吉西他濱聯合順鉑對kaiso蛋白漿表達的NSCLC患者療效變化及血清CEA、CY211水平的影響

張蕊 鄒勤光 趙暉 賈春祎 孫少林 曲明江 張立新 張曉凱 趙鑫 王啟文 王寶

(吉林省腫瘤醫院 1內一科，吉林 長春 130062；2胸外二科)

kaiso是一種轉錄抑制因子〔1〕。研究表明kaiso存在核漿穿梭現象，并可以通過抑制Wnt信號通路的靶基因抑制肺癌細胞的增殖、侵襲及轉移〔2,3〕。kaiso蛋白發現在多種實體惡性腫瘤中表達，但目前化療藥物對kaiso蛋白異位表達的非小細胞肺癌(NSCLC)患者的治療效果研究很少，本文旨在研究采用吉西他濱聯合順鉑對kaiso蛋白漿表達的NSCLC患者進行治療，考察患者的生存質量及治療前后對血清癌胚抗原(CEA)、骨膠素(CY211)的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年6月至2019年6月吉林省腫瘤醫院胸外科手術切除，病理結果證明肺癌的存檔蠟塊標本160例，免疫組化法判定出kaiso蛋白漿表達陽性組為實驗組，呈陰性的為對照組。患者術前均沒有接受放化療或其他腫瘤針對性的治療，其中男89例，女71例；年齡60～84歲，中位年齡69歲。術后根據國際抗癌聯盟(UICC)制定的第7版TNM分期標準進行手術分期〔4〕。對照組50例，鱗癌32例；其中Ⅲ期26例，Ⅳ期6例；腺癌18例，Ⅲ期15例，Ⅳ期3例。觀察組110例，鱗癌59例，其中Ⅲ期49例，Ⅳ期10例；腺癌51例，其中Ⅲ期40例，Ⅳ期11例。所有標本被切除離體后冷凍保存，使用和采集均獲得患者本人同意并由吉林省腫瘤醫院倫理委員會批準。

1.2免疫組化法及結果的判定 將標本制作成4 μm厚的切片，常規免疫組化S-P 法染色，檢測kaiso蛋白表達，稀釋濃度1∶40，同時用0.01 mol/L、pH7.4 的磷酸鹽緩沖液代替一抗作陰性對照。kaiso 蛋白鼠抗人單克隆抗體購于美國BD 公司，S-P免疫組化試劑盒購于福州邁新公司。

結果判定:選腫瘤細胞陽性染色集中區域，每張切片計數高倍視野(×400)下400個腫瘤細胞，按kaiso表達百分率分為4個等級:<25%為0分，26%～50%為1 分，51%～75%為2分，>75%為3分。根據免疫組化染色強度分為3 個等級:淺黃色計1分，棕黃色計2分，黃褐色計3分。以陽性細胞率和染色強度的分值乘積作為每例標本的積分。積分為0分與1分計為陰性表達，≥2 分為陽性表達。

1.3治療方法 所有患者采用吉西他濱聯合順鉑，吉西他濱1 250 mg/m2(江蘇豪森藥業)第1天和第8天用藥;順鉑25 mg/m2(齊魯制藥有限公司)第1～3天靜脈滴注，3 w為1個周期，治療2個周期及以上。用藥期間密切檢測患者的不良反應，如發生嚴重不良反應及時停藥。

1.4觀察指標及評定方法 ①治療結束后觀察兩組臨床療效，完全緩解(CR)：腫瘤病灶消失無新病灶出現，至少維持30 d；部分緩解(PR)：腫瘤體積增大或縮小≥30%，至少維持30 d；疾病穩定(SD):腫瘤體積直徑縮小或增大25%，至少維持30 d;疾病進展(PD):腫瘤體積增大20%或出現新病灶。總有效率=(CR+PR)/總例數〔5〕，穩定率=(CR+PR+SD)/總例數。②所有患者治療前及治療2個周期后，空腹抽取靜脈血3 ml，離心取上清液，酶聯免疫吸附試驗測定血清腫瘤標志物CEA、CY211水平。

1.5統計學分析 采用SPSS17.0軟件進行χ2檢驗、t檢驗。

2 結 果

2.1kaiso蛋白在NSCLC患者中表達陽性率的判定 kaiso蛋白被染色后在細胞質中呈現粗細不均勻的淺黃至棕褐色顆粒，根據判定標準，160例NSCLC患者標本中kaiso陽性表達率為68.75%(110/160)，見圖1。

2.2兩組臨床療效比較 治療后對照組有效率高于觀察組，差異有統計學意義(χ2=4.51，P<0.05)。對照組穩定率高于觀察組，但差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.3不同病理組化療前后血清CEA、CY211水平比較 化療前，兩組腺癌、鱗癌血清中CEA、CY211水平無明顯差異(P>0.05)，化療后，均顯著降低(P<0.05)。治療前后腺癌和鱗癌血清CEA、CY211水平差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表1 兩組臨床療效對比(n)

表2 不同病理組化療前后血清CEA、CY211水平變化

2.4不同分期化療前后血清CEA、CY211水平比較 化療前，Ⅲ期對照組和觀察組血清CEA、CY211水平差異無統計學意義(P>0.05)。Ⅳ期觀察組與對照組差異有統計學意義(P<0.05)。化療后，Ⅲ期、Ⅳ期觀察組與對照組比較血清CEA、CY211水平差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同分期化療前后血清CEA、CY211水平比較

3 討 論

目前對kaiso蛋白在NSCLC方面研究甚少，化療藥物對其治療進程的影響研究也少有報道。但已經證實kaiso蛋白擁有雙重DNA綁定識別轉錄抑制因子，且與眾多腫瘤相關基因啟動因子有關，參與Wnt/β-catenin通路調節，與惡性腫瘤的發生發展有關〔4～7〕。Dai等〔6〕研究發現，kaiso蛋白在肺癌細胞質中呈現63.61%較高表達，在TNM高分期及淋巴轉移的癌細胞中陽性率更高，增強了肺癌細胞增殖和侵襲能力，還發現kaiso蛋白細胞核表達癌細胞在生物學功能上與細胞質表達發揮相反的作用。梁鍵等〔7〕研究發現,p120可能與kaiso蛋白共同異位表達在細胞質中，且通過kaiso蛋白解除靶基因的抑制作用，從而促進matrilysin的表達參與肺癌的發生進程。

本研究結果說明kaiso蛋白陽性表達組的患者對治療后效果較差，且kaiso蛋白的細胞質是否陽性表達在不同肺癌病理條件下，對血清CEA、CY211沒有明顯影響。與王寶等〔8〕研究結果相一致。本研究結果還說明kaiso蛋白細胞漿的陽性表達影響了患者對化療藥物的作用，可能降低了患者對化療藥物的敏感性，降低了化療藥物的有效性。

綜上，吉西他濱聯合順鉑對kaiso蛋白漿表達的NSCLC患者，治療后kaiso蛋白細胞漿陽性表達的患者治療效果降低，病理類型對治療前后血清中CEA、CY211水平基本沒有影響，但在病理分期中，對Ⅳ期患者影響較大，降低了患者對藥物的敏感性及治愈率，但其他治療方案對其影響是否一致，仍需要繼續研究。