犬皮膚毛囊的腫瘤病理診斷及分析?

李 杰 楊利峰 趙德明 周向梅

(中國農業大學動物醫學院國家動物海綿狀腦病實驗室,北京 100193)

皮膚由表皮及其附屬結構——毛發、皮脂腺和特化的皮脂腺、大汗腺和特化的大汗腺、蹄甲以及由真皮和血管壁支撐的外分泌腺等組成。黑色素細胞存在于表皮基底細胞和毛囊球部的儲備細胞之間[1]。其中,正常的毛囊分為三部分:從表皮延伸到皮脂腺導管的漏斗區;從皮脂腺導管到立毛肌的峽部;以及從立毛肌到球根的下段。外根鞘(ERS)與表皮相連,在漏斗區不能與表皮區分。在峽部和毛囊的下段,ERS的厚度不同,細胞質呈現弱嗜酸性,當細胞向表皮表面成熟時,嗜酸性會增強。內根鞘(IRS)位于ERS和毛干之間,細胞內含有大量嗜酸性毛透明蛋白顆粒。毛囊球部由基底樣細胞和數量不等的黑色素組成,這些細胞具有有絲分裂活性[2]。

犬皮膚毛囊的腫瘤包括漏斗狀角化性棘皮瘤,外毛根鞘瘤,毛母細胞瘤,毛發上皮瘤,惡性毛發上皮瘤,毛母質瘤,惡性毛母質瘤[1,3-4]。通過統計分析實驗室2018—2019年收集到的犬皮膚毛囊腫物,共39例。分別是:1例漏斗狀角化性棘皮瘤,1例外毛根鞘瘤,28例毛母細胞瘤,4例毛發上皮瘤,1例惡性毛發上皮瘤,4例毛母質瘤。

腫瘤是導致犬死亡的最主要原因之一[5]。隨著生活水平與醫療水平的提高,犬的壽命雖然延長,但腫瘤的發生率明顯增加[6-8]。對各類型犬起源于皮膚毛囊的腫瘤進行了分類、歸納和整理,總結此類腫瘤組織病理學診斷特征,可以明確腫瘤病變性質,對腫瘤進行分類及分級,為臨床治療提供理論依據,指導治療方案的選擇。

1 材料與方法

1.1 組織及病例信息

共收集國家動物海綿狀腦病實驗室2018—2019年間診斷的犬皮膚毛囊的腫瘤病例39例及其詳細病例信息。

1.2 組織病理學檢查

將收集到的犬皮膚腫物進行修塊、包埋、切片、染色等步驟制成病理組織切片,通過 OLYMPUS BX51及OLYMPUS DP72圖像采集軟件進行光學顯微鏡觀察,進行組織病理學診斷。

1.3 分類

根據WHO和Tumors in Domestic Animals對犬皮膚毛囊腫瘤的分類依據進行分類[1,3]。

2 結果

2.1 起源于皮膚毛囊的腫瘤病例

2.1.1 漏斗狀角化棘皮瘤(Infundibular keratinizing acanthoma)

共計1例:7歲雄性去勢雪納瑞犬,右前肢腫物已有幾年,最近生長較快,有破潰跡象。經化驗(圖1),該犬患漏斗狀角化棘皮瘤。這是一種良性腫瘤,表現為向毛囊峽部和漏斗區的鱗狀上皮分化。犬是唯一受影響的物種,這種腫瘤在犬身上很常見,4～10歲發病率最高,沒有發現性別偏好。囊腔樣結構內襯成層的鱗狀角化上皮,胞質內可見明顯的角化透明顆粒。腫瘤從毛孔底部延伸到真皮和皮下。角蛋白中心聚集,常形成同心片狀。在角蛋白下方,腫瘤壁由大而淡染的角質形成細胞組成,這些細胞胞質內可能含有小的嗜堿性角質透明顆粒。這些細胞有正常染色的細胞核,細胞邊界非常清楚,無細胞間橋。細胞間差異性不大,偶見有絲分裂象,腫物外層襯以雙層基底樣上皮細胞,胞核卵圓形,呈柵欄樣排列。纖維血管間質包繞腫物,間質內偶見淋巴細胞和漿細胞。當腫瘤破潰時,角蛋白釋放到周圍的真皮和皮下組織,引起化膿性肉芽腫和肉芽腫性炎癥反應。

