XpertMTB/RIF 聯(lián)合T-SPOT-TB檢測對菌陰肺結核的診斷價值

李娜 閻少波

[摘要] 目的 探討XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測技術對菌陰肺結核的診斷價值。方法 方便選取2017年5月—2019年2月間該院收治的懷疑為肺結核、痰涂片陰性的對象276例作為研究對象，均進行Xpert MTB/RIF聯(lián)合T細胞斑點試驗。結果 最終確診菌陰肺結核204例、非結核72例。血清T‐SPOT-TB靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值、符合率分別為70.59%、83.33%、92.31%、50.00%、73.91%，Xpert MTB/RIF則為40.68%、100.00%、100.00%、37.30%、56.16%，聯(lián)合則為80.39%、83.33%、93.18%、60.00%、81.16%。聯(lián)合診斷靈敏度與陰性預測值、符合率顯著高于Xpert MTB/RIF（P<0.05），Xpert MTB/RIF特異度顯著高于血清T‐SPOT-TB（P<0.05），血清T‐SPOT-TB陰性預測值低于聯(lián)合，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測技術是一種簡便、快速、準確的方法，且能夠提高菌陰（即痰涂陰培陰）肺結核患者發(fā)現(xiàn)率及早期診斷率。

[關鍵詞] 涂陰;肺結核;XpertMTB/RIF;T-SPOT-TB;診斷;靈敏度

[中圖分類號] R4? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2020）06（c）-0062-03

The Diagnostic Value of XpertMTB / RIF Combined with T-SPOT-TB Detection for Bacterial Negative Tuberculosis

LI Na， YAN Shao-bo

First Pulmonary Ward， Yantai Pulmonary Hospital， Yantai， Shandong Province， 264001 China

[Abstract] Objective To explore the diagnostic value of XpertMTB / RIF combined with T-SPOT-TB detection technology for bacterial negative tuberculosis. Methods From May 2017 to February 2019， 276 patients with suspected pulmonary tuberculosis and negative sputum smears who were admitted to the hospital were conveniently selected as the research subjects. All were performed with Xpert MTB / RIF combined T cell spot test. Results 204 cases of bacillary tuberculosis and 72 cases of non-tuberculosis were finally diagnosed. Serum T-SPOT-TB sensitivity， specificity， positive predictive value， negative predictive value， coincidence rate were 70.59%， 83.33%， 92.31%， 50.00%， 73.91%， Xpert MTB / RIF was 40.68%， 100.00%， 100.00%， 37.30%， 56.16%， the joint is 80.39%， 83.33%， 93.18%， 60.00%， 81.16%. The combined diagnostic sensitivity， negative predictive value， and coincidence rate were significantly higher than Xpert MTB/RIF（P<0.05）， and the specificity of Xpert MTB / RIF was significantly higher than serum T-SPOT-TB （P<0.05）， The negative predictive value of serum T-SPOT-TB was lower than the combination （P<0.05）， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion XpertMTB / RIF combined with T-SPOT-TB detection technology is a simple， fast， and accurate method， and can improve the detection rate and early diagnosis rate of patients with tuberculosis of yin （ie， phlegm smearing yin and peiyin）， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Smear negative; Tuberculosis; XpertMTB / RIF; T-SPOT-TB; Diagnosis; Sensitivity

目前我國仍是結核病高負擔國家，2010年全國結核病第5次流調(diào)顯示菌陽肺結核患者在逐漸下降，無癥狀菌陰結核比例在升高，菌陰肺結核約占所有肺結核的60%左右[1]。早期發(fā)現(xiàn)痰涂片陰性肺結核及耐多藥結核病，并盡快開展肺結核規(guī)范化療，對結核患者尤其菌陰肺結核患者的早診斷、早治療對有效地控制結核病傳播有重要的公共衛(wèi)生和社會意義。盡管新的診斷方法不斷涌現(xiàn)，但能提供快速、準確的診斷技術卻是很少。XpertMTB/RIF技術是由美國的Cepheid公司研發(fā)的一項基于MTB核酸擴增為基礎的全自動分子診斷方法[2]。目前痰Xpert MTB/RIF及血T-SPOT-TB的聯(lián)合應用尚不廣泛，Xpert MTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB快速診菌陰肺結核（涂陰培陰）目前更是少有報道。該課題方便選取2017年5月—2019年2月該院收治的懷疑為肺結核、痰涂片陰性的276例患者作為研究對象，將Xpert MTB/RIF及T-SPOT-TB聯(lián)合檢查，與傳統(tǒng)的結核菌培養(yǎng)相比，評價其對菌陰肺結核的診斷價值，現(xiàn)報道如下

