CD4+ CD25+調節性T細胞檢查在肺癌患者診療中的作用

趙海燕 陳永生

【摘要】 目的：研究各型肺癌患者外周血中CD4+ CD2 5+調節性T細胞（ regulatory Tcell，Tregs）的變化及意義。方法：采用流式細胞技術檢測116例肺癌患者外周血中CD4十CD25+ Tregs的變化，并選擇40倒健康體檢者作為對照組進行結果分析。結果：肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs占CD4+T淋巴細胞總數明顯高于健康對照者;化療前肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs數明顯高于化療后肺癌患者。結論：肺癌患者外周循環血中CD4+ CD25+ Tregs水平表達明顯身高，可能與肺癌患者免疫功能調控紊亂有關，可作為肺癌患者診斷與治療的一項重要指標。

【關鍵詞】 流武細胞術;調節性T細胞;腫瘤

【中圖分類號】R969.4

【文獻標志碼】A

【文章編號】10050019《202 0）21-002-01

腫瘤的發生、發展不僅能抑制自身免疫性疾病的發生，還可能參與腫瘤免疫的調節。CD4+ CD25+ Tregs在人體內的表達水平與腫瘤的關系報道較多，但有關CD4+ CD25+ Tregs的表達與肺癌關系的研究報道較少，我們探討了肺癌患者外周血CD4+ CD25+ Tregs水平與各型肺癌的關系及其臨床意義。

1 材料和方法

1.1 一般資料選擇2018年9月2019年9月我院住院的經病理診斷的肺癌患者116例（男62，女54），年齡（25-83）歲，平均年齡58.5歲，其中鱗癌42例，小細胞未分化癌30例;大細胞未分化癌23例，腺癌21例。

1.2正常對照組選擇健康查體人員40例（男20，女20），年齡31-60歲，平均年齡55.5歲。其年齡、性別方面均與病例組具有可比性。排除腫瘤及免疫性等疾病。

1.3實驗指標與檢測方法

1.3.1患者人院后當天取靜脈血;治療一個療程后，分別抽取空腹靜脈血3 ml，用流式細胞儀測定CD3+、CD4+、CD8+、CD25+含量，流式細胞儀為美國Beckman Coulter EpicsXL型。

1.3.2 小鼠抗人熒光標記單克隆抗體anti- CD3、anti- CD4、anti- CD8、anti- CD25等均購自美國BDIS公司。

1.3.3淋巴細胞熒光抗體標記新鮮的全血3011L與抗體10μL混合，室溫孵育30 min。加入anti- IgG異硫氰酸熒光素（FITC） 10μL，室溫孵育30 min，PBS冼滌，PBS洗滌后用1%多聚甲醛固定10 min后，用流式細胞儀分析。

1.3.4式細胞儀數據獲取和分析全部數據用流式細胞儀（美國BD公司）和軟件LYSYSⅡ進行雙色熒光參數獲取和分析。

1.3.5 方法 以SPSS 10.0 for Windows統計軟件進行統計學處理，所有數據均用x±s表示，采用t檢驗（獨立樣本t檢驗及配對樣本t檢驗）及相關分析。

2 結果

2.1肺癌患者組和正常對照組CD3十等檢測結果見表1

2.2 肺癌患者組中化療組與未化療組結果比較見表2

2、3鱗癌、小細胞未分化癌、大細胞未分化癌、腺癌組都較正常對照組有顯 胞癌。著升高（P<0.01），這四組中又以腺癌組升高最多，其次為鱗癌、大細胞癌、小細

3 討論

CD4+CD25+Tregs是一具有免疫調節功能的T細胞亞群，大量的有研究表明，CD4+ CD25+ Tregs在許多腫瘤患者的外周血和腫瘤組織中均有增高[2]示腫瘤患者可能存在天然的免疫反應，腫瘤患者體內CD4+CD25+ Tregs數量的增高即是抑制腫瘤免疫的機制之一[3]，D4+ CD25十Tregs通過抑制效應T細胞功能，在維持自身免疫耐受中發揮重要作用[4]，在以后的腫瘤治療中不容忽視。

通過對本組各型肺癌腫瘤患者外周血CCD4十CD25+ Tregs數量的檢測，并與正常對照組進行了對比研究，發現正常人、肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs分別占CD4+T淋巴細胞總數的（8.3±2.5）%和（12.7±1.65）%，引起這種變化的原因可能是腫瘤細胞通過某種機制使體內CD4+ CD25+ Tregs的數量增高來抑制腫瘤免疫。本組結果顯示，肺癌患者外周血中CD4+ CD25+ Tregs的數量與病理類型無明顯相關關系（P>0.05），但與肺癌分化程度和臨床分期關系密切，這說明隨著腫瘤的進展，腫瘤細胞產生的CD4+ CD25+ Tregs數量增多，使免疫細胞的活性被抑制，有利于腫瘤的生長與轉移化療后患者體內癌負荷減少，與化療前相比，抑制腫瘤免疫的CD4+ CD25+ Tregs數量也相應減少，患者免疫抑制得以改善。

本研究認為肺癌患者體內CD4+ CD25+ Tregs比例上升可能是導致免疫抑制的原因之一，肺癌患者治療前后的CD4+ CD25+ Tregs數量的變化可作為肺癌患者診斷與治療及預后評估檢查的指標之一。

參考文獻

[1]Schaefer C，Gkim G. Albers A. et al. Characteristics of CD4+ CD25+ reguIatory T cell ln the peripheral circulations of patients with head and neck cancer[J]. BJC. 2005，8 （2）：1。

[2]Liyange UK， Moore TT， Joo HG. et aI. Prevalence of regulatory T cells isincreased in peripheral blood and tumor microenvironment of patients with pancreas or breast adenocarcinoma[J]. Immunology. 2002， 169 （5）： 2756.

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