圖1 漏斗狀角化棘皮瘤Fig.1 In fundibular keratinizingacan thoma

2.1.2 外毛根鞘瘤(Tricholemmoma)

共計1例:9歲雄性未絕育金毛犬,皮下腫物,無包膜,無破潰,與周圍組織未粘連。經化驗(圖2),該犬患外毛根鞘瘤。這是一種良性腫瘤,分化于毛囊外根鞘的峽部或下段。外毛根鞘瘤有兩種型:峽部型和下型。峽部型,顯示分化的峽部毛囊。通常與表皮有關,腫瘤由上皮細胞呈索狀和小梁狀組成,它們在上皮細胞島之間伸展,呈中央型角化。腫瘤細胞體積小,有中等數量的淡嗜酸性細胞質和小的嗜酸性細胞核,間質中含有少量黏蛋白。下段型分化為毛囊下段,毛囊上皮細胞呈島狀,周圍有細小的纖維性膠原基質。中央上皮細胞有中等數量的嗜酸性細胞質,而周圍細胞在增厚的嗜酸性基板上呈柵欄狀排列,胞質豐富、蒼白、空泡化。這種腫瘤在臨床上容易完全切除,且復發的可能性很小,暫無有轉移病例的報道。

圖2 外毛根鞘瘤Fig.2 Tricholemmoma

2.1.3 毛母細胞瘤(Trichoblastoma)

共計28例,其中緞帶型11例,小梁型 1例,水母型1例,紡錘型1例,未分型14例。這是一種良性腫瘤,其來源于或顯示出毛囊發育中的毛囊毛芽的分化。

緞帶型(Ribbon type):2歲雄性未絕育金毛犬,生長速度快,有包膜,有破潰,無轉移。經化驗(圖3),該犬患緞帶型毛母細胞瘤。細胞常呈柵欄狀,細胞核突出,胞質少。細胞核可呈正常色或深色,核仁不明顯。少量細胞質是嗜酸性,細胞邊界模糊。有絲分裂象的數目可能變化很大,一些腫瘤顯示明顯的有絲分裂活動。

圖3 緞帶型毛母細胞瘤Fig.3 Trichoblastom a-Ribbon type

小梁型(Trabecular type):雄性已絕育犬,右側肩部皮膚腫物。經化驗(圖4),該犬患小梁型毛母細胞瘤。由多個腫瘤細胞小葉組成,周圍有小葉間膠原間質,小葉周圍的細胞呈明顯的柵欄狀,而小葉中心的細胞有卵形到伸長的細胞核和更豐富的嗜酸性細胞質。

圖4 小梁型毛母細胞瘤Fig.4 Trichoblastom a-Trabecular type

水母型(Medusoid type):8歲雌性比熊犬,頸部背側前部偏右皮膚腫物,無游離性。經化驗(圖5),該犬患水母型毛母細胞瘤。細胞索從細胞的中心聚集向外流動,形似水母,細胞具有更大量的嗜酸性細胞質。

圖5 水母型毛母細胞瘤Fig.5 Trichob lastoma-M edusoid type

紡錘型(Spindle cell type):博美犬,頭部腫物。經化驗(圖6),該犬患紡錘型毛母細胞瘤。腫瘤多分葉,小葉間質少。腫瘤細胞的形態取決于細胞是縱向切割,呈梭形細胞形態,或者是橫向切割,呈卵圓形。梭狀細胞通常相互交織。

