甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系制種技術

潘永忠 樊友軍 劉克敏 徐 姮 梅 軍 王自品 涂金星

（1 中墾錦繡華農武漢科技有限公司，武漢 430070；2 民樂縣科普力農業科技有限公司，甘肅民樂 734500；3 華中農業大學，武漢 430070）

細胞質雄性不育、細胞核雄性不育和化學雜交劑誘導雄性不育是油菜雜種優勢利用的三大主要途徑。波里馬不育系和陜2A 不育系在油菜雜種優勢利用中得到了充分利用，不過在實際應用時，初花期這2 種不育系遇到低溫時會產生微量花粉，特殊年份風險會加劇。細胞核雄性不育系在制種應用中表現為雄性不育穩定性好，花粉徹底敗育，雙隱性核不育兩系法育種目前應用較多，隱性核不育恢復系雖然易找到，但保持系卻難以找到，制種時需要拔除50%可育株[1]，費時費工較麻煩；而雙顯性核不育、三隱性核不育育種目前應用較少。化學誘導雄性不育目前在化學雜交劑應用上有一定突破，但制種應用技術還在探索中，整體在雜交制種領域應用較少。甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育系的特點是花藥退化徹底，無花粉，同時對周邊環境反應不敏感，表現出十分穩定的不育性，而且配合力很高，幾乎所有甘藍型油菜品種都可以作為它的保持系，是目前被公認的世界上不育性最穩定、最好的油菜不育材料[2-3]。因此甘藍型油菜蘿卜細胞質不育系的應用前景十分廣闊。

蘿卜細胞質在我國應用相對較晚，目前剛剛起步，甘藍型油菜蘿卜細胞質不育系在雜交制種技術方面相對缺乏，本文旨在通過對華油雜705 的雜交制種技術進行實地實施研究，以期為甘藍型油菜蘿卜細胞質不育系在雜交制種技術方面獲取一些經驗。

以華油雜705 為試驗材料。該雜交種屬于甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系品種，由華中農業大學、武漢綠色保姆生物技術有限公司共同于2018年登記，登記編號：GPD 油菜（2018）420102。

作為甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系品種，在應用推廣中，特別是蘿卜細胞質雄性不育系在甘藍型雜交油菜制種應用上是一個嶄新的課題，受育種家委托，于2016 年、2017 年分別在湖北襄陽和甘肅張掖市境內進行華油雜705 的雜交種試制工作，并于2018 年度在甘肅省民樂縣相對規模面積制種取得成功。4 年來華油雜705 制種面積累計20hm2，每667m2平均產量173.5kg；2018 年度制種面積6.67hm2，平均產量165kg；2019 年度制種面積8hm2，喜獲高產，平均產量190kg，且種子質量均達到或超過了國家標準GB 4407.2-2008。

1 親本來源及特征特性

華油雜705 母本T36A 是[（Ogura-INRA×T336）×T36]BC6 雜交育成的穩定雙低蘿卜細胞質雄性不育系。父本BRS201R 是由[（R2000×輪回群體）×輪回群體]C5 的雙低株系123 與油菜亞基因組材料BRS201 雜交選育而成。同期播種的條件下，母本初花期和終花期與父本基本一致；相同管理條件下，母本一般比父本植株高出12～13cm。母本花瓣略皺縮，花藥完全敗育無花粉，葉色較深，株高2.2～2.3m，中位分枝在70cm 以上，一次有效分枝數5～6 個，單株有效角果數400～500 個，角粒數24～30 個，千粒重3.68g；父本花瓣圓大，開展度好，平展，株高2.0～2.1m，一次有效分枝數5～7 個，單株有效角果數200～250 個，角粒數24～28 個，千粒重4.00g。

2 品種特征特性

華油雜705 全生育期209.7d，初花期比對照圣光127 晚7～9d，終花期與對照圣光127 相當。幼苗半直立，葉色深綠，裂葉2～3 對，花瓣長度中等、寬中等，呈側疊狀。株高176.85cm，中部分枝類型，一次有效分枝數5.95 個，單株有效角果數193.4 個，每角粒數19.7 粒，千粒重3.71g。芥酸含量0，硫苷含量27.48μmol/g，含油量43.96%。低感菌核病，抗病毒病，苗期抗寒性較好，抗倒性強。第1 生長周期每667m2產量200.2kg，比對照圣光127 增產6.09%；第2 生長周期產量200.2kg，比對照圣光127 增產2.1%。

3 高產保純制種技術

3.1 地塊選擇制種基地應選擇相對集中連片、土質肥沃、灌溉條件好，且3 年內未種植過十字花科作物的田塊。需充分考慮田間雜草類型，根據具體情況及時除草。了解當地天氣情況，避免自然災害的發生；了解當地氣候條件，充分考慮植株在授粉期的氣溫情況，氣溫高達30℃以上時，花粉活力很差，會造成結實不好，嚴重影響產量，甚至有絕收的風險，要避免在該地區制種。建立隔離區，可采用天然隔離，房屋、樹林、山谷等，或空間、時間隔離。

