異煙肼糖漿劑的制備及穩定性研究

蔣梅香，毛群芳，陳雙華，邱艷明，唐 婷

(湖南中醫藥高等專科學校藥學系，湖南 株洲 412012)

異煙肼對結核桿菌有強大的抑制和殺滅作用，是WHO推薦兒童結核病治療的一線藥物，推薦兒童使用劑量范圍為7～15mg/kg，最大劑量300mg/d[1]，但是國內缺乏適合兒童服用的易控制劑量、易吞咽的劑型[2]，如異煙肼糖漿劑。由于異煙肼結構中含有酰肼基，受光、熱、pH等影響易分解，所以根據預試驗結果，本實驗以單糖漿為矯味劑，山梨醇為穩定劑[3]，苯甲酸鈉為防腐劑，鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉為緩沖鹽，以85%(g/mL)單糖漿和異煙肼水溶液采用混合法制備異煙肼糖漿劑1(pH值7.04)和2(pH值5.47)，然后采用強化試驗(高溫、強光)和室溫[4]、2～8℃[5]試驗對異煙肼糖漿劑1、2的穩定性進行考察，探討各因素對異煙肼糖漿劑穩定性的影響。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Mettler AE240型萬分之一分析天平(梅特勒，瑞士)；雷磁PHS-3E型pH計(上海儀電科學儀器股份有限公司)；島津LC-20AT型高效液相色譜儀(Shimadzu，日本)；附溫比重瓶(上海市崇明建設玻璃儀器廠有限公司，25mL)。

1.2 試藥

異煙肼標準品(河南省萬佳首化生物科技有限公司，批號ED00936，HPLC≧99%)；異煙肼原料藥(武漢拉那白醫藥化工有限公司，批號190712)；山梨醇(廣西南寧化學制藥有限責任公司)；苯甲酸鈉(湖南爾康制藥股份有限公司)；蔗糖(湖南爾康制藥股份有限公司)；鄰苯二甲酸氫鉀(上海豪申化學試劑有限公司)；氫氧化鈉(天津市恒興化學試劑制造有限公司)；甲醇為色譜純；水為去離子水。

2 方法

2.1 異煙肼糖漿劑的制備

按照預試驗結果取異煙肼10g加水100mL溶解，再加山梨醇60g、苯甲酸鈉2g、85%(g/mL)單糖漿706mL(pH值=7.66)，攪拌均勻，最后加水至1000mL，得淡黃色的澄清透明的60%(g/mL)異煙肼糖漿劑1(規格：10mg/mL)。異煙肼糖漿劑1用雷磁PHS-3E型pH計測得pH值為7.04，用附溫比重瓶測得25℃時相對密度為1.231。

另取異煙肼10g加水100mL溶解，再加山梨醇60g、苯甲酸鈉2g、85%(g/mL)單糖漿706mL，攪拌均勻，加鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉緩沖鹽溶液(pH值=5.0)100mL，最后加水至1000mL，得淡黃色的澄清透明的60%(g/mL)異煙肼糖漿劑2(規格：10mg/mL)。異煙肼糖漿劑2用pH計測得pH值為5.47，用附溫比重瓶測得25℃時相對密度為1.250。

2.2 糖漿劑中異煙肼含量的測定

取0.104mg/mL異煙肼對照品水溶液進行HPLC分析，采用DiamonsilC18(2)色譜柱(4.6mm×250mm，5.0μm)，柱溫30℃，進樣量10μL，流動相：甲醇-水(55:45)[5]，流速1.0mL/min等度洗脫10min；DAD檢測器全波長掃描，顯示在262nm處有最大吸收波長。

配制0.0209、0.0417、0.0626、0.0835、0.1044、0.1565、0.2087mg/mL的7個不同濃度異煙肼對照品溶液進行HPLC分析(進樣量10μl)，以異煙肼進樣質量(μg)為橫坐標X，峰面積為縱坐標Y、進行線性回歸，得回歸方程為Y=1807292X-166107，R2=0.9994，結果表明異煙肼在0.209～2.087μg區間內線性關系良好。

2.3 高溫對異煙肼糖漿劑的影響

分別取異煙肼糖漿劑1、2各100mL分裝于2個棕色藥瓶中，置于40℃的環境中，于第0、5、10天分別取樣進高效液相測定含量，同時觀察其顏色變化。如果在40℃時含量沒有出現明顯變化，則在60℃的環境中按照上述方法進行實驗。

2.4

強光對異煙肼糖漿劑的影響分別取異煙肼糖漿劑1、2各100mL裝于2個白色藥瓶中，室溫25℃，置于光照強度為(4500±500)Lx的環境中，于第0、5、10天分別取樣進高效液相測定含量，同時觀察其顏色變化。