圖6 紡錘型毛母細胞瘤Fig.6 Trichob lastom a-Spindle cell type

大多數毛母細胞瘤生長緩慢只有在手術切除不完全后才會復發。

2.1.4 毛發上皮瘤(Trichoepithelioma)

共計4例,其中1例為犬后背腫物。經化驗(圖7),該犬患毛發上皮瘤。這是一種良性腫瘤,顯示出分化為毛囊的所有三個部分;可能存在不完全毛發生成。組織學外觀將根據與毛囊的三個區段的分化程度而變化。大多數腫瘤由基質細胞包圍的上皮細胞島組成,膠原性的或有些黏液性的。在這些島的中心有角蛋白和影細胞的積累。外上皮細胞通常是異型性大(細胞形態不一),包括具有細胞核濃染和細胞質很少的小細胞(類似于毛囊的未分化細胞),或具有輕度嗜酸性細胞質和囊泡核的細胞(類似于外根鞘),或具有胞質內毛透明蛋白顆粒的細胞(如毛囊的內根鞘中)。毛發上皮瘤的囊性病變可能有一個大囊腫或幾個較小的囊腫,囊腫內充滿角質碎片。細胞外周常有增厚的嗜酸性基底層,單層柵欄狀細胞,核深染,胞質少。這些細胞向囊腫中心不規則排列,細胞核顏色較淡,胞質嗜酸性適中。囊腫腔內有影細胞、角質物質。較小的囊腫可從較大的中央囊腫延伸至周圍組織。毛發上皮瘤生長相對緩慢。大多數對完全的外科切除反應良好,只有未完全切除的腫瘤才會復發。

圖7 毛發上皮瘤Fig.7 Trichoepithelioma

2.1.5 惡性毛發上皮瘤(Malignant trichoepithelioma)

共計1例:金毛犬,背部腫物,顏色呈褐色,質地為質中,無包膜,有破潰,無粘連,傷口一直不愈合。經化驗(圖8),該犬患惡性毛發上皮瘤。這是一種惡性腫瘤,具有實質和內根鞘分化,可能轉移。這種罕見的皮膚腫瘤只在犬身上發現過。大多數病例發生在8～12歲,在已絕育的雌性中更為常見。腫瘤呈結節性浸潤,累及真皮及皮下組織,與其他侵襲性皮膚腫瘤難以區分。腫瘤細胞常與上覆的表皮或漏斗狀毛囊相聯系,并以嗜堿性細胞的索狀和島狀向真皮延伸。較大的腫瘤細胞島的中心是壞死的,有大量的影細胞聚集,顯示出明顯的角質化。腫瘤細胞核深染,胞質少呈嗜酸性。可能存在許多有絲分裂象,偶見細胞含有胞質內透明蛋白顆粒。對深層組織的侵犯通常會引起結締組織增生。腫瘤周圍可見淋巴細胞浸潤。腫瘤生長迅速,能夠轉移至局部淋巴結和肺。判斷這種轉移行為最重要的特征是血管中腫瘤細胞的存在。

圖8 惡性毛發上皮瘤Fig.8 Malignant trichoepithelioma

2.1.6 毛母質瘤(Pilomatricoma)

共計4例,其中1例:4歲雄性未絕育比熊犬,臀部腫物。經化驗(圖9),該犬患毛母質瘤。為良性毛囊腫瘤,只顯示毛囊基質的變異。該腫瘤最初被認為是毛發間質瘤或毛囊的上皮壞死和鈣化。小葉外周是嗜堿性細胞區域,細胞核小而濃染,且細胞質較少,可能表現大量的有絲分裂活動。隨著邊緣區域嗜堿性細胞的不斷增生,原有的嗜堿性細胞的細胞質含量不斷增加,細胞核消失,最后在細胞核的位置上僅有一個空白區域,周圍包裹著嗜酸性細胞質和清晰的細胞邊界,這些細胞稱為影細胞。小葉中央的影細胞聚集并退化,并且隨著退化細胞的營養不良性鈣化,同時可見多核巨細胞和成纖維細胞浸潤。在腫瘤細胞質或小葉旁基質中的巨噬細胞內可見黑色素。很容易通過手術切除,不易復發。

