淺談禽流感的分析診斷和防控措施

余樂

（新疆昌吉州奇臺縣動物疾病預(yù)防與控制中心，新疆 奇臺 831800）

人們所說的禽流感疾病是指由于禽流感病毒造成禽類出現(xiàn)流行性感冒的簡稱，此種疾病不僅使得家禽受到感染，而且人類也有可能會被感染。作為接觸性傳染疾病，在全國各地范圍內(nèi)都有可能爆發(fā)，甚至在國外也時常出現(xiàn)疾病，尤其是在東南亞氣候條件燥熱區(qū)域，此種疾病嚴重影響著家禽安全。

1 禽流感診斷分析

1.1 病原分析

禽流感病毒屬于粘病毒A型，其特征是核蛋白以及基質(zhì)內(nèi)蛋白抗原性相同，在血清學(xué)上使用瓊脂凝膠進行免疫擴散試驗來鑒定[1]。依據(jù)紅細胞凝集抑制試驗以及神經(jīng)氨酸酶抑制試驗，把AI病毒分為16種血凝素和9種神經(jīng)氨酸酶亞型。其中多數(shù)AI病毒屬于低致病性，部分H5以及H7型的AI病毒對雞而言是高致病性。

1.2 流行傳播

高致病性的禽流感病毒分布范圍廣泛，在世界各地均有所分布，甚至從臨床表現(xiàn)較好的海鳥以及遷徙水鳥中經(jīng)常能夠分離出病毒，偶爾在進口處的寵物鳥中也能分離出病毒。村莊和庭院飼養(yǎng)的雞群中以及通過活禽市場售賣的其它禽類中都有可能存在病毒，但是發(fā)達國家飼養(yǎng)的大部分家禽都沒有AI病毒。由于部分LPH5和H7病毒變異產(chǎn)生HP病毒，造成大面積流行。使用撲殺方式能夠迅速消滅病毒。病毒的潛伏期差異較大，從幾日到兩周。雞群之間傳播病毒的方法主要是采食和吸入。在自然和試驗條件下，歐亞系一株高致病性H5N1病毒可使得貓和犬遭受感染。通過呼吸、采食以及與其他病雞接觸都能造成感染。

家養(yǎng)寵物很可能是養(yǎng)殖場傳播病毒媒介，但是其他的AI病毒，包括H5N1病毒毒株，感染寵物程度還不清楚。已經(jīng)進行感染試驗的其他動物包括大鼠、兔、小鼠、水貂、雪貂以及靈長類動物，甚至人也有可能感染疾病。通常情況下養(yǎng)殖場內(nèi)發(fā)生禽流感是由于生物安全防護措施做得不到位，主要指的是在家禽運輸、設(shè)備以及衣物上有呼吸道分泌物導(dǎo)致的。

1.3 實驗診斷

在實驗室中診斷禽流感病毒方法有多種，包括病毒分離、血凝以及血凝抑制試驗、LAMP檢測方法、熒光定量PCR以及膠體金試紙條檢測。最常見的診斷方法是病毒分離，將發(fā)病死亡的病雞病料組織使用滅菌生理鹽水研磨成勻漿，再使用過濾器除菌后接種10日齡SPF雞胚。雞胚在接種后的48～72h內(nèi)死亡，收集死亡雞胚中的尿囊液，將其刨開觀察雞胚病變。禽流感病毒能夠造成雞群死亡，接種的雞胚全身都出血，并且發(fā)育緩慢，檢查各個組織器官可以看到出血明顯。雞胚的尿囊液具備血凝性，能夠凝聚1%的雞胚紅細胞，再進一步進行血凝抑制劑測驗，加以診斷。

