枇杷花蕾毒理學安全性評價

潘峰　類成祥　高燕　於懷龍　李凌坤　高金典　高輝煌　李國生

摘 要 以枇杷花蕾濃縮液為受試樣品，進行昆明種小鼠急性毒性試驗和SD大鼠的亞慢性毒性試驗，分析評價枇杷花蕾濃縮液的食品安全性毒理學。結果表明：昆明種小鼠經枇杷花蕾濃縮液60 g/kg（試劑量/體質量）灌胃14 d后，雌、雄小鼠的活動、體征表現均為正常，并未出現急性中毒與死亡情況；SD大鼠經過連續90 d給予枇杷花蕾濃縮液3～12 g/kg灌胃，各處理組SD大鼠表現情況良好，體質量、食物利用率、臟器質量、臟器系數均無異常改變，血常規和生化指標正常，肝腎脾各臟器質量和組織結構正常，未見與樣品有關的病理改變。根據急性毒性劑量分級標準可初步判定枇杷花蕾屬無毒級物質。

關鍵詞 枇杷；花蕾浸提液；安全性；急性毒性；亞慢性毒性

中圖分類號 S667.3 文獻標識碼 A

Abstract Concentrated loquat bud extract was used in acute （14 days） and sub-chronic （90 days） toxicity test via intragastric administration to evaluate its safety as well as toxicity. The results showed acute oral administration of loquat flower buds extract in mice， 60 g/kg BW per day each mouse（about 600 times equivalent to the human body recommended dose）， the activities and physical signs of male and female mice were normal， acute poisoning and death did not happen； Sub-chronic toxicity test showed the measured parameters were normal， no observed adverse effect level at the highest dosage of 12 g/kg BW（about 120 times） was found. It confirmed there is no acute or sub-chronic toxicity in loquat buds extract leaching under our experimental conditions.

Key words Loquat；Bud extract；Safety；Acute toxicity；Subchronic toxicity

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.11.027

據《本草綱目》記載，枇杷花具有“止渴下氣、利肺、止吐逆、去焦熱、潤五臟”及“治頭風、鼻涕清涕”等功效[1]。枇杷花不僅富含硒、鋅、鎂、鈣、鐵等礦物質，還含有類黃酮、類胡蘿卜素、酚酸類及氨基酸等生物活性成分，因此，枇杷花具有較高的藥用及保健價值。中國枇杷花資源豐富，枇杷產量占世界總產量的70%，其應用前景廣闊[2]。近年來，隨著保健枇杷花蕾特定提取物的原料向中藥及復方藥等擴展，一些以枇杷花為功效成分的茶品也逐漸出現在市場上。由于枇杷花的天然組分復雜，代謝途徑多通路，某些成分在人體內一定含量范圍內可治療疾病、改善健康，但若某特定成分攝入或蓄積量過大，也不排除會對人體產生慢性危害的可能[3]。

目前，國內外有學者對枇杷葉和果實的藥理作用等進行了較系統的研究[4-7]，但關于枇杷花蕾的毒理學研究尚未見報道。因此，本研究開展枇杷花蕾的急性毒性和亞慢性毒性的毒理學研究，分析受試動物的體質變化、血液血清學和組織病理學等指標，為枇杷花蕾及其飲品的安全性評價提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料 供試材料枇杷花蕾由華福生物科技（福建?。┯邢薰咎峁瑸榇菅b，內容物為褐色枇杷花蕾破碎顆粒，推薦攝入量為每次2 g（每泡），每天 2～3泡，即按人體體重60 kg計，每日推薦量為 6 g；推薦飲用量為每2 g浸泡于200 mL水中（約70 mL共3次沖泡量）。昆明種小鼠和SD 大鼠均購自吳氏實驗動物中心。實驗動物試驗前在動物房內檢疫室檢疫4 d，并正常喂養一周；動物房室溫22～25 ℃，相對濕度55%～70%，12 h光暗循環，受試前后動物自由飲水及飲食。

1.1.2 試驗藥品和試劑 谷草轉氨酶、總蛋白、尿素氮、肌酐、血糖及總膽固醇試劑盒均購自北京中生北控生物科技股份有限公司，實驗方法按試劑盒標準程序使用。

1.1.3 主要儀器 AR224CN型電子天平、R-200型旋轉蒸發儀、離心機、OLYMPUS顯微鏡、日本Hitachi7020型生化自動分析儀、GellyHY-318型血細胞自動分析儀。

1.2 方法

1.2.1 材料處理 稱取 0.3 kg枇杷花蕾樣品，加入 3 L、90 ℃蒸餾水浸泡 30 min后過濾取濾液，濾液經低溫減壓濃縮至300 mL，即得1 g/mL濃度的樣品濃縮液，于4 ℃冰箱內保存，使用前以蒸餾水將濃縮液配制成所需濃度，供小鼠急性經口毒性試驗和大鼠90 d亞慢性毒理試驗用[8]。

1.2.2 枇杷花蕾濃縮液急性毒性試驗 用最大耐受量法進行小鼠急性灌胃毒性試驗，選18～22 g昆明種小鼠，雌雄各10只，以每天30 g/kg（試劑量/體質量）灌胃給藥枇杷花蕾濃縮液2次（每次間隔5 h，灌胃前用蒸餾水定量為1 mL），即每只小鼠每天給藥總量60 g/kg（試劑量/體質量）計算約服用本實驗中的枇杷花蕾濃縮液原液1.2 mL，按人體體重60 kg計，相當于小鼠每天服用量是人體每天推薦服用量的600倍。在為期2周的急性毒性反應測試中，給藥后逐日觀察并記錄小鼠的外觀行為活動、精神狀態、攝食量、大小便及其顏色、被毛、鼻、眼、口腔有無異常分泌物，并記錄小鼠中毒表現和死亡情況，連續觀察2周后進行病理學剖檢[9-10]。

近年來，涉及枇杷花的新藥和保健食品日益增多。閆永芳[15]和蘆艷[16]研究枇杷花的營養成分和加工工藝；李琪等[17]分析枇杷花的主要有效成分； 姜帆等[18]研究枇杷花茶的抗氧化作用及其食品衛生；鄧晶晶等[19]研究枇杷花的質量標準；馬春華等[20]開發出枇杷花薄荷飲料；施木田等[21]以枇杷花和中草藥為原料開發的枇杷花茶飲品；蔣曉東等[22]以枇杷花和綠茶進行拼配成袋泡茶；周湘池等[23-24]開發出枇杷花酒和枇杷花醋；林岳[25]開發出枇杷花蜜酒等。產品功效主要為治療咳嗽、多痰、頭風、鼻流清涕等傳統應用方法[26]。作為中國的傳統中藥材，多年的藥用史和一些藥理毒理學實踐資料均顯示枇杷花蕾作為藥品的安全性是可靠的，但作為長期飲用的枇杷花蕾，其衛生毒理學研究資料尚不多見。本試驗結果可為以枇杷花蕾為原料的茶飲品安全性評價提供一定依據，但由于其有一定的藥理作用，且飲用史尚短，要系統完整的評價其安全性，還需進行亞慢性毒性中的生殖毒性試驗和代謝試驗，并對其慢性（致癌）毒性進行深入的研究。

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