黃連的活性成分-黃連素及其生物學功能研究

陳玉華，盧 松

（1.湖北理工學院醫學院，湖北黃石 435000；2.黃石市中醫醫院康復科，湖北黃石 435003）

黃連是我國傳統的中草藥，廣泛應用于食品、醫藥等領域。黃連中的異喹啉生物堿，即小檗堿、黃連堿、黃藤素、表小檗堿和藥根堿是其生物活性的主要成分。到目前為止，許多研究已經評估了黃連的多種特性，黃連在抗菌、保護胃黏膜和抑制破骨細胞分化等方面有巨大益處（Meng等，2018）。但黃連的胞內過程在本綜述中未被提及，其藥理激活的潛在分子機制也未被完全了解。異喹啉類生物堿是一類含氮的低分子量化合物，具有較高的生物活性，已被廣泛應用于各種藥物中。本研究對近二十年文獻中的主要發現進行分析，旨在描述黃連素在多種疾病中的作用，并為臨床使用黃連素提供建議。

1 黃連素在體內的作用過程

Fan等（2013）為了進一步評價黃連在肝臟中的代謝，其以斑馬魚為模型進行的一項研究，結果表明，黃連有4種代謝產物，主要的代謝途徑為去甲基化、羥基化、硫酸化和葡萄糖醛酸化。此外他還發現，黃連素是P-gp的底物，這在一定程度上導致黃連素在多種組織中的低分布。除了配方外，關于黃連給藥的藥代動力學研究也很多，其中Su等（2015）采用兩種給藥途徑，發現黃連口服生物利用度和t1/2（50 mg/kg，口服，單劑量，0.083-24 h，10 mg/kg，單劑量，0.083-24 h）為8.9%，之后黃連堿分布在多個組織中，如心臟、脾、肺、肝、腎、腦、腸、肌肉和脂肪，除了腸的濃度為4000 ng/g外，其余組織器官濃度都在200 ng/g。值得一提的是，血漿中黃連和其他異喹啉類生物堿的濃度與口服給藥劑量呈明顯的非線性關系，并表現出明顯的局限性，因此，隨著給藥劑量的增加，生物利用度下降。

2 黃連的生物功能

2.1 抗炎癥作用 炎癥涉及多種癌癥的發病機制，是機體對有害刺激包括損傷細胞、病原體、刺激物等的保護性生物反應。炎癥轉導取決于細胞通路，其中NF-κB MAPK和PI3K/AKT通路關注最多。NFκB是一個典型的途徑，通常由LPS激活。當受到刺激時，TLR-4直接與LPS結合，然后聚集蛋白MyD88，導致酶復合物IKK初級激活（Zou等，2015）。除此之外，IKK的激活還伴隨著MAL/caspase-1的RIP2/caspase-1的相互作用。MAPK是另一個關鍵的炎癥信號通路，由3個亞家族組成，即p38、JNK和ERK。因此，通過滅活上述靶點而發揮阻斷炎癥信號轉導作用的天然產物有望成為臨床抗炎藥物的潛在候選者。Ren等（2018）發現，黃連堿改善了腎損失引起的大鼠早期肥胖相關腎小球病的炎性體，抑制了半胱天冬酶活性。

同樣，在動物模型中也觀察炎癥過程被抑制，包括二甲苯誘發的耳水腫、卡拉膠誘發的爪水腫、LPS誘發的休克、鼻炎和痛風。機械方面，黃連通過阻斷炎性細胞因子的生產轉導介導的磷酸化IKKα/β和MAPK，進而抑制NLRP3 炎性體（Hung等，2016）。值得注意的是，靜脈注射0.97～3.87 mg/kg黃連，對卡拉膠皮下注射引起的大鼠水腫性皮膚溫度上調沒有影響。

2.2 改善心血管疾病 典型的心血管疾病包括心臟病發作、心肌梗死、動脈粥樣硬化、心力衰竭和中風。在臨床中，血脂異常和高血壓的關鍵生物標志物包括總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血管細胞粘附分子、細胞間粘附分子、載脂蛋白A和B，其中MYPT-1通路是與心血管疾病相關的另一種信號通路，其阻斷可通過降低NADPH氧化酶和活性氧水平（Satoh等，2011）。MYPT-1磷酸化在心血管-腎臟重塑中起至關重要的作用。還原酶作為一種NADPH調控酶參與膽固醇的合成，是動脈粥樣硬化改善藥物的靶點。此外，NLRP3炎性小體被報道參與多種心血管疾病的病理進展，如心肌缺血、動脈粥樣硬化、高血壓和心肌病。因此，以上述天然化合物為靶標可以作為改善心血管病的潛在候選靶標（Wang等，2018）。

