PPARγ相關自噬在急性肺損傷中的作用機制研究

史婧 關鍵

急性肺損傷(acute lung injury，ALI)臨床診斷為急性呼吸窘迫綜合征，主要表現為肺泡及毛細血管的損傷及引起的肺水腫，是敗血癥和肺炎等疾病最嚴重的的并發癥之一，ALI的死亡率仍高達40%[1]，探究ALI發病機制具有重要的臨床意義。炎癥系統的持續激活與ALI的進展和結局有著密切的因果關系，包括腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白細胞介素(interleukin，IL)-1的增加和抗炎細胞因子的降低[2]。ALI與自噬有關，研究發現自噬會緩解炎性反應，從而保護脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘導的肺損傷[3]。并且上調自噬的水平會并保護急性肺損傷[4]，但是關于ALI相關自噬的調控機制尚不清楚。過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptors γ，PPARγ)是一種轉錄因子，具有促進自噬的作用[5]。此外，一項最新的研究結果顯示PPARγ通路的激活會抑制炎性反應，在ALI中，PPARγ的抑制與炎性反應的激活有關，而激活PPARγ會抑制炎性因子的表達[6]。據此，我們推測PPARγ可能通過調控自噬抑制炎性反應，并可能緩解ALI，本文主要研究PPARγ相關自噬對ALI的影響及相關作用機制。

資料與方法

一、動物及建模方法

雄性BALB/c小鼠(SPF級，8周齡)(Laboratory Animal Cecter，中國)。LPS(Sigma公司，美國)。PPARγ激動劑吡格列酮、PPARγ拮抗劑GW9662(Selleck公司，中國)。小鼠TNF-α、IL-1β酶聯免疫吸附(ELISA)試劑盒(北京樂博公司，中國)。蘇木素-伊紅(HE)染色試劑盒(武漢華美公司，中國)。倒置顯微鏡(Olympus IX71，Tokyo，Japan)。小動物血氣分析儀ABL90(Radiometer公司，丹麥)。anti-PPARγ、anti-Beclin、anti-LC3、和二抗(Abcam公司，美國)。PVDF膜(Bio-Rad公司，美國)。倒置顯微鏡(Olympus IX71，Tokyo，Japan)。

二、分組及建模方法

將40只小鼠隨機分為4組，即對照組、ALI組、ALI+吡格列酮(PPARγ激動劑)組和ALI+GW9662(PPARγ抑制劑)組，每組10只。通過呼吸道滴注LPS的方式建立小鼠ALI模型[7]，在建模……