HPLC測定蒼術中的3種成分研究

張如春

(湖南省常德市桃源縣中醫醫院，山西 贛州 415700)

前言

在祖國醫學大力發展的今天，對中藥的認識逐漸提升。其中，蒼術作為上品中藥，其在機體消化系統、心血管系統、泌尿生殖系統、神經系統以及其他系統中均發揮著一定的作用。如在消化系統中，蒼術起到促進胃、腸運動的作用，并具有抗潰瘍的作用。在心血管系統中，蒼術則可起到保護心肌缺血再灌注損傷及其引發的心律失常等功效。在泌尿生殖系統中，蒼術中的有效成分β-桉葉醇，其可通過抑制Na+等的活性，并抑制其在腎臟的重吸收而產生利尿作用。在神經系統中，蒼術中的蒼術醇的鎮痛效果與阿司匹林功效相當。除此之外，蒼術還具有保肝、抑菌、抗腫瘤等功效。可見，對蒼術這一中醫臨床中的常用藥，其具有較大的需求，因而對其中的3種主要成分進行測定時，選取適宜的方法是非常關鍵且重要的。因此，本文主要從高效液相色譜法(HPLC)測定蒼術中3種成分的研究進展角度展開了研究，旨在為蒼術的合理開發和利用奠定基礎。

1 蒼術及HPLC法相關理論概述

1.1 蒼術

蒼術，菊科植物，又有南蒼術、北蒼術等之稱。其中，分布在湖北、江蘇等地的稱為南蒼術，而分布在內蒙古、吉林及河北等地的則成為北蒼術。可見，蒼術具有較廣的分布范圍。然而，受到產地和地理環境的影響，蒼術中各個成分的含量也是有明顯的差異的。這也在一定程度上影響了藥材質量的控制。在鑒別蒼術這一中藥材質量時，僅通過外觀形態的觀察是難以鑒別優劣的，這也是導致目前市場上蒼術藥材混雜現象普遍的重要原因之一。

蒼術以揮發油為主要化學成分，其約為5%至9%。而揮發油的主要成分則包括蒼術素和蒼術醇等。β-桉葉醇是蒼術醇中的混合物之一，其含量占比約為6%。在2015版的《中國藥典》中，其將蒼術素規定為蒼術的指標性成分，并對其含量給予了明確的規定，即不低于0.30%。由此可見，在對蒼術這一中藥材進行質量控制的過程中，應對其3種主要成分的含量進行測定。

1.2HPLC法

高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)，又有高速液相色譜、高壓液相色譜、近代柱色譜等支撐，其屬于色譜法。HPLC法下的流動相是液體，系統采用的是高壓輸液系統，主要是通過將不同比例的混合溶劑，或不同極的單一溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相色譜柱中，并經成分分離后，在檢測器下進行檢測的一種測定方法。HPLC具有以下幾個特點：第一，具有較好的分離效能。第二，具有較高的靈敏度。第三，具有較高的壓力。第四，具有較快的載液流速和分析速度。最后，具有較廣的應用范圍。除此之外，HPLC還具有易回收、不會破壞樣本以及色譜柱反復使用等優勢。總之，正是由于HPLC具有上述特點和優勢，因而目前在醫學、化學、工業及農業等諸多領域獲得廣泛的應用。

2 HPLC法測定蒼術中3種成分的研究進展

2.1 蒼術素

蒼術素的分子式、分子量及相對密度分別為C13H10O、182.2179、1.056g/cm3。蒼術素是不溶于水、微溶于甲醇，溶于乙酸乙酯和丙酮的無色結晶藥品。在室溫環境下，蒼術素具有較好的穩定性。在對蒼術素進行檢測時，其檢測的方法主要包括HPLC、TLC法等。瞿領航在研究中也采用HPLC法對南北蒼術的含量進行檢測，并認為這一方法可以有效區別南北蒼術[1-3]。高麗在研究中采用HPLC法對不同產地的蒼術中的蒼術素含量進行了分析，并指出在不同的產地下，蒼術中蒼術素的含量是有較大的差異的，其中蒼術素含量最高的產地是河南的方城縣與嵩縣。另外，也有相關文獻顯示，經人工栽培的蒼術，采用HPLC對其含量進行測定，顯示蒼術素的含量為0.84%，其與我國的相關法定標準相符[4]。另外，也有學者采用HPLC法對北蒼術中的成分展開定性與定量分析，并確定了13種成分，即蒼術素、蒼術醇等，但對于β-桉葉醇卻并未確認。然而，也有學者運用同樣的鑒定法，對南蒼術中的主要成分進行了測定，并認為在HPLC法下，其確認了蒼術素、β-桉葉醇，但對于蒼術醇卻并尚未確認。也就是說，在對蒼術中主要成分進行分類區別的過程中，可采用HPLC法的測定結果作為依據和參考。然而，目前關于HPLC法測定的成分種類研究結果還尚不一致。由此可見，關于HPLC測定蒼術中各個成分的研究還有待深化。

