高致病性豬藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果及防控策略

新野縣畜牧局 王秋艷

高致病性豬藍(lán)耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒高致病性毒株引起的豬的一種病毒性傳染病。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類(lèi)傳染病。為更好地應(yīng)對(duì)高致病性豬藍(lán)耳病，筆者對(duì)新野縣45 家規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行了為期2 年的抗體水平實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。從整體上看，大多數(shù)豬場(chǎng)豬群的免疫效果較好，但部分豬場(chǎng)的少數(shù)豬只抗體水平偏低，不足以抵抗強(qiáng)毒侵襲而發(fā)病或成為帶毒豬，威脅易感豬群，必須采取綜合措施，防止高致病性豬藍(lán)耳病的發(fā)生。

一、材料和方法

（一）采集樣品

樣品均采自新野縣年出欄量1500 頭以上規(guī)模豬場(chǎng)，其中漢城辦事處5 個(gè)場(chǎng)、漢華辦事處9 個(gè)場(chǎng)、城郊鄉(xiāng)7 個(gè)場(chǎng)、溧河鋪鎮(zhèn)8 個(gè)場(chǎng)、沙堰鎮(zhèn)9 個(gè)場(chǎng)、樊集7個(gè)場(chǎng)，共采集血清樣本1380 份。其中，母豬血清300 份、仔豬血清420 份、育肥豬660 份，采集血清后置于低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

（二）診斷

診斷試劑豬藍(lán)耳病病毒抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法），具體做法是將濃縮液用純化水進(jìn)行20倍稀釋?zhuān)浞謸u勻后備用。每次試驗(yàn)在包被板上設(shè)陰性對(duì)照孔和陽(yáng)性對(duì)照孔。用加樣器在包被板的待檢樣品中加入樣品稀釋液，每孔100 uL；陰性對(duì)照孔和陽(yáng)性對(duì)照孔不加樣品稀釋液。分別于各待檢樣品孔中加入待檢樣品10 uL，陰性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照血清100 uL，陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陽(yáng)性對(duì)照血清100 uL。充分混勻，貼上封板膜，37 ℃溫育30 min。傾去內(nèi)容物，用洗液注滿(mǎn)反應(yīng)孔，靜置10 s 后棄去，在吸水紙上拍干。洗板重復(fù)5 次。各孔中加入酶標(biāo)結(jié)合物100 uL。貼上封板膜，37 ℃溫育30 min。傾去內(nèi)容物，用洗液注滿(mǎn)反應(yīng)孔，靜置10 s 后棄去，在吸水紙上拍干。洗板重復(fù)5 次。每孔加入顯色劑A50 uL，全部加完后再在每孔中加入顯色劑B50 uL，混勻。37 ℃顯色10 min。顯色完畢后立即于每孔中加50 uL 終止液，混勻。用酶標(biāo)儀在450 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值。

（三）判定標(biāo)準(zhǔn)

在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD450 值。試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD450 值與陰性對(duì)照OD450 值之差≥0.5。試劑盒Cut Off 值=0.1+陰性對(duì)照孔OD 平均值（陰性對(duì)照孔OD 平均值≥0.05，按實(shí)際值計(jì)算；陰性對(duì)照孔OD 平均值＜0.05，按0.05 計(jì)算）。若待檢樣品OD 值＜Cut Off 值，結(jié)果判陰性；若待檢樣品OD 值≥Cut Off 值，結(jié)果判陽(yáng)性。

二、免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

在所檢測(cè)的1380 份血清中，420 份母豬血清有43份血清樣品OD450 值＜0.15，占10%，其余374 份血清樣品OD630 值＞0.15，免疫抗體合格率89%；育肥豬960 份血清有768 份血清樣品OD450 值＞0.15，免疫抗體合格率80%，母豬免疫抗體合格率高出育肥豬抗體合格率9 個(gè)百分點(diǎn)。在所檢測(cè)的45 個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，有40 個(gè)豬場(chǎng)豬瘟免疫抗體合格率≥75%（其中，18 個(gè)豬場(chǎng)＞90%，12 個(gè)豬場(chǎng)≥80%～≤90%，10 個(gè)豬場(chǎng)≥75%～＜80%），有5 個(gè)豬場(chǎng)豬瘟免疫抗體合格率＜75%，分別是72%、70%、63%、60%、57%。豬場(chǎng)與豬場(chǎng)之間的免疫效果相差很大，合格率為57%～95%。若以豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病免疫合格率≥75%以上判為免疫合格，則有40 個(gè)豬場(chǎng)免疫合格占89%，5 個(gè)豬場(chǎng)免疫不合格占11%。

三、防控策略

（一）免疫預(yù)防

根據(jù)流行狀況和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，制定本區(qū)域切實(shí)可行的免疫方案，并做好免疫效果評(píng)價(jià)。目前，國(guó)內(nèi)已研制成功高致病性豬藍(lán)耳病滅活疫苗和高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗，通過(guò)幾年來(lái)的區(qū)域試驗(yàn)證明，疫苗免疫是控制高致病性豬藍(lán)耳病傳播與蔓延的有效途徑。現(xiàn)在普遍認(rèn)為弱毒疫苗存在同群感染、病毒重組返強(qiáng)的危險(xiǎn)，雖然只是推測(cè)，未得到證實(shí)，但已有試驗(yàn)證明高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗可以在同群豬中相互傳播，并且不能完全阻止強(qiáng)毒的潛伏感染。因此，我們提倡，種豬群和健康豬群全部應(yīng)用滅活疫苗免疫。

（二）監(jiān)測(cè)凈化

加大疫情監(jiān)測(cè)力度，及時(shí)準(zhǔn)確掌握病原分布和疫情動(dòng)態(tài)，科學(xué)評(píng)估發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，及時(shí)發(fā)布預(yù)警信息。對(duì)免疫抗體合格率達(dá)不到70%的要及時(shí)補(bǔ)免，確保免疫效果；對(duì)凈化場(chǎng)按照“一場(chǎng)一策、一病一案”要求，根據(jù)各場(chǎng)實(shí)際，制定切實(shí)可行的凈化方案，有計(jì)劃地實(shí)施監(jiān)測(cè)凈化。同時(shí)，嚴(yán)把種豬引進(jìn)關(guān)，種豬引進(jìn)之前必須進(jìn)行高致病性豬藍(lán)耳病檢測(cè)，嚴(yán)禁從疫場(chǎng)引進(jìn)種豬。

（三）檢疫監(jiān)管

不斷加強(qiáng)生豬產(chǎn)地檢疫和屠宰檢疫，建立以實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和動(dòng)物衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估為依托的產(chǎn)地檢疫機(jī)制，不斷提升檢疫化科學(xué)水平。強(qiáng)化生豬移動(dòng)監(jiān)管，做好跨省調(diào)運(yùn)種豬產(chǎn)地檢疫和監(jiān)管工作。做到跨省調(diào)運(yùn)電子出證，實(shí)現(xiàn)檢疫數(shù)據(jù)互聯(lián)互通。