海南橋頭地瓜影響小鼠免疫功能的初步研究

鄭通 王銳敏 王國旭 王蔓兒 王英

摘 要：研究海南橋頭地瓜對小鼠免疫功能的影響，討論其在免疫功能方面的應用價值。通過用海南橋頭地瓜連續(xù)喂養(yǎng)小鼠30天后，觀察小鼠的生長情況，計算臟體指數，檢測其誘發(fā)遲發(fā)型變態(tài)反應（delayed type hypersensitivity，DTH）和對小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響。相比對照組，實驗組小鼠DTH反應程度增強，巨噬細胞的吞噬功能增強。產自海南澄邁橋頭鎮(zhèn)的橋頭地瓜初步證實具有影響小鼠免疫功能的作用，其相關機制值得進一步研究探討。

關鍵詞：地瓜;免疫功能;小鼠

甘薯，俗稱紅薯、番薯、甜薯、地瓜等，是我國重要糧食、飼料和食品工業(yè)原料作物。我國甘薯種植面積約占世界總面積的70%，年產量占世界總產量的80%[1]，資源豐富。近年來隨著人們健康意識增強，甘薯的營養(yǎng)保健功效也日益引起人們關注。海南橋頭地瓜是甘薯品種之一，產于海南省澄邁縣橋頭鎮(zhèn)，甜度適中，常吃不膩，深受人們的喜愛。本文對海南橋頭地瓜影響小鼠免疫功能效果進行了研究，這對于明確甘薯保健效果有重要意義。現(xiàn)將結果匯報如下。

1 材料和方法

1.1 材料

海南橋頭地瓜產自海南省澄邁縣橋頭鎮(zhèn);生理鹽水購自四川科倫藥業(yè)股份有限公司（產品批號L218081805）;綿羊紅細胞懸液購自北京博爾西科技有限公司;瑞氏-吉姆薩染液購自北京雷根生物技術有限公司;可溶性淀粉購自西隴化工股份有限公司;雞紅細胞懸液由課題組新鮮配制。

1.2 實驗動物

健康昆明小鼠30只，雄性，8～10周齡，體重（36.13±652）g，購自長沙市天勤生物技術有限公司。

1.3 方法

1.3.1 橋頭地瓜粉的制備

橋頭地瓜洗干凈切片、烘干，用粉碎機研磨成粉末，裝入干凈瓶子，室溫干燥保存，備用。

1.3.2 橋頭地瓜對小鼠生長情況的影響

將小鼠隨機分為2組，每組15只。分組后測量初始體重，對照組喂食普通飼料加生理鹽水，實驗組喂食等量普通飼料加溶解橋頭地瓜粉（劑量250g/Kg）的生理鹽水，飼養(yǎng)時間30天。小鼠實驗飼養(yǎng)期間測量體溫、觀察進食、活動及精神狀態(tài)等方面的表現(xiàn)。

1.3.3 橋頭地瓜對小鼠臟體指數的影響

第30天給藥后，每組取4只禁食不禁水12h后分別稱體重，處死后剝離肝臟、脾臟稱重量，并計算肝體指數（肝臟重量與體重比值）和脾體指數（脾臟重量與體重）。

1.3.4 誘發(fā)遲發(fā)型變態(tài)反應（DTH）（采用足跖增厚法）

第30天給藥30min后，每組分別取4只小鼠進行腹腔注射2%綿羊紅細胞懸液0.2mL，4天后測量左后足趾厚度，測量后在測量部位注射20%綿羊紅細胞懸液20μL，注射24h后測量左后足趾部厚度，同一部位測量三次，取平均值。

1.3.5 橋頭地瓜對小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響

兩組小鼠各取4只，分別于腹腔注射6%可溶性淀粉肉湯1mL，3天后，再分別于腹腔注射1%新鮮雞紅細胞懸液05mL，并輕輕揉腹。30min后處死小鼠，取腹腔液涂片，干燥后進行瑞氏-吉姆薩染液染色，置顯微鏡下觀察并按以下公式計算吞噬指數。實驗重復3次。

1.3.6 數據處理

實驗數據用SPSS18.0統(tǒng)計軟件處理，計量資料用x-±s表示，采用t檢驗，p<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 橋頭地瓜對小鼠生長情況的影響

實驗飼養(yǎng)期間小鼠體溫正常，進食、進水量正常，毛皮光澤度好，活動自如、反應敏捷，精神狀態(tài)良好，實驗組和對照組小鼠喂食30天前后體重的變化無統(tǒng)計學意義（t實=0.044，p=0.968;t對=0.629，p=0.574），見表1。

2.2 橋頭地瓜對小鼠免疫功能的影響

實驗組小鼠的肝體指數、脾體指數與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（t肝=0.016，p=0.988;t脾=0.784，p=0.490），說明橋頭地瓜對小鼠的脾臟/體重比值、肝臟/體重比值均無影響。實驗組小鼠足跖腫脹度較對照組明顯，兩者間的差異具有顯著性（t=3.903，p=0.030）;鏡下可觀察到實驗組小鼠巨噬細胞吞噬的雞紅細胞相比對照組多，計算吞噬指數經統(tǒng)計學分析顯示，兩組的差異具有統(tǒng)計學意義（t=15.000，p=0.001）。見表2。

3 討論

甘薯是重要的糧食作物，僅次于水稻、小麥、玉米。含有淀粉、膳食纖維、胡蘿卜素、維生素A、維生素C和鉀、鐵、銅、硒、鈣等10余種微量元素，具有防癌、去脂降壓、降血糖、保護血管、通便潤腸、延緩衰老等作用，營養(yǎng)價值高，被營養(yǎng)學家稱為營養(yǎng)最均衡的天然保健食品[2-6]。甘薯能“煮食補脾胃，益氣力，御風寒，益顏色”。在日本國家癌癥研究中心公布的20種抗癌蔬菜排行中甘薯名列榜首[7-9]。

本次研究結果顯示，實驗組小鼠喂食橋頭地瓜后體重和喂食橋頭地瓜前體重相比較，差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05），說明橋頭地瓜對小鼠體重的影響無統(tǒng)計學意義。實驗組小鼠的脾體指數、肝體指數和對照組的脾體指數、肝體指數比較，差異也無統(tǒng)計學意義（均p>0.05）。DTH誘導試驗結果顯示實驗組小鼠足跖腫脹度顯著于對照組（p<0.05）;經喂食橋頭地瓜后的小鼠巨噬細胞的吞噬功能與對照組相比，顯著增強，具有統(tǒng)計學意義（p<0.01）。這些結果顯示橋頭地瓜對小鼠淋巴細胞和巨噬細胞都可產生明顯的增強效應，初步提示橋頭地瓜具有增強免疫細胞功能作用。此次實驗研究選用的橋頭地瓜產自海南省澄邁縣橋頭鎮(zhèn)。橋頭鎮(zhèn)土壤富含硒元素，因此，橋頭地瓜也被喻為富硒地瓜。

硒與動物的生長發(fā)育、繁殖和疾病的發(fā)生有著密切關系，1973年世界衛(wèi)生組織將其定為人和動物的必需微量元素之一[10]。眾多研究顯示，硒參與機體的抗氧化活性、甲狀腺激素代謝、修復細胞、抗癌防癌等生理功能[11-12]。硒還能促進淋巴細胞增殖、分化和促進抗體的生成、細胞因子的分泌等[13-14]。本次實驗結果中橋頭地瓜增強淋巴細胞和巨噬細胞的作用是否和其富含硒元素有關值得進一步探討。

（感謝在本次實驗中王一彬、王帥兩位同學給予幫助。）

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