PCR是一種體外核酸擴增技術(shù)，具有良好特異性，依據(jù)禽流感病毒基因組序列設(shè)計檢測引物，再依據(jù)擴增片段大小診斷疾病。通過使用三重RT-PCR檢測的方法，完成禽流感病毒分株鑒定。熒光定量PCR在普通PCR基礎(chǔ)上融入探針和熒光染料實現(xiàn)PCR擴增，和常規(guī)PCR相比較，熒光定量PCR敏感性更強，并且能夠進行定量檢測。近些年最常見檢測方法是膠體金，借助膠體金顆粒顯色特點，產(chǎn)生明顯沉淀線，完成快速檢測，尤其適合應(yīng)用在臨床快速診斷中。使用LAMP檢測方法能夠肉眼可見病毒癥狀，并且對實驗儀器設(shè)備要求不高。只需保證水浴鍋具備恒定的溫度就能實現(xiàn)核算擴增，也是快速便捷檢測方法。在臨床病料檢測中通過使用多種檢測方法開展試驗檢測，保證疾病早期診斷，為預(yù)防疾病奠定基礎(chǔ)。

2 禽流感臨床癥狀

2.1 高致病性禽流感

即使沒有繼發(fā)性的病原體，HPAI病毒也會使得雞、火雞以及其他家禽出現(xiàn)嚴重全身性疾病，并且死亡率較高。最急性的疾病不會出現(xiàn)臨床癥狀或者大面積死亡。而在急性案例中，火雞頭、冠、肉鬢以及肉垂出現(xiàn)水腫；脛部和腳因為皮下淤血出現(xiàn)水腫和褪色，內(nèi)臟器官以及肌肉伴有點狀出血；口腔和鼻腔中分泌物伴有血液。最急性感染存活的雞出現(xiàn)CNS癥狀，主要表現(xiàn)為歪頸、運功失調(diào)、麻痹和翅膀下垂。在顯微鏡下觀察病變部位和嚴重區(qū)域差別較大，多種臟器、皮膚以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)出血和細胞壞死。

2.2 低致病性禽流感

低致病性禽流感AI病毒能夠使得家禽出現(xiàn)典型呼吸道癥狀，如打噴嚏、流淚、咳嗽、流涕以及竇腫脹現(xiàn)象。家鴨、火雞和鵪鶉等常見癥狀是鼻竇炎。呼吸道典型病變包括氣管肺臟充血和炎癥。產(chǎn)蛋雞或者種雞產(chǎn)蛋率下降，卵泡破裂、退化、輸卵管腔內(nèi)部有黏性分泌物。部分蛋雞出現(xiàn)急性腎衰竭和內(nèi)臟痛風(fēng)，如果沒有繼續(xù)引發(fā)細菌感染或病毒感染，發(fā)病率以及死亡率都會降低。

3 禽流感防控措施

3.1 制定免疫程序

依據(jù)養(yǎng)殖場實際情況，制定嚴格規(guī)范疫苗免疫流程。在引入禽流感疫苗時應(yīng)當(dāng)充分保證從大規(guī)模廠家引進，確保引入的疫苗在當(dāng)?shù)貐^(qū)域具備較高適用性。保證物流和貯存模式滿足有關(guān)要求，疫苗在有限時期內(nèi)加以使用。在開展免疫工作之前，將疫苗從低溫環(huán)境中轉(zhuǎn)到正常溫度條件下，等到疫苗溫度回升到25℃再加以使用[2]。開展免疫工作應(yīng)當(dāng)確保疫苗總量不能低于有關(guān)標準，同時疫苗注射位置和方式也要適度。與此同時也要保證對疫苗產(chǎn)品外包裝和用具等物品及時進行清理。通過注射疫苗能夠預(yù)防臨床癥狀和死亡。與此同時，經(jīng)過接種疫苗后的家禽，呼吸道和消化道中病毒復(fù)制和排毒會有所減少。使用自家疫苗或者相同血凝素亞型AI病毒研發(fā)的疫苗，能夠提供特異性保護力。目前，我國對高致病性禽流感采用強制性免疫制度，覆蓋率高達100%，抗體的合格率大于70%。

3.2 加強飼養(yǎng)管理

加強科學(xué)飼養(yǎng)管理是預(yù)防養(yǎng)殖場發(fā)生禽流感疾病前提，科學(xué)良好飼養(yǎng)管理能夠保證家禽健康，使家禽具備較高抗病能力。養(yǎng)殖場的選址應(yīng)當(dāng)遠離水禽以及野生鳥類棲息的河道；避免水源或者飼料受到野禽污染；飼養(yǎng)的管理人員應(yīng)當(dāng)在進入生產(chǎn)區(qū)時穿戴專用衣、帽和鞋靴。定期開展養(yǎng)殖場和周圍消毒工作；定期消滅養(yǎng)殖場內(nèi)有害的昆蟲、老鼠以及蒼蠅等；針對病死雞必須立即進行焚燒和深埋處理；堅持全進全出以及自給自養(yǎng)飼養(yǎng)模式，當(dāng)引入外來品種時，品種一定要選擇來自無禽流感的養(yǎng)殖場；盡可能避免發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)；尤其在秋冬和冬春交替時節(jié)氣候變化大，應(yīng)當(dāng)做好雞群保暖工作[3]。

