質(zhì)型多角體病毒在北方地區(qū)的復(fù)制及林間防治試驗(yàn)

梁立明

摘 要：質(zhì)型多角體病毒在南方防治馬尾松毛蟲經(jīng)過試驗(yàn)，已經(jīng)取得了成功，這在生物防治松毛蟲領(lǐng)域中是一項(xiàng)新的突破。這種新的方法雖然在南方取得了成功，但在北方尚未進(jìn)行嘗試。赤松毛蟲在北方遼寧阜新地區(qū)油松林內(nèi)為害十分嚴(yán)重，多年來雖然采取了綜合防治措施，也取得了一定效果，但近年來又發(fā)生猖獗，故我們借用CPV質(zhì)型多角體病毒在南方防治松毛蟲的技術(shù)模式，在北方遼寧阜新地區(qū)進(jìn)行防治試驗(yàn)。此次試驗(yàn)過程是由貴州長綠生物技術(shù)防御有限公司協(xié)助，病毒來源由其公司提供。此次試驗(yàn)內(nèi)容分為2個(gè)階段：第1階段為復(fù)制病毒；第2階段為林間防治試驗(yàn)（其中包括“生物導(dǎo)彈”——利用赤眼蜂攜帶病毒，和直接噴灑病毒2項(xiàng)內(nèi)容）。

關(guān)鍵詞：病毒；赤松毛蟲；復(fù)制

中圖分類號(hào)：S763.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20180632150

1 復(fù)制病毒（CPV病毒在赤松毛蟲體內(nèi)增殖）

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)及林地概況

此次復(fù)制病毒的地點(diǎn)設(shè)在蟲災(zāi)較重的阜新縣平安地鎮(zhèn)西山。林內(nèi)生態(tài)條件一般，林齡在15a左右，郁閉度65%，有蟲株率100%，蟲口密度100頭/株。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間及方法

1.2.1 飼養(yǎng)欄設(shè)置

在2011年5月7日開始，在林地內(nèi)設(shè)置5個(gè)養(yǎng)蟲圍欄，面積50m2左右。四周用光滑的塑料布圍上，以防止松毛蟲向外逃散，中間用尼絨絲網(wǎng)拉上網(wǎng)床，以便托起松枝養(yǎng)蟲。

1.2.2 蟲源采集

然后用人工在林地附近采集蟲源及新鮮松針，放在網(wǎng)床上，采集總蟲數(shù)在10萬頭左右，分散在5個(gè)圍欄之內(nèi)。

1.2.3 噴施病毒

在5月15日進(jìn)行第1次病毒噴灑，利用超低量噴霧機(jī)噴施。當(dāng)日天氣：小雨，溫度29℃，風(fēng)速4.5m/s，所噴病毒濃度為106pib/mL，5個(gè)圍欄總用藥量為750mL。在5月18日進(jìn)行第2次噴灑。當(dāng)日天氣晴，溫度29℃，風(fēng)速5m/s，噴灑方法及濃度，藥量同第1次。

1.2.4 更換新枝

在噴灑病毒后，每3d進(jìn)行1次新枝更換，以利于松毛蟲的正常取食。更換的新枝也都在試驗(yàn)林地的附近，立地條件相似的林地內(nèi)采集。采集量以維持3d內(nèi)松毛蟲的正常取食為宜。

1.3 CPV病毒在赤松毛蟲體內(nèi)增殖后對(duì)個(gè)體的生長發(fā)育影響狀況

在噴灑病毒后，過1～2d等松毛蟲取食帶病毒的針葉后，采10頭幼蟲裝入罐瓶中進(jìn)行個(gè)體飼養(yǎng)。每天供應(yīng)病毒針葉，同時(shí)在附近林地采集10頭健康幼蟲也進(jìn)行罐瓶飼養(yǎng)，每日供應(yīng)沒噴病毒的新鮮松針。觀察結(jié)果如表1所示。

通過上表的排糞量來看，食取病毒針葉的幼蟲排糞量明顯少于健康幼蟲，這表明CPV病毒在幼蟲體內(nèi)已經(jīng)感染，抑制個(gè)體取食，取食量減少，排糞量相應(yīng)減少。

由上表對(duì)照看，食取病毒幼蟲個(gè)體長度明顯小于健康幼蟲，蟲尾部明顯萎縮，這是由于幼蟲感染病毒后，蟲群大多數(shù)厭食影響生長發(fā)育而造成的。

1.4 病毒感染率調(diào)查

在7月中旬對(duì)感染情況做了調(diào)查，分別在5個(gè)圍欄內(nèi)各采集幼蟲100頭，通過解剖后，看到有425頭幼蟲感染，感染率為85.0%。

1.5 采集病毒

在7月末，松毛蟲幼蟲達(dá)到7～8齡時(shí)進(jìn)行病毒采集，采集方法：用剪刀剖開幼蟲中腸，看是否感染，感染病毒的中腸為黃白或白色。人工現(xiàn)場(chǎng)采蟲及時(shí)解剖，把感染的中腸全部剪掉后放入器皿中。在飼養(yǎng)欄內(nèi)10萬頭幼蟲除死亡之外，共收集攜帶病毒的中腸18kg左右，然后進(jìn)行分離提純。