3.2 整地施肥一般在3 月20 日前完成施肥、整地及鋪膜。施足底肥，每667m2施有機肥40kg、尿素15kg、鉀肥10kg、磷肥50kg、磷酸二銨10kg、硼肥200g。在30cm 土層內進行犁鏵、旋耕、整平。每667m2噴施氟樂靈100g 兌水15kg，防雜草。鋪設黑色地膜，機械作業完成地膜鋪設工作。

3.3 適期播種春播條件下（甘肅民樂），在4 月1-10 日播種，即在鋪膜1 周后播種。一方面保證除草劑藥效在土壤中充分作用，同時避免影響種子發芽；另一方面鋪膜1 周后，地膜的保墑作用可充分發揮。播種時，父本植株間距15～16cm，母本植株間距18～20cm；父母本播種行距20cm；父母本行比2∶6，即2行父本，6行母本交叉播種。采用機械點播，每穴2～3 粒。

3.4 苗期管理出苗后要及時進行田間觀察，對出苗不整齊的田塊要及時進行補苗移栽，避免出現斷壟現象；同時在植株3～4 片真葉時定苗，每穴保留2～3 株，多余的予以拔除。適時了解父母本的田間長勢情況，針對華油雜705 父本苗期長勢偏弱特點，苗期有意識促進其營養生長，使用赤霉素或蕓苔素內植物調節劑促進父本加速生長。在植株2～4 片真葉時，及時觀察并防治跳甲為害。及時鏟除燕麥、茴條、豬秧秧等雜草。

3.5 嚴格去雜苗期通過觀察植株形態進行除雜，及時拔除包括混雜株、優勢株、變異株、畸形株、病害株、自生油菜等雜株。花期去雜應及早進行，在第1朵花開放時即開始檢查制種田塊，將母本行的優勢株、父本行的雜株拔除干凈。去雜要注意方法，避免將花粉人為地散于其他植株上，造成混雜。具體方法是先將花序向下折斷，再將植株拔出，并將花序踩于土中，不能將雜株高舉和帶出田外[4]。油菜收獲時，及時剔除授粉不良、花不盡植株，母本株中結成蘿卜角的植株。

對去雜情況進行記載。花期和夾果成熟期應對油菜去雜情況、長勢、長相、地塊大小等進行登記，并發放收購許可證，作為收購依據，以防摻假。

3.6 田間管理苗期精管父本，偏施追肥，使用植物調節劑促進父本植株生長。要充分考慮父母本早衰及后期花粉量不足問題，父本可考慮其中1 行隔株打頂，以保證后期花粉量充足。

及時澆水，植株進入抽薹期時，及時澆水1 次，促進植株薹期生長；花期剛結束時，澆水1 次。看苗生長，考慮施肥，在第1 次澆水時，根據情況追肥每667m2施尿素5～6kg；在蕾苔期噴施硼肥、N、P、K 微肥1 次。

3.7 防治病蟲害苗期防治跳甲為害。天氣干旱易發生蚜蟲為害，終花后采取摘除蚜棒，裝入塑料袋內深埋土中，或每667m2用10%吡蟲啉可濕性粉劑30g 兌水30～45kg 噴霧。

菌核病防治，做好中耕培土，及時摘除病、黃、老葉，隨即帶出田外，減輕病菌蔓延危害；病發初期每667m2用50%多菌靈可濕性粉劑100～200g 兌水50kg 防治1～2 次。

3.8 適時收獲，嚴把質量關先收父本、后收母本。父本先于母本收割，在父本臨近終花期統一砍除父本，并運出制種地塊以外單獨堆放；父本收割后，待母本角果80%左右黃熟時收割母本，收割前要認真清理干凈漏割的父本和雜草。母本收割后要就近架在制種地油菜根茬上或將枝條倒立在根茬之上，防止泥土和雜草籽粒混入種子內。收割的母本堆放4～5d 促后熟，選晴好天氣單場脫粒，嚴防父母本混雜和混入泥砂土塊等雜質；種子脫籽后要及時在單場彩條布上晾曬，防止濕種存放導致發芽霉變，影響種子發芽率和色澤。種子曬干后要及時風篩精選干凈以后再裝袋，袋內外做好標簽，防止裝混，要單獨放在干燥房間，防止種子吸潮變質。

精細打場，防止混雜。嚴把種子收購質量關，種子收購時，根據各制種戶制種面積和田間測產數量檔案，逐戶逐袋檢驗種子質量，種子無混雜，含水量不超過8%，凈度在98%以上，發芽率85%以上，種子籽粒整齊飽滿、色澤鮮亮，無雜草籽粒，各項質量要求合格后，才能取樣、簽發種子質量合格證，定級過秤收購。收購時每戶的種子取2 份樣品，一份作保留封存樣，另一份作當年田間種植純度鑒定樣，田間鑒定以戶為單位，重點鑒定不育株和有無父本混雜，以提高制種戶質量意識，確保種子質量達標[5]。防止摻假、使假，嚴把收種質量關加強檢測鑒定，同時試驗室內進行分子標記鑒定。在云南元謀縣進行田間正季鑒定，8 月中旬前后，視莢角成熟度七八成時取樣（手捏感覺到籽粒是硬的，剝開后看到籽粒有綠有黑）；春節前后開花時查看鑒定結果。