60 min使用熒光強度記憶探測器檢測培養管中的熒光強度。②涂片抗酸染色法:樣本涂抹于玻片正中央,晾干,滴加2滴石碳酸復紅染色液,夾持玻片在酒精燈上加熱5 min,冷卻后,冷水沖洗;滴加3%鹽酸酒精脫色1 min,晾干后,冷水沖洗;滴加堿性美蘭溶液進行復染,1 min后,冷水沖洗,晾干后,滴加香柏油,顯微鏡觀察?！?br>