桉油精氣相色譜分析方法研究

黃 蕙，黃朝萬，夏麗娟，楊細蓉，夏洪兵

(1.成都彩虹電器(集團)股份有限公司，四川 成都 610045；2.四川省農藥檢定所，四川 成都 610041)

1 前言

白紋伊蚊AedesalbopictusSkuse是我國一種重要的醫學媒介昆蟲，是登革熱和基孔肯雅病的主要傳播媒介，感染實驗表明還能傳播乙腦病毒等多種蟲媒病毒病[1]。使用驅避劑是個人戶外防蚊的主要措施之一。目前市場上的驅避劑主流成分皆為化學農藥,主要成分有避蚊胺(DEET)，驅蚊酯，羥哌酯等成分，產品形式多為驅蚊液或驅蚊花露水。近年來也有關于DEET被報道對人體有副作用、對環境有害[2]。法國Corbel等[3]最新研究成果表明，DEET對昆蟲和哺乳動物中樞神經系統酶的活性有抑制作用，且DEET與氨基甲酸鹽類殺蟲劑混用時，毒性增強。驅蚊酯和羥哌酯雖然還未見負面報道，但是隨著國家農藥綠色發展的趨勢，從植物中尋找驅蚊活性物質受到了人們的重視。我國植物種類豐富，為尋找植物源蚊蟲驅避劑提供了豐富資源。

桉樹(Eucalyptusrobusta Smith)又稱尤加利樹，是桃金娘科、桉屬植物的統稱，它是全球擁有最多品種的樹種之一，有945個種和變種[4]。桉樹的樹根、花及葉都可供藥用且具有獨特的藥理活性。從藥學角度來說，桉樹葉性平，味微辛且苦，可以用于治療流感、流腦以及各種炎癥，同時還可用于傷口殺菌、治療皮膚瘙癢、廯、紅腫等疾病[5-10]。桉油精廣泛存在于藍桉、油樟、迷迭香鼠尾草等植物揮發油中，是經一定工藝提取的桉樹活性物質。桉油精通過與光化學產生的羥基自由基(SRC)反應，在空氣中氣相電暈可降解。在空氣中這種反應的半衰期估計為1.4d，其在25℃的反應速率常數為1.11×10-11 cu cm/molecule-sec。這說明桉油精是一個在空氣中易降解的化學物質，對環境的影響很小。桉油精又稱桉樹腦、桉葉素、桉樹精、桉葉油，其化學名稱為1,3,3-三甲基-2-氧雙環[2,2,2]辛烷。桉油精是一種重要的精細化工產品，桉油精主要用于醫藥、日用品工業、食品添加劑等方面。1,8-桉葉素被用作食品，糖果，咳嗽滴劑，個人護理產品和藥物中的香料和調味劑。它也被用作煙草中的風味劑。它存在于許多消費品中，例如漱口水，皮革用蠟，地板，空氣清新劑和松油基清潔劑。桉油精具有清涼香氣，對人無毒，作為食品舔加劑使用時最多見于口香糖的配方。

經過研究，桉油精因其自然揮發的氣味能讓蚊蟲感到不適，從而逃離，因此能起到驅蚊的效果,可以應用于植物精油驅蚊產品上。本文即是對植物精油驅蚊產品里所含的桉油精進行氣相色譜檢測，建立檢測方法進行分離和定量分析。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液

丙酮(分析純)由成都市科隆化學品有限公司提供；桉油精標準品(已知質量分數≥99.0%)由上海阿拉丁生化科技股份有限公司提供；氯苯 (內標，分析純)由武漢富鑫遠科技有限公司提供。

2.2 儀器

7890B氣相色譜儀：具有FID檢測器(Aglient)；色譜柱：30m×0.32mm×0.25μm INNOWAX毛細管色譜柱(Aglient)；微量注射器：10ul(Aglient)。