3.3 建立消毒制度

一方面，外堵。第一，養(yǎng)殖場應(yīng)當(dāng)實行全封閉式管理，在整個管理期間僅僅允許醫(yī)療人員進出養(yǎng)殖場，無關(guān)人員不能隨意出入，包括養(yǎng)殖場中員工也不能隨意進入養(yǎng)殖生產(chǎn)區(qū)。第二，自給自養(yǎng)。當(dāng)幼雞剛剛出生時，應(yīng)當(dāng)從精細化管理角度展開檢疫活動，確保雞群在無菌區(qū)域內(nèi)進行。經(jīng)過一定時期觀察后，明確沒有個體雞攜帶病菌，再重新采用混群管理模式。第三，禁止養(yǎng)殖場外畜禽出現(xiàn)在養(yǎng)殖場內(nèi)。在家禽活動范圍內(nèi)設(shè)置安全防護設(shè)施，確保外部的畜禽不能進入養(yǎng)殖區(qū)域內(nèi)，避免給內(nèi)部設(shè)施軟件以及養(yǎng)殖區(qū)域帶來細菌。第四，在養(yǎng)殖區(qū)域內(nèi)部安裝具備消毒功能的設(shè)備，避免將養(yǎng)殖場外部細菌帶入內(nèi)部。另一方面，內(nèi)消。加強對家禽活動區(qū)域消毒清潔工作的重視。在家禽的活動區(qū)域內(nèi)應(yīng)當(dāng)建立完整消毒清潔系統(tǒng)，定期對活動范圍內(nèi)外區(qū)域、工具以及欄桿進行消毒工作。通常情況下，養(yǎng)殖場只要執(zhí)行標準科學(xué)的消毒制度，就能取得顯著效果。

3.4 加強監(jiān)管力度

有關(guān)部門不僅應(yīng)當(dāng)在“看得見”位置貫徹落實監(jiān)督管理工作，與此同時也需要重點關(guān)注普通情況下難以看見的工作，加強各個地方養(yǎng)殖場監(jiān)管工作。與此同時，有關(guān)部門應(yīng)當(dāng)做好禽類運輸和銷售市場監(jiān)管工作，從生產(chǎn)、運輸?shù)较M整條生產(chǎn)鏈中，將每個環(huán)節(jié)工作緊密聯(lián)系，盡早開展排查工作，對于發(fā)現(xiàn)的有可能發(fā)生疾病的家禽要立即進行采樣送至專業(yè)檢測機構(gòu)。在活禽的消費市場，禽流感病毒經(jīng)常容易出現(xiàn)交叉感染和傳播，甚至許多禽類在養(yǎng)殖場內(nèi)被宰殺后直接送至餐桌中，在此過程中容易使得已經(jīng)感染禽流感的禽類將病毒直接傳染給人類，嚴重影響人們身體健康。因此，必須開展檢測工作。此項工作是預(yù)防受到禽流感危害的重要防線。在禽類銷售過程中，遵循“規(guī)模化飼養(yǎng)、集中屠殺、冷鏈運輸以及冰鮮上市”等程序，將傳染源和傳播途徑徹底阻斷。

4 結(jié)語

禽流感是一種接觸性的傳染疾病，帶來的損害較大，涉及范圍廣泛。因此，應(yīng)當(dāng)做好疾病預(yù)防工作，禽流感檢測、診斷以及防控工作是一項長期艱辛和系統(tǒng)性的工作。全面落實養(yǎng)殖場內(nèi)部日常消毒管理工作，開展疫苗免疫接種工作，降低禽流感病毒發(fā)病率和死亡率，增加養(yǎng)殖戶經(jīng)濟效益，保護人類健康。