秦嶺美味系獼猴桃快繁體系建立試驗

行冰玉

[摘 要] 本研究以秦嶺美味系獼猴桃為對象，對其腋芽和葉片進行組織培養，通過探討不同消毒條件和培養基的最佳激素配比，以找到分化培養的最佳培養條件，建立秦嶺美味系獼猴桃的高效再生體系。

[關鍵詞] 獼猴桃;植物組織培養;快繁體系

[中圖分類號] S663.4 [文獻標識碼] B [文章編號] 1674-7909（2020）32-88-2

傳統獼猴桃育種方法周期長、工作量大、工作效率低，難以滿足當今社會發展和人們的需求。本文在獼猴桃培育過程中，利用植物組織培養技術，通過快速繁殖苗木，對秦嶺美味系獼猴桃組培快繁過程中的誘導分化、增殖快繁等初步培養技術環節進行研究[1]，并利用莖尖剝離培養提高脫毒效果，不僅可縮短獼猴桃生長周期，提高繁殖速度，優化品種，還能增加經濟效益。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料取自陜西省西安市周至縣風和日麗園藝站的秦嶺美味系獼猴桃，以莖尖或為外植體進行本次試驗。

1.2 試驗方法

以MS+蔗糖（30 g/L）+瓊脂（7 g/L）為基本培養基，生長調節物質采用TDZ（噻苯隆）、IBA（吲哚丁酸）、α-NAA（α-萘乙酸）[2];美味系獼猴桃分化期溫度為22～28 ℃，濕度為50%～70%，光周期時間設置為24 h（光/暗，14 h/10 h）。4—5月春季萌芽期取材，選取無病害、生長健壯的美味系獼猴桃新稍莖尖，將所選取的大葉去掉，并剪成短枝，用自來水沖洗4～5 h，將表面絨毛的灰塵細菌等初步清理干凈;然后將材料移至超凈工作臺用70%的酒精浸泡30 s，期間不停搖晃，后用0.1%次氯酸鈉消毒液浸泡12～18 min，接著用無菌水沖洗3～5遍;將消毒好的莖尖在解剖顯微鏡下用解剖針剝離并切取，用濾紙吸干表面水分后培養，切取材料的大小為0.5～1.0 cm[3]。

2 結果與分析

2.1 不同消毒時間對外植體的影響

在外植體取材后，必須要對其進行消毒處理，選取合適的消毒液種類和設置合適的消毒時間對外植體的存活率和污染率有很大影響[4]。本試驗中，采摘的外植體用洗潔精浸泡3 min后，流水沖洗6 h，紫外線照射20 min，酒精滅菌30 s后，采用1∶5的次氯酸鈉對獼猴桃腋芽和葉片進行消毒，設置若干個不同消毒時間的處理，7 d后統計莖尖存活率和污染率。

據表1、表2可知，腋芽和葉片處理時間與消毒效果成正相關，即處理時間越長，污染率越低，消毒效果越好，但與存活率呈負相關，即處理時間越長，存活率越低。因此，綜合分析不同處理可知，選取3號處理即對腋芽消毒16 min為最佳外植體消毒時間;選取3號處理即對葉片消毒12 min為最佳外植體消毒時間。

2.2 分化培養基的篩選

以MS+蔗糖（30 g/L）+瓊脂（7 g/L）為基本培養基，生長調節物質采用TDZ（噻苯隆）、IBA（吲哚丁酸）、α-NAA（α-萘乙酸）[5]。以腋芽為外植體的再生過程中，需每天觀察莖尖的形態變化及再生情況。操作大約30 d后，統計不同處理下腋芽的再生頻率和每個外植體再生的不定芽個數。計算公式如下：不定芽再生頻率/%=再生出不定芽的外植體數/接種的外植體總數×100%;每外植體再生芽數=外植體再生出的不定芽總數/再生出不定芽的外植體數×100%。試驗數據采用Excel2003軟件進行分析，應用SAS8.0軟件對結果進行差異顯著性（P<0.05）分析。

不同濃度的激素配比對本試驗中美味系獼猴桃莖尖分化的影響如表3所示，在15種激素組合中，激素配比為0.6 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA的8號處理組合對外植體美味系獼猴桃莖尖的再生效果最好，再生率達到了58.26%，其再生效果顯著高于其他處理組合水平，每個莖尖的平均再生芽數高達3.59個。

3 結論

本試驗表明美味系獼猴桃莖尖組培快繁的最佳消毒時間為用1∶5的次氯酸鈉對腋芽消毒16 min，對葉片消毒12 min;最佳分化培養基為MS+0.6 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA。

參考文獻

[1]李強.軟棗獼猴桃組培快繁體系的建立[J].遼寧林業科技，2018（4）：34-35.

[2]衣瑞東，杜顯龍，王建萍.“海沃德”獼猴桃組培快繁技術[J].煙臺果樹，2020（3）：17-18.

[3]趙春莉，湯昊，姚思揚，等.響應面法優化軟棗獼猴桃組培增殖培養基[J].吉林農業大學園藝學院，2019（2）：64-66.

[4]董穎蘋，黃萍，李裕榮，等.獼猴桃組培中控制細菌污染的研究[J].貴州省農業科學院生物技術研究所，2001（3）：32-34.

[5]畢海林，吳永斌，楊洪濤，等.硬齒獼猴桃組織培養和快速繁殖技術研究[J].云南省農業科學院高山經濟植物研究所，2019（5）：23-27.