最近一項體內研究發現，黃連素通過調節血清中生物標志物含量發揮了降脂作用，黃連降低了血管細胞粘附分子，同時也避免了p38磷酸化（Wang等，2018）。 此 外，Gong等（2012）設 計的另一項研究發現，口服10～30 mg/kg黃連可以防止心臟凋亡，縮小梗死面積，黃連還抑制了NFκB介導的炎癥反應，同時抑制MYPT 1磷酸化。黃連對心血管病有明顯的體內外改善作用。

2.3 抗菌作用 Han等（2012）通過微量熱法對5種原小檗堿類生物堿進行篩選，確定了小檗堿和黃連堿是較適宜的抗感染新藥。黃連素現在已被廣泛應用于對抗細菌腹瀉和真菌感染等疾病。黃連堿也表現出抑制脲酶活性，抵抗幽門螺桿菌的作用，提示其是治療消化系統疾病的理想藥物。此外，Tan等（2017）研究結果表明，黃連堿能通過調控IκBα/ NFκB信號通路，降低腹瀉和回腸黏膜損傷程度。

2.4 其他功能 一項旨在評價黃連神經保護作用的研究發現，口服50 mg/kg黃連，每日1次，持續1個月，可以通過阻塞小膠質細胞和星形膠質細胞激活，抑制小鼠活動異常的發病，同時該研究也表明黃連可下調SH-SY5Y細胞中TXNIP蛋白的濃度，從而抑制氧化損傷。每天口服15～50 mg/kg黃連素，持續20 d，可降低1型糖尿病小鼠血液葡萄糖水平，同時增加AMPK磷酸化，降低肝細胞和肌細胞HepG2蛋白的磷酸化，表明其作為增強劑能促進葡萄糖代謝。Kang等（2019）開發了一種放射性同位素檢測生物芯片來評估黃連堿對蛋白激酶C的抑制作用，結果發現，黃連堿劑量依賴性地抑制蛋白激酶C活性，這些結果顯示黃連素在糖尿病治療中的巨大潛力。

3 臨床應用劑量及不良反應

早在2000多年前，黃連就被用于治療眼部炎癥、腹瀉及濕熱引起的疾病，這也是目前黃連臨床應用的常見疾病。由于黃連具有清除濕熱的作用，我們也可以從一些中藥書籍中了解到其抗腫瘤作用。蛋將這些知識應用于臨床還有很長的路要走，黃連的臨床試驗仍處于早期階段。到目前為止，還沒有單劑量的黃連臨床記錄，而黃連素是黃連中最豐富的異喹啉生物堿（Tang等，2009）。同時，劑量效應關系決定了藥物的作用效果。在臨床方面，由于年齡、疾病部位、給藥途徑和處理方法等因素影響，黃連每日單劑量范圍非常寬，為1.5～40 g，而黃連堿在體外和體內試驗的劑量范圍是0.06～468 μmol/L和0.0025～150 mg/kg。大劑量范圍可能是由于不同類型細胞系和動物物種的敏感性變化。在評價藥物療效時，應首先考慮毒副作用和安全性。據報道，黃連堿的口服LD50值為4.89 g/kg，常見不良反應為溶血性黃疸、惡心、嘔吐、氣短、驚厥（Wu 等，2015）。

4 展望

化學修飾藥物在臨床中起主導作用，因為它通過影響準確、特異的靶點而發揮強大的治療作用。但它同時顯示出許多副作用，如在化療中會殺死正常細胞。在過去的幾十年里，天然產物因其較好的處理性能和較低的毒性而受到越來越多的關注。如血漿中黃連和其他黃連素異喹啉類生物堿的濃度與給藥劑量呈明顯的非線性關系，腸液中溶出度低是限制吸收量的主要因素。近年來，利用納米策略、微分子等藥物促進黃連素在腸道內的溶出。鑒于黃連素與黃連堿具有相似的結構，建議進一步研究提高黃連素溶出率的新型藥物策略。

綜上所述，黃酮類藥物是一種很有前途的多靶點藥物，但在黃酮類藥物達到臨床應用要求，并進一步應用于癌癥、炎癥、抗菌、心血管疾病等疾病的預防和治療中還存在一定的知識空白。提高黃連生物利用度，達到毒理安全性與療效的平衡還需要進一步的研究。