雞毒支原體病的診斷和防治

劉艷 徐春志 景書灝 陳紅 袁翠霞 楊峰 張海 楊源/貴州省貴陽市動物疫病預防控制中心 550000

1 病原與致病機理

本病的病原體為雞毒支原體(Mycoplasma Gallisepticum,MG)，又稱霉形體，屬于軟皮體綱支原體目支原體科支原體屬，直徑為250～500nm，無細胞壁，因而有柔軟的形態，是目前發現的最小的原核微生物。由于MG沒有細胞壁，MG感染機體是通過表面的黏附蛋白吸附于宿主上呼吸道上皮細胞，通過細胞因子和TLRs（Toll-like receptors）介導，使宿主細胞受損和凋亡，纖毛脫落，繼而引發宿主的炎癥反應，由此感染宿主呼吸道，建立慢性感染；然后通過血液循環，累及全身的組織、器官。

2 診斷方法

2.1 MG分離鑒定MG的分離培養較困難，其培養基所需營養成分復雜，目前己研制出了如Frey氏培養基等多種用于MG分離的培養基，其中還需加入20%的馬血清、10%的酵母浸出液以及抑制雜菌的生長的醋酸鉈和青霉素。當接種的固體培養基在顯微鏡下觀察到典型的“煎蛋狀”菌落時則可初步確定分離到了MG，此時可利用血清學或分子學檢測來進一步確診。但該方法所需時間長，難度大，有較大局限性，很難廣泛應用。

2.2 血清學方法MG的血清學診斷方法較多，有常見的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，平板凝集試驗(SPA)、血凝抑制(HI)試驗等，SPA試驗具有快速、敏感等優點，缺點是易出現假陽性。HI試驗在用于診斷雞群MG感染時特異性好，但MG的最低檢出限較高，因此檢測結果可能出現假陰性，通常只作為預判或輔助診斷。ELISA相較于其他血清學診斷方法，其特異性、敏感性都更有優勢，應用較廣。目前，存在的主要問題是制備支原體單克隆抗體的成本較高，因此該類檢測試劑的價格通常較高。

2.3 分子生物學技術分子生物學方法有著高效、敏感、特異等眾多優點，目前已廣泛應用于各類畜禽疾病的診斷。如今，PCR檢測MG技術較成熟，結果可靠性高，已有多種用于雞群MG診斷的PCR方法被報道，如Gharibi等人設計了185bp特異性引物用于檢測MG，經臨床驗證方法真實可行。Raviv Z等設計了針對MGc2基因的檢測引物，特異性高，與其他類型的支原體不存在交叉反應。趙杰等開發了MG的套式PCR檢測方法，結果發現檢測MG靈敏度高，且與MS無交叉性。在臨床檢測MG時熒光PCR的敏感性比普通PCR更有優越性，羅思思等人開發了MG的二重熒光PCR，可鑒別診斷MG強毒株和弱毒株，檢測靈敏度可達10拷貝/μL，檢出率高。大多數禽支原體還可根據其獨特的限制性片段長度多態性（RFLP）來區分，但該方法僅限于鑒定禽支原體的純培養物。

3 防控手段

3.1 疫苗預防

3.1.1 滅活疫苗滅活疫苗一般無需特殊保存，在使用時安全方便。目前MG滅活疫苗有F株、R株、S6株等不同毒株類型，就保護力而言，F株滅活疫苗效果最好，在使用時，一般需要多次皮下注射來加強免疫。TanL等的研究發現一種MG源的GroEL抗血清對MG有很好的殺滅作用，因此后續對MG滅活疫苗的開發可將該蛋白作為切入點。

3.1.2 弱毒疫苗目前國內養殖戶在對雞群進行CRD預防是多采用弱毒疫苗，針對MG的預防現采用的活疫苗多為F株疫苗，F株疫苗使用廣泛，經長期臨床使用驗證其致病力較低，對雞群有很好的保護力，有研究證明該疫苗使用還能提高產蛋量。因此，F株疫苗是預防MG的優良候選。但近年有研究發現F株疫苗有散毒的風險，有的還可經蛋垂直傳播給下一代。除F株外，現在還有TS-11、6/85、K株，就安全性而言，這些疫苗株優于F株，但在保護力方面略遜之，其中又以TS-11使用最多，該疫苗株對產蛋雞的產蛋性能影響有限，因此，可作為產蛋雞預防MG的首選疫苗。