圖9 毛母質瘤Fig.9 Pilomatricoma

2.2 毛囊腫瘤統計分析

從腫瘤類型來看,毛母細胞瘤發病率最高,共計28例,占比73%;其中緞帶型毛母細胞瘤共11例,占比28%,在毛母細胞瘤中較為多發。未分型的毛母細胞瘤因為鏡檢時分型特征不明顯,或者是呈現混合型表現,在收集到的病例中占比也比較高,共計14例,占比36%(圖10)。從發生的腫瘤性質來看,良性腫瘤發生率很高,良性腫瘤共計38例,占比97%;惡性腫瘤僅有1例,占比3%。

圖10 2018—2019年犬皮膚毛囊腫瘤各類型的腫瘤發生率Fig.10 Incidence of various types of tum ors in dog skin hair follicles du ring 2018—2019

對犬的年齡與皮膚毛囊的腫瘤之間關系統計分析,結果顯示,7歲～10歲發生此類腫瘤的犬13例,占比33%;4～6歲的犬 12例,占比31%;≥11歲的犬6例,占比15%。從表1、圖11可以看出,犬皮膚毛囊腫瘤的發病率隨著年齡的增長而有升高的趨勢,老年犬發病率較高。犬的性別與皮膚毛囊的腫瘤相關性統計分析結果顯示,雄性犬19例,占比49%;雌性犬15例,占比38%;沒有表現出明顯的性別偏好性(圖12)。

表1 2018—2019年犬年齡與皮膚毛囊腫瘤相關性統計Table 1 Correlation between age of dogs and skin hair follicles tum ors in 2018—2019

選取皮膚毛囊腫瘤發病排名前四的不同品種犬進行統計分析,由表 2可知,前四名共 23例(23/39)。其中,金毛尋回犬(10/23)、比熊犬(7/23)、阿拉斯加犬(3/23),雪納瑞犬(3/23)發生皮膚毛囊腫瘤的概率偏高。對這四種犬做統計分析可知:其中,金毛尋回犬發病率最高,占比約44%;其次是比熊犬(7/39),占比約30%。

圖11 2018—2019年犬年齡與皮膚毛囊腫瘤相關性統計Fig.11 Cor relation between age of dogs and skin hair follicles tum ors in 2018—2019

圖12 2018—2019年犬性別與皮膚毛囊腫瘤相關性統計Fig.12 Cor relation between the gender of dogs and skin hair follicles tum ors in 2018—2019

表2 2018—2019年犬品種與皮膚毛囊腫瘤相關性統計Table 2 Correlation between breed of dogs and skin hair follicle tum ors in 2018—2019

3 討論

對從不同地方的寵物醫院收集到的犬皮膚毛囊腫瘤進行統計分析,與文獻報道中的發現一致[1],良性的腫瘤更多發,占起源于皮膚毛囊的腫瘤97%。其中,最常發的為毛母細胞瘤,占比73%,在犬中,最常見的為緞帶型毛母細胞瘤,占全部腫瘤28%[9]。犬皮膚毛囊的腫瘤發病率隨著年齡的增長而有升高的趨勢,老年犬發生此類腫瘤的概率較高;沒有表現出明顯的性別偏好性,與之前的文獻報道相似。各個腫瘤涉及犬品種廣泛,并未表現出明顯的品種偏好性,金毛尋回犬、比熊犬以及阿拉斯加犬發生此類腫瘤的概率偏高,可能與現代人飼養偏好相關。

綜上所述,通過收集到的39例腫瘤病例統計了犬皮膚毛囊腫瘤的組織學特征,發現良性腫瘤多發,且臨床上切除完全是不易復發的。為今后犬皮膚毛囊的腫瘤的診斷與鑒別診斷提供參考。