2 CPV病毒林間防治試驗(yàn)

2.1 試驗(yàn)地點(diǎn)及林地概況

試驗(yàn)區(qū)設(shè)在阜新縣務(wù)歡池鎮(zhèn)推朋前山的松林內(nèi)，樹高2～5m，林齡相近，林內(nèi)生態(tài)條件較好，郁閉度75%左右，有蟲株率30%左右，蟲口密度5～10頭/株。

2.2 試驗(yàn)內(nèi)容及方法

利用赤眼蜂攜帶病毒（“生物導(dǎo)彈”）防治松毛蟲試驗(yàn)。

“生物導(dǎo)彈”是不同于單純的赤眼蜂寄生，它是利用赤眼蜂足攜帶CPV病毒，通過赤眼蜂尋找寄主將CPV病毒住留在赤松毛蟲卵殼上，被寄生的赤松毛蟲卵，體現(xiàn)出卵期寄生效果。未被寄生的赤松毛蟲卵，幼蟲孵化時(shí)由于取食被CPV病毒污染的卵殼而感染CPV病毒，這是一種新式的利用卵期寄生及幼蟲感染病毒雙重效果來抑制赤松毛蟲種群數(shù)量增長的方法。試驗(yàn)方法及初步結(jié)果如下。

試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在推朋前山油松林內(nèi)，試驗(yàn)地面積40hm2，在其內(nèi)設(shè)置5塊標(biāo)準(zhǔn)地，查清標(biāo)準(zhǔn)樹上蛹期的蟲口密度，做為防前基數(shù)，于松毛蟲卵始盛期，分2次掛卡放蜂。第1次掛卡時(shí)間為7月25日，第2次時(shí)間為7月31日，總放蜂量達(dá)12000～15000頭/667m2。

在設(shè)置“生物導(dǎo)彈”試驗(yàn)區(qū)同時(shí)，在一定距離內(nèi)，又設(shè)置了13.3hm2對(duì)照區(qū)，其間的立地條件與試驗(yàn)區(qū)近似，設(shè)立5塊標(biāo)準(zhǔn)地。

2.3 直接噴灑病毒試驗(yàn)

在“生物導(dǎo)彈”試驗(yàn)區(qū)附近，選取6.67hm2林地進(jìn)行直接噴灑病毒試驗(yàn)，噴灑時(shí)間為8月15日，利用超低量噴霧機(jī)噴施，濃度為20億pib/mL，每677m2用藥量為1×105pib/mL，病毒總量為100億pib/667m2。

2.4 林間試驗(yàn)初期結(jié)果

2.4.1 卵期效果

在赤眼蜂羽化后，對(duì)2個(gè)區(qū)進(jìn)行了隨機(jī)調(diào)查，分別采集若干卵塊，帶回室內(nèi)查數(shù)各自的寄生情況，調(diào)查結(jié)果見表3、表4。

由表3和表4可以看出“生物導(dǎo)彈”區(qū)的卵期寄生率明顯高于對(duì)照區(qū)，也就是說，在初期赤眼蜂的寄生作用已經(jīng)十分明顯。

2.4.2 Ⅱ齡幼蟲期效果

在8月25日對(duì)“生物導(dǎo)彈”區(qū)、病毒區(qū)、對(duì)照區(qū)采取了抽樣調(diào)查，采集幼蟲解剖觀察感染情況，結(jié)果見表5。

由表5看出，病毒區(qū)感染效果明顯，而“生物導(dǎo)彈”區(qū)也有一定效果。

2.4.3 后期套籠飼養(yǎng)觀察及結(jié)果

用3個(gè)套籠，各飼養(yǎng)200頭病毒區(qū)幼蟲，套在噴灑與病毒試驗(yàn)區(qū)同樣濃度病毒的油松枝上，每周一、三、五各觀察1次死亡情況。

另外用3個(gè)套籠，各飼養(yǎng)200頭“生物導(dǎo)彈”區(qū)幼蟲，套在沒有噴灑病毒的油松枝上，觀察同上。

再用3個(gè)套籠內(nèi)各飼養(yǎng)200頭對(duì)照區(qū)內(nèi)的幼蟲，套在沒有噴灑病毒的油松枝上，作為對(duì)照，觀察同上。

觀察結(jié)果，病毒區(qū)幼蟲取食病毒針葉后，食欲明顯減退，行動(dòng)遲緩，蟲體逐漸萎縮，死亡蟲數(shù)較多。“生物導(dǎo)彈”區(qū)的幼蟲，也出現(xiàn)抑食癥狀，但不太明顯，死亡蟲數(shù)較病毒區(qū)少。對(duì)照區(qū)的幼蟲取食情況正常。

3 結(jié)論

1CPV質(zhì)型多角體病毒，在北方的復(fù)制情況很好，能夠在赤松毛蟲初期效果是很明顯的，這種在南方防治馬尾松毛蟲成功的方法在北方也是可行的。蟲幼蟲體內(nèi)增殖。以及在北方防治赤松毛。

利用赤眼蜂攜帶CPV病毒（“生物導(dǎo)彈”）進(jìn)行松毛蟲治理，卵期寄生效果比較明顯，但攜帶病毒所發(fā)揮的作用，還需要長時(shí)間的進(jìn)一步的觀察。

直接噴灑病毒效果十分明顯。對(duì)于應(yīng)用質(zhì)型多角體病毒防治赤松毛蟲的最佳施藥方式、劑量、最佳應(yīng)用蟲期和時(shí)間、擴(kuò)散作用及其經(jīng)濟(jì)成本等還有待于進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

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