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取醫(yī)院收治的懷疑為肺結核、痰涂片陰性的276例患者作為研究對象，根據(jù)臨床診斷結果，將患者分為菌陰肺結核組和非結核組，包括菌陰組204例患者和非結核組72例患者，菌陰組204例患者中男134例、女70例，年齡（53.7±13.9）歲。合并矽肺1例，合并糖尿病9例;合并慢性乙型肝炎2例;合并慢性阻塞性肺病3例。非結核組72例患者中男45例、女27例，年齡（55.0±13.6）歲。合并糖尿病3例;合并慢性乙型肝炎1例;合并慢性阻塞性肺病1例。納入標準：①懷疑為肺結核，采用PPD皮試、X線檢查等懷疑為肺結核;②擬診依據(jù)臨床特點（例如咳嗽、咯血、發(fā)熱、乏力、消瘦、夜間盜汗）、影像學特點（例如結節(jié)、肺炎、空洞、胸膜炎）等（肺結核診斷標準WS288-2008），最終經(jīng)診斷性抗結核治療有效明確診斷;③臨床資料完整。排除標準：痰涂片及痰培養(yǎng)陽性患者。最終276例患者進入該研究，兩組性別（χ2=0.237，P=0.626）、年齡（t=0.680，P=0.274）差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。該研究經(jīng)該院醫(yī)學倫理委員會批準，并經(jīng)入選患者或家屬知情同意。

1.2? 方法

1.2.1? T細胞斑點試驗? 所有患者均予以結核感染 T 細胞斑點試驗，使用診斷試劑盒，嚴格按操作流程進行，判斷標準：檢測孔數(shù)與陰性孔之差為 6 及以上，即為陽性（陰性孔為 0～5 個），檢測孔斑點數(shù)為陰性孔兩倍及以上，即為陽性（陰性孔為6及以上）。此次采取分層法，分層 1 ：陰性孔為 0～5 個，檢測孔數(shù)與陰性孔之差為 6 及以上，陰性孔為 6 個及以上，檢測孔斑點數(shù)為陰性孔兩倍及以上。分層 2 ：陰性孔與抗原 B 或 A 計數(shù)之差﹥ 20。分層 3 ：陰性孔數(shù)分別與抗原 B 及 A 計數(shù)之差均超過 20。

1.2.2? GeneXpert/RIF檢測? 取1 mL痰液標檢測放入前處理管，加入相當于痰液標本體積兩倍的SR痰標本處理液，將處理管放置在漩渦振蕩器震蕩20 s，直至無可見的塊狀標本，靜置15 min，以無菌吸管吸取2 mL液化后眼部，緩緩轉入到Cartridge反應試劑盒中，將其轉移到檢測模塊中，儀器進行自動化檢測。檢測的原理：堿處理-中和離心沉淀法處理提取于DNA，加入抗原試劑A、B處理后，進行PCR擴增、雜交，判斷陽性以及耐藥情況。

1.3? 觀察指標

觀察患者Xpert MTB/RIF、血清T‐SPOT-TB及Xpert MTB/RIF聯(lián)合血清T‐SPOT-TB的肺結核檢出結果，比較三者對肺結核的檢出率。

1.4? 統(tǒng)計方法

以SPPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用率%表示，比較采用χ2檢驗， P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2? 結果

2.1? 不同檢測方法診斷肺結核的結果對比

276例，其中為菌陰肺結核204例、非結核72例。血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF、聯(lián)合檢測的結果見表1。

2.2? 不同檢測方法診斷菌陰肺結核的效用對比

菌陰肺結核204例、非結核72例。血清T‐SPOT-TB靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值、符合率分別為70.59%、83.33%、92.31%、50.00%、73.91%，Xpert MTB/RIF則為40.68%、100.00%、100.00%、37.30%、56.16%，聯(lián)合則為80.39%、83.33%、93.18%、60.00%、81.16%。聯(lián)合診斷靈敏度、陰性預測值與符合率均顯著高于Xpert MTB/RIF;血清T‐SPOT-TB特異度低于Xpert MTB/RIF;血清T‐SPOT-TB陰性預測值低于聯(lián)合，診斷效能差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