2.2 蒼術醇

蒼術醇的分子量分別為222.37。有學者探究了不同居群蒼術中蒼術醇的含量，其采用的方法是HPLC法，并認為這一方法是一種簡便且準確的藥材質量評價法，并認為大別山區蒼術中的蒼術醇含量是較高的，其含量約為江蘇茅蒼術的4倍至6倍。相比于傳統分離方法，采用HPLC法，蒼術醇的含量會有由于溫度過高而受到破壞，是一種理想的測定方法。另外，也有學者采用HPLC法分析了南北蒼術、關蒼術中蒼術素和蒼術醇中的含量展開了測定，其在進行含量測定的過程中，采用的色譜柱為Promosil C18，流動相為乙腈一磷酸水，270nm為檢測波長，25℃為柱溫，指出蒼術醇的質量濃度范圍為0.001-0.218mg/mL，而蒼術醇發熱質量濃度范圍為0.0004-0.0119mg/mL。與此同時，南北蒼術和關蒼術三個不同的產地，其在特征圖譜方面的差異較大，因而在蒼術醇和蒼術素的含量方面也存在較大的差異。而采用HPLC法，其可以快速將三種不同的蒼術進行鑒別。在進行測定的過程中，將含量測定與特征圖譜進行結合，其不僅具有操作簡便的優勢，而且在測定結果方面也更為準確。不僅如此，還具有較好的重復性。也就是說，在對蒼術這一中藥材的質量進行評價時，HPLC法是一種可靠且全面的分析方法，值得在蒼術中成分測定中廣泛應用。

2.3β-桉葉醇

β-桉葉醇作為一種化學物質，其分子式、分子量分別為C15H260、222.37。β-桉葉醇的外觀是白色結晶，其在2℃至8℃溫度下避光保存。據相關文獻顯示，采用HPLC對南蒼術和北蒼術的β-桉葉醇和蒼術素的含量進行測定時，南蒼術中的β-桉葉醇和蒼術素含量范圍分別為17.14-32.15/2.23-3.76，而北蒼術對應的含量范圍則分別為0.30-7.03、0.43-7.06[5-8]。對于不同產地蒼術中的β-桉葉醇含量，β-桉葉醇與蒼術素含量最高的產地是湖北，蒼術素與蒼術內酯Ⅱ含量最高的產地在江蘇茅山。在HPLC下，基于色差原理分析不同生長年限北蒼術藥材粉末，顯示蒼術素與β-桉葉醇的分離度在1.50以上，對應的線性范圍分別為3.30-33.00、4.40-44.00，其精密度和重復性均在2%以內，各成分含量隨著生長年限的增加而升高。也就是說，蒼術的生長年限越長，其β-桉葉醇和蒼術素的含量就越高。對于北蒼術而言，其β-桉葉醇和蒼術素與黃藍色度和紅綠色度之間的關系真是正相關關系，而與色差值、顏色亮度之間的關系是負相關關系。

3 結語

伴隨祖國醫學的快速發展，當下研究的重點逐漸轉向中藥的開發與利用。然而，在中藥開發與利用中，對其中藥成分進行測定不僅是重中之重，而且是確保藥材質量的關鍵。通過上述分析顯示，采用HPLC測定法對蒼術中3種成分進行測定時，對蒼術素、蒼術醇以及β-桉葉醇3種成分同時測定的研究極少。現階段，既有研究成果主要是對蒼術中單一成分的測定，如蒼術素的測定。對于多種蒼術成分共同測定的研究，其則主要是對β-桉葉醇和蒼術素的測定，對于蒼術素與蒼術醇、β-桉葉醇與蒼術醇，以及上述3種成分含量的測定研究是比較少的。除此之外，既有相關文獻在應用HPLC進行蒼術成分測定時，其主要選取的是不同產地蒼術成分含量的測定，且主要以南蒼術和北蒼術作為主要研究領域。因此，未來采用HPLC測定法對蒼術中3種成分進行測定時，應注重同時對上述3種成分進行測定。