孫德龍
(膠州市現代農業發展服務中心,山東 膠州 266300)
一個蛋雞養殖場雞群經常發生大腸桿菌病,表現為輕微的產蛋率下降、畸形蛋,抗生素治療后雞群產蛋率逐漸恢復正常。經筆者對養殖場情況的了解,發現此養殖戶疏于對飲水系統的定期消毒,于是筆者建議對其水源及入水線處水樣和出水線處水樣進行細菌檢測。
A:營養瓊脂培養基(NA.)(蛋白胨10.0g、牛肉粉3.0g、氯化鈉5.0g、瓊脂15.0g、蒸餾水1000.0ml)
B:VRB-MUG培養基(蛋白胨7.0g、酵母膏3.0g、乳糖10.0g、氯化鈉5.0g、膽鹽1.5g、中性紅0.03g、結晶紫0.002g、MUG0.1g、瓊脂15g、蒸餾水1000.0ml)
A:干熱消毒的18mm×180mm玻璃試管、2ml吸管、10ml吸管、直徑90mm平皿等。
B:水浴鍋:向水浴鍋內加入純凈水適量,溫度調至55℃。
C:其他:滅菌并加塞的250ml玻璃采水瓶、滅菌鹽水、液泵、記號筆、試管架、塑料桶等。
大腸桿菌VRB-MUG平板計數法檢驗程序。
送檢水樣—10倍系列稀釋—選擇2~3個適宜連續稀釋度的樣品勻液,接種VRB-MUG平板—37℃、18~24h—紫外燈照射,計數發熒光菌落—報告結果。
1.4.1 稀釋、加樣
A:用試管架擺上多組試管,每組2支,每個水樣各占一組,每個試管內加入9ml滅菌鹽水。
B:在無菌室內先將水樣瓶充分搖勻后,再打開瓶塞,從每個水樣瓶內取出4ml水樣分別加入3個平皿和一組試管的第一個試管內,每個平皿內加入1ml,用于傾注VRB-MUG培養基;試管內的水樣用于傾注NA,用1支2ml吸管在第一個試管內反復吸打使之均勻,取出2ml,1ml加入一個平皿中,另1ml加入第二個試管內,做完的2個稀釋度分別為10-1和10-2(將10-1、10-2和未稀釋水樣各做3個重復)。
1.4.2 傾注
將水浴鍋中冷卻到48~52℃的NA、VRB-MUG液體培養基分別傾注到相應的平皿中,每個平皿約15毫升,傾注后搖勻。
1.4.3 培養
待凝固后倒置于37℃恒溫箱中培養16h。
營養瓊脂培養基記數所有菌落為總菌數;VRB-MUG瓊脂培養基在紫外燈照射下,計數發熒光菌落即為大腸桿菌。
細菌總數平均值為105個/毫升,大腸桿菌數為0。
細菌總數平均值為120個/毫升,大腸桿菌數為0。
細菌總數平均值為3000個/毫升,大腸桿菌數為12。
該試驗結果表明,養殖場水源處達到了推薦的飲水標準(每毫升飲水中細菌總數小于1000,大腸桿菌數小于10),而經過飲水設備流出的水中微生物含量超標。
應根據雞舍的衛生狀況,定期對飲水管線外壁用清潔球進行人工擦拭和消毒,保持管線光亮如新,不給微塵物有滋生的場所,建議每5~7d清掃一次。另外,長期的飲水投藥、雞舍溫度適宜、水線內壓力恒定等使水線內壁形成一層營養膜,細菌、藻類等微生物極易生長繁殖,從而造成飲水水質污染。常用的處理方法如下:對于空欄雞舍:排空飲水管道,用高壓水槍沖洗以清除飲水管道內外的污垢,然后在飲水管中打入一些能清除生物膜的藥物,滯留4h后,用高壓水槍沖出,把水排空后待用。對于存欄雞舍:清潔飲水管外壁后,每隔14~30d,用壓力泵將一些氯制劑等消毒劑打入飲水管道中,濃度按各種類產品使用說明書使用,用時要攪拌均勻,15min后開清水將藥水沖掉,以防中毒。
飲水消毒應注意以下事項:一是消毒劑慎用。消毒用的消毒劑要慎重,消毒藥的濃度要按照飲水濃度為宜。消毒劑現配現用,兩種不同成分消毒劑不要同時混合使用。消毒劑要經常交替使用,否則影響消毒效果。二是免疫與投藥。接種弱毒疫苗前后3天不能飲水消毒。飲水投藥后,要及時沖洗飲水管線以減少藥物殘留在管壁,成為細菌的培養基。三是微生物監測。有條件的雞場要建立自己的微生物監測室,定期監測飲水中微生物的含量和消毒效果。□