3? 討論

肺結核是常見的呼吸道傳染病，我國是結核病的高發(fā)國家，2015年估算新發(fā)肺結核病例91.8萬[3]。近年來，因人口老齡化、地區(qū)發(fā)展差異、環(huán)境變化及HIV感染等，肺結核發(fā)生率呈波動上升趨勢，肺結核的預后與診斷時間關系密切，及早診斷治療非常關鍵[4]。痰涂片檢查是診斷肺結核的常用方法，但是涂陽性率較低，約30%～40%，從而導致延遲診斷、預后不佳[5]。Xpert MTB/RIF及T-SPOT.TB是兩種新型的診斷技術，對菌陰肺結核診斷的診斷效能顯著提高。該次研究顯示，相較于單獨應用，血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF聯(lián)合應用的均衡性有所提升，其中特異度無明顯的改善，但是靈敏度、符合率和陰性預測值明顯上升，可以在很大程度上減少漏診，同時又不增加誤診，利于菌陰肺結核早期診斷。目前有關于血清T‐SPOT-TB、Xpert MTB/RIF診斷涂陰肺結核的效用研究較多[6]。該文結果示，T‐SPOT-TB在診斷菌陰肺結核的敏感性和特異性分別為70.59%、83.33%，與有關報道[7-8]的T‐SPOT-TB對結核病的診斷敏感性、特異性均在85%以上的結論大致相仿。有報道顯示，以臨床診斷為標準時，Xpert MTB/RIF在涂陰肺結核的檢出率在42.74%～58.1%[9]，靈敏度可達73%[10-11]，然而該研究Xpert MTB/RIF檢出率為30.07%（83/276），靈敏度僅40.68%，顯著低于上述研究結果，分析其原因，可能與該文納入標準非常嚴格有關（在以臨床診斷為標準的涂陰肺結核基礎上，又排除了培陽病例，即僅納入涂陰培陰的臨床診斷病例）。單就該研究結果分析，T‐SPOT-TB與Xpert MTB/RIF聯(lián)合診斷靈敏度、陰性預測值與符合率均顯著高于單用Xpert MTB/RIF;Xpert MTB/RIF特異度顯著高于血清T‐SPOT-TB（P<0.05）;血清T‐SPOT-TB陰性預測值低于聯(lián)合（P<0.05），提示XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測技術可顯著提高菌陰肺結核的診斷符合率（P<0.05） ，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

綜上所述，XpertMTB/RIF聯(lián)合T-SPOT-TB檢測技術是一種簡便、快速、準確的方法，兩種技術檢測的原理不同，理論上可以聯(lián)合，不僅能明顯提高診斷的效用，還可以彌補兩種技術單獨使用的缺陷，將菌陰（即痰涂陰培陰）肺結核患者發(fā)現(xiàn)率及確診率提高40%左右，并顯著縮短其診斷時間，提前菌陰肺結核的開始治療時間，更加積極有效地治愈現(xiàn)癥肺結核患者，減少結核病的傳播。

[參考文獻]

[1]? 全國第五次結核病流行病學抽樣調(diào)查技術指導組，全國第五次結核病流行病學抽樣調(diào)查辦公室.2010年全國第五次結核病流行病學抽樣調(diào)查報告[J].中國防癆雜志，2012， 34（8）：485-508.

[2]? 唐神結，丁衛(wèi)明，王衛(wèi)華，等.結核病臨床診治進展年度報告（2013）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：51-52.

[3]? Word Health Organization. Global tuberculosis report 2016[R]. Geneva： Word Health Organization，2016.

[4]? 趙承杰，何雪姣.136例初治肺結核患者就診延遲的影響因素分析[J].預防醫(yī)學，2017，29（12）：1235-1237.

[5]? 黃麗美，林健雄，彭東東，等.T‐SPOT.TB 在菌陰肺結核中的快速診斷價值[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2016，36（14）：1975-1976.

[6]? 王少華，鄭丹薇，朱巖坤，等，兩種恒溫擴增分子檢測法與實時熒光定量核酸擴增法對肺結核診斷價值的比較[J].中華結核和呼吸雜志，2018，41（2）：105-110.

[7]? 黃毅，黃斌，胡昕，等.T-SPOT.TB在診斷中國菌陰肺結核患者中應用價值的Meta分析[J].中國循證醫(yī)學雜志，2016， 16（12）：1381-13987.

[8]? 熊宗年，張雪芹，陳艷. T‐SPOT.TB 和Gene Xpert MTB/RIF檢測在結核診斷中的應用[J].臨床血液學雜志，2017（5）：777-780.

[9]? 王蔚，呂青山，郁勤龍.Xpert MTB/RIF在疑似肺結核患者診斷中的應用價值[J].中國防癆雜志，2018，40（5）：543-547.

[10]? 張玉華，張國欽，鐘達，等.應用Xpert TB/RIF法對我國肺結核診斷及利福平耐藥檢測的Meta分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2017，44（12）：2116-2119.

[11]? 劉巧，丁曉艷，竺麗梅，等.Xpert MTB/RIF技術在初治菌陰肺結核中的診斷價值[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2019，46（3）：568-572.

（收稿日期：2020-03-23）

[作者簡介] 李娜（1983-），女，河南扶溝人，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：結核病的診斷與治療。