2.3 氣相色譜操作條件

柱溫：柱溫50℃保持5min，然后以10℃/min升溫至250℃，進樣器250℃， 檢測器 260℃；

氣體流量：載氣(氮氣)：1.0mL/min；氫氣：30mL/min；空氣：300mL/min；

進樣量：1.0ul。

桉油精標樣和樣品中桉油精的氣相色譜圖見圖1和圖2。

2.4 測定步驟

2.4.1 內標溶液配制 準確稱取內標氯苯0.1g至50mL容量瓶中，用丙酮稀釋后定容，待用。

2.4.2 標準品溶液的配制 準確稱取標準品桉油精約0.09g(精確至0.0002g)于25mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，作為桉油精標準溶液，待用；移取5mL上述配制好的內標溶液、桉油精標準溶液25mL容量瓶中，以丙酮溶解并定容，作為標樣溶液，備用。

2.4.3 試樣溶液的配制 在一個潔凈的磨口三角瓶中，使用鑷子夾取一片樣品，準確稱取樣品質量(精確至0.0002g)，再準確移取上述內標溶液5mL，加入丙酮約20mL，蓋住橡膠塞浸泡1h后，搖勻，作為樣品溶液。取上層清液進行色譜分析。

2.4.4 測定 在上述色譜條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰兩針桉油精與內標物氯苯的峰面積比的相對變化小于1.5%后，按標樣溶液、樣品溶液、樣品溶液、標樣溶液的順序進行測定。

2.4.5 計算 將測得的兩針樣品溶液及樣品前后兩針標準溶液中桉油精與內標物氯苯峰面積之比，分別進行平均。產品中桉油精質量分數x(%)按式(1)進行計算：

式中：

X-產品中桉油精質量分數，%

R1—標準品與內標物氯苯峰面積的比值;

R2—樣品與內標物氯苯峰面積的比值；

m1—標準溶液中桉油精標準品的質量，mg；

m2—驅蚊貼樣品的質量，mg；

P—標準品中桉油精的質量分數，%。

3 結果與討論

3.1 分析方法的線性相關性試驗

稱取不同量桉油精標準品于25mL容量瓶中，準確加入氯苯內標溶液5mL配制成桉油精與內標質量比(Mr/Mi)分別為5個不同濃度的標準溶液，按上述操作條件分別測定，以桉油精與內標物氯苯質量比為橫坐標，以桉油精與內標物氯苯峰面積比為縱坐標，得工作曲線。。

桉油精線性關系數據見表1，線性關系圖見圖3桉油精標樣的添加濃度(x)與平均峰面積比(y)之間滿足線性關系y=1.192x-0.029，線性相關系數R2=0.998。

3.2 分析方法的精密度試驗

對同一試驗樣品中的桉油精質量分數進行5次平行測定，并對其進行標準偏差及變異系數的統計運算。同時運用修改的Horwits公式作為精密度是否合格的判定依據，結果見表1。

由表2可知，本分析方法的變異系數為0.17%，遠小于Horwits公式計算值，精密度合格，能對桉油精進行精確地分析。

表1 桉油精方法精密度實驗數據

3.3 分析方法的準確度試驗

取經分析已知桉油精準確含量的樣品，加入桉油精標準品溶液9.7mg/5mL于25mL容量瓶中，準確加入內標溶液5.0mL，用丙酮定容，按上述方法測定桉油精的回收率，其結果如表2。桉油精的添加回收率在98.97%～100.31%之間，平均回收率99.69%，RSD為0.49%，因此本方法可以滿足對產品中桉油精的分離測定。

表2 桉油精準確度實驗數據

4 結論

綜上所述，本試驗建立了氣相色譜法檢測植物精油驅蚊產品中桉油精成分的分析方法。試驗結果表明，采用本方法測定桉油精質量分數具有較高的線性響應，較高的準確度和精密度。本方法具有操作簡單、高效的特點，是企業產品質量控制較為理想的分析檢測方法，提高了檢測效率。