草莓灰霉菌生防酵母菌的篩選及生防效果測定

王曉妍 張棟園 李寧 崔新儀

摘? ? 要：從天津當地常見的7個葡萄品種中篩選得到69株酵母菌，通過平板對峙篩選發現8株酵母菌對草莓灰霉菌抑制效果超過50.00%，其中菌株YGMG-3的離體抑制率達到74.32%，顯著高于其他處理（P<0.05）;對篩選得到的8株酵母菌株進行產揮發性物質測定，結果表明一株酵母菌株YGMG-3對草莓灰霉菌具有明顯抑制效果，其抑制率達到68.89%，顯著高于其他處理（P<0.05）;為進一步確認酵母菌株YGMG-3對草莓灰霉菌的抑制效果，本研究測定了其對草莓灰霉菌孢子萌發的影響，結果顯示酵母菌株YGMG-3對草莓灰霉菌的孢子萌發具有較強的抑制效果，其中2×107個·mL-1處理效果最顯著，抑制孢子萌發率達到85.50%，顯著高于其他處理（P<0.05）。這些結果為開發酵母菌株YGMG-3防治草莓灰霉菌提供了一定信息。

關鍵詞：生防酵母菌;草莓灰霉菌;抑菌效果;孢子萌發

中圖分類號：S481? ? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? ? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2020.09.001

Abstract： Sixty-nine yeast strains were screened from seven common grape varieties collected in tianjin， eight strains among these yeast strains inhibited more than 50.00% growth of agent caused strawberry greymold invitro. A yeast strain YGMG-3 exerted significant inhibite functionon strawberry grey mould with 74.32%，which was significantly higher than other stains（P<0.05）.Volatile substance produced from eight strains of yeast was determined and the strain YGMG-3 inhibited 68.89% mycelial growth of strawberry grey mold， which was significantly higher than other treatments（P<0.05）.To further confirm the inhibitory effect of yeast strain YGMG-3 on strawberry gray mould， germination of spores of strawberry grey mould were measured. The yeast strains YGMG-3 with 2×107·mL-1 concentration inhibited 85.50% germination of spores of strawberry grey mould， which was significantly higher than other treatments（P<0.05）. These results provided some information for the development of yeast strain YGMG-3 to control strawberry grey mould.

Key words： antagonistic yeast; strawberry grey mould; inhibitory effect; spore germination

草莓 （Fragaria × ananassa Duch.），屬薔薇科，草莓屬，多年生草本植物。其色澤鮮艷、口感酸甜深受消費者的喜愛，又由于營養豐富，因此被稱為“水果皇后”[1]。草莓灰霉?。⊿trawberry Gray Mould）是引起草莓腐爛的主要原因之一[2-3]。我國各草莓栽培地區都有發生，20 世紀 70 年代后發病逐漸加重，特別在南方采果期正值春雨時節，發病更為嚴重。草莓灰霉病的發生常造成感病品種的病果率在 30%左右，嚴重的可達60%以上，對草霉產量、品質影響很大。目前防治草莓灰霉病主要還是采用化學殺菌劑處理[4-6] ，這樣往往會引入一些不安全因素。另外，病原菌對常用化學藥劑抗藥性的增強，使得化學農藥的防效不斷下降，并且隨著人們生活水平不斷提高，對綠色食品的要求越來越強烈[7-9]，因此很有必要開辟新的安全有效防治途徑，生物防治顯得具有重要意義。本研究從葡萄果實上篩選可離體拮抗草莓灰霉菌的酵母菌，并對其生防效果進行研究，為草莓灰霉病的防治提供一定的理論依據。

1 材料和方法

1.1 供試材料

從天津市西青區紅旗農貿市場購入7個不同品種的葡萄：玫瑰香葡萄，馬奶葡萄，陽光玫瑰葡萄，魏可葡萄，A17葡萄，脆紅寶葡萄、紅地球，挑選大小一致，成熟度8～9成，無病蟲和機械傷口的果實用于酵母菌的分離與篩選。

1.1.1 供試酵母菌 從葡萄果皮和果肉中分離得到。

1.1.2 供試灰霉菌 草莓灰霉菌（Botrytis cinerea Pers.）由天津農學院植物病理實驗室提供。

1.1.3 供試培養基 PDA培養基、PDB培養基、YEPD培養基均采用常規方法制備。

1.1.4 主要儀器與設備 詳見表1。

1.2 試驗方法

2.4 不同濃度酵母菌YGMG-3菌株對灰霉菌孢子萌發率的影響

結合表2和表3的試驗結果，篩選出一株對草莓灰霉菌具有較好抑制效果的酵母菌菌株YGMG-3，測定了其對草莓灰霉菌孢子萌發的影響，結果見表4。

從表4可以看出，酵母菌株YGMG-3對草莓灰霉菌孢子萌發具有較好的抑制作用，其中2×107個·mL-1濃度對草莓灰霉菌孢子萌發抑制率達到85.50%，顯著高于其他處理（P<0.05），其次為處理2×108個·mL-1，孢子抑制率達到76.04%。

3 結論與討論

生物防治在果蔬采后病害控制過程中有著越來越廣泛的應用前景[10-11]，但是對有效生防菌的篩選是一項繁重而復雜的工作，在工作前期篩選得到具有安全，有效，易定殖等特點優良菌株才能夠為進一步研究開發和利用奠定堅實的基礎。因此，本研究從日常食材中篩選拮抗酵母菌，為生防酵母菌的安全性提供了保障。酵母菌在葡萄中普遍存在，且容易在果蔬表面定殖，這些都為篩選和開發優良的生防酵母菌株奠定了基礎。

有研究表明，有些酵母菌可以產生一些揮發性的抑菌物質[12-13]，在本研究中，通過對峙培養和產揮發性物質測定發現酵母菌YGMG-3均對草莓灰霉菌具有明顯的抑制效果，可能該菌株不僅能產生抗生素類物質還能產生一些具有揮發性的抑菌物質，酵母菌YGMG-3對草莓灰霉菌孢子萌發也有明顯的抑制作用，但是還需要對該菌株的活體抑制效果進一步研究和確認，對其抑菌機理進行深入研究，為酵母菌株YGMG-3的開發和應用奠定堅實的理論基礎。

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