2.5

pH值對異煙肼糖漿劑的影響由于異煙肼結構中含有酰肼基，在中性或堿性溶液中易分解，光、熱、氧等加速其分解。預試驗顯示異煙肼水溶液在pH值4.5-5.5間較穩定，所以本次穩定性研究時制備了2個pH值不同的異煙肼糖漿劑，即異煙肼糖漿劑1(pH值7.04)和2(pH值5.47)平行進行高溫和強光試驗，考察pH值對異煙肼糖漿劑的影響。

2.6

室溫和2-8℃對異煙肼糖漿劑的影響根據pH值對異煙肼糖漿劑的穩定性試驗結果，選擇較穩定的異煙肼糖漿劑再進一步考察保存溫度(室溫和2-8℃)對異煙肼糖漿劑的影響。

3 結果

3.1 高溫對異煙肼糖漿劑的影響見表1、圖1。

圖1 高溫對異煙肼糖漿劑含量的影響

表1 高溫、強光試驗結果

在溫度為40℃的條件下，異煙肼糖漿劑1、2的顏色均略有加深，異煙肼糖漿劑1(pH值=7.04)的含量在第5天與第0天相比較下降了7.65%，第10天與第0天相比較下降了13.25%；異煙肼糖漿劑2(pH值=5.47)的含量在第5天與第0天相比較下降了4.49%，第10天與第0天相比較下降了8.58%；這說明高溫會使異煙肼分解加速，大大降低異煙肼糖漿劑1、2中異煙肼的含量，所以異煙肼糖漿劑應避免高溫保存。

3.2 強光對異煙肼糖漿劑的影響見表1、圖2

圖2 強光對異煙肼糖漿劑含量的影響

在上述強光的照射下，異煙肼糖漿劑1、2的顏色均略有加深，異煙肼糖漿劑1(pH值=7.04)的含量在第5天與第0天相比較下降了6.66%，第10天與第0天相比較下降了10.58%；異煙肼糖漿劑2(pH值=5.47)的含量在第5天與第0天相比較下降了3.62%，第10天與第0天相比較下降了6.49%；這說明強光也會使異煙肼分解加速，大大降低了異煙肼糖漿劑1、2中異煙肼的含量，故應將異煙肼糖漿劑保存在避光的環境中。

3.3 pH值對異煙肼糖漿劑的影響見表1、圖1、圖2

在上述高溫和強光條件下，異煙肼糖漿劑1、2的顏色均略有加深，但異煙肼糖漿劑2(pH值=5.47)的含量無論是第5天、還是第10天下降的速度都比異煙肼糖漿劑1(pH值=7.04)含量下降的速度慢。如高溫40℃時，異煙肼糖漿劑1第10天含量下降13.25%；而異煙肼糖漿劑2第10天含量下降8.58%；強光照射時，異煙肼糖漿劑1第10天含量下降10.58%；而異煙肼糖漿劑2第10天含量下降6.49%。這說明在pH值=5.47時，異煙肼糖漿劑比在pH值=7.04時更穩定。故應在制備異煙肼糖漿劑時將pH值調至5.47較好。

3.4 室溫和2～8℃保存對異煙肼糖漿劑的影響表2、圖3

圖3 室溫和2～8℃保存對異煙肼糖漿劑的影響

表2 室溫和2～8℃實驗結果

異煙肼糖漿劑2(pH值=5.47)在室溫保存的含量在第5天與第0天相比較下降了3.35%，第10天與第0天相比較下降了5.63%；異煙肼糖漿劑2在2～8℃保存的含量在第5天、第10天與第0天相比較幾乎無變化；說明異煙肼糖漿劑2(pH值=5.47)在2～8℃保存更穩定。

4 討論

本文對異煙肼糖漿劑的穩定性進行了考察，結果顯示高溫時，異煙肼糖漿劑1和2的含量在第10天時出現13.25%和8.58%的大幅下降，這是因為異煙肼結構中含酰肼基不穩定，也說明高溫會使異煙肼分解加速，所以異煙肼糖漿劑應避免高溫貯存。在強光照射下，異煙肼糖漿劑1和2的含量在第10天時出現10.58%和6.49%的下降，下降幅度雖比高溫條件略低，但含量下降仍然較多，說明強光也會影響異煙肼的穩定性，所以異煙肼糖漿劑應密封、避光貯存。在上述高溫和強光條件下，異煙肼糖漿劑2(pH值=5.47)的含量下降速度均比異煙肼糖漿劑1(pH值=7.04)慢，說明將異煙肼糖漿劑的pH值調至5.47可使其更穩定，所以異煙肼糖漿劑在制備時應調節pH值至穩定pH。進行第二步實驗，在室溫條件下，異煙肼糖漿劑2中異煙肼含量在第10天出現5.63%的下降；2～8℃條件下，異煙肼糖漿劑2中異煙肼的含量在第5天、第10天與第0天相比較幾乎無變化。綜合以上實驗結果，異煙肼糖漿劑應調節pH值至穩定pH，密封避光、冷處(2～8℃)貯存。