蛋氨酸鉻對熱應激條件下肉雞免疫應答的影響

王 會

（棗莊市畜牧漁業技術推廣中心，山東棗莊 277800）

高溫應激是家禽業非常關注的問題，嚴重的熱應激對飼料轉化效率、生長性能具有不利影響。李玉保等（2005）研究證實，高溫環境可影響雞的特異性免疫反應。鉻在三大營養物質（碳水化合物、脂肪和蛋白質）代謝方面起重要作用，因為它是葡萄糖耐受因子的成分，可以增強胰島素功能。應激和疾病會增加尿中鉻的排泄量，并可能加劇邊際鉻缺乏癥，而補充鉻在減少應激副作用、降低皮質醇水平和提高免疫力方面有效（徐熔澤，2017）。通常這些因素在提高生長性能中十分重要。目前針對家禽鉻的適宜添加水平研究有限，同時大多數家禽飼料基本上是由植物源成分組成的，通常鉻含量很低。蛋氨酸鉻是一種新發現的有機鉻源，其生物利用度和作用在肉雞中報道較少。因此，本研究旨在探討不同濃度的蛋氨酸鉻對熱應激肉雞免疫反應的影響。

1 材料與方法

1.1 動物分組與日糧 將剛孵化的288 只體重接近的雄性肉雞隨機分為4 組，每組4 個重復，每個重復18 只。各組日糧分別以蛋氨酸鉻（1000 mg 鉻/kg）的形式在基礎日糧（表1）中添加0、0.2、0.4 和0.8 mg/kg 鉻。試驗日糧為粉料形式，分為1 ～21 d 和22 ～42 d 兩階段進行。

表1 1 ～42 d 肉雞日糧組成及營養水平

分別于出生后第4 天和第13 天口服傳染性支氣管炎活疫苗。所有雛雞均于出生后第9 天肌內接種新城疫滅活疫苗。

1.2 樣品采集與分析 在試驗中期（21 d）和試驗結束時（42 d），每個重復選擇平均體重接近的2只肉雞，通過翅下靜脈采集血5 mL（使用EDTA作為抗凝血劑），樣品以3500 g 離心15 min，分離血漿用于測定新城疫和傳染性支氣管炎病毒的抗體效價。利用血凝抑制試驗評估新城疫病毒抗體滴度，并以2 為對數底數表示。用ELISA 法測定傳染性支氣管炎病毒抗體效價。

血液涂片使用May-Greenwald-Giemsa 染色，異嗜細胞與淋巴細胞的比例以總共100 個細胞 為 基 礎（Gross 和Siegel，1983）。用ELISA 試劑盒測定血漿皮質醇濃度，OD 值設為450 nm，根據試劑盒公司建議的標準曲線計算皮質醇濃度（mg/mL）。在試驗結束時（42 d），每個重復隨機選擇2 只肉雞進行屠宰，收集脾臟和法氏囊，稱重，以其與活體肉雞體重比值來表示相對重量。

1.3 統計分析 數據分析采用SAS 軟件完全隨機設計的方差分析程序，采用Duncan’s 法進行多重比較，P ＜0.05 表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 蛋氨酸鉻對肉雞抗體滴度的影響 由表2可 知，0.8 mg/kg 鉻 組21 和42 d 肉 雞 血 液 新 城疫抗體滴度較對照組分別顯著提高43.98% 和46.10%（P ＜0.05），同時21 d 肉雞傳染性支氣管炎抗體滴度顯著提高35.76%（P ＜0.05），各組42 d 肉雞傳染性支氣管炎抗體滴度無顯著影響（P ＞0.05）。此外，對照組肉雞在21 d 血漿皮質醇濃度較其他組分別提高15.90%、20.85% 和24.45%（P ＜0.05），同時對照組肉雞在42 d 時，血漿皮質醇濃度較0.4 和0.8 mg/kg 鉻組顯著提高13.02% 和18.68%（P ＜0.05）。

2.2 蛋氨酸鉻對肉雞淋巴細胞數量的影響由 表3 可 知，0.4 和0.8 mg/kg 鉻 組21 d 淋 巴 細胞數量較對照組顯著提高8.87% 和12.37%（P＜0.05），但嗜異細胞與淋巴細胞比值顯著降低22.73% 和25.76%（P ＜0.05）。 各 組 肉 雞 在21 日齡時血液嗜異細胞數量無顯著影響（P ＞0.05）。0.8 mg/kg 鉻組42 d 嗜異細胞數量及嗜異細胞與淋巴細胞比值最低（P ＜0.05），但血液淋巴細胞數量最高（P ＜0.05）。

2.3 蛋氨酸鉻對肉雞淋巴器官相對重量的影響從表4 可知，各組肉雞法氏囊和脾臟相對重量無顯著差異（P ＞0.05）。

3 討論

本研究發現，各處理組肉雞在21 和42 d 時兩種病毒抗體滴度（新城疫和傳染性支氣管炎）高于對照組。據報道，在高溫應激下，以氯化鉻或酵母鉻的形式補充2 或10 mg/kg 的鉻可以提高肉雞對新城疫的抗體滴度（Guo 等，1999），同時Lee等（2003）也報道了以吡啶甲酸鉻的形式補充0.4 mg/kg 鉻可以提高肉雞新城疫的抗體效價。本試驗研究結果均與這些研究結果一致。但也有一些關于補充鉻對血清皮質醇水平無顯著影響的報道（Pollard 等，2002）。

表2 日糧添加不同水平蛋氨酸鉻對肉雞抗體滴度的影響

表3 日糧添加不同水平蛋氨酸鉻對肉雞嗜異細胞與淋巴細胞數量的影響

表4 日糧添加不同水平蛋氨酸鉻對肉雞淋巴器官相對重量的影響 %

各種應激源如寒冷應激、短暫暴露于高溫、隔離和運輸等會增加血漿皮質醇濃度，而吡啶甲酸鉻中高濃度的鉻可以直接抑制激動劑，刺激腎上腺皮質細胞系中的皮質醇分泌（Kim 等，2006）。熱應激條件下雛雞抗體產生量下降，這種減少可能是由于應激下炎癥細胞因子的增加間接導致的，因為炎癥細胞因子可以通過刺激下丘腦產生促腎上腺皮質激素釋放因子，后者可增加垂體分泌促腎上腺皮質激素，后者可以刺激腎上腺產生皮質酮，而皮質酮可以抑制抗體的產生（Gross 和Sigel，1992）。

在本研究中，0.8 mg/kg 鉻增加了淋巴細胞計數，降低了嗜異細胞與淋巴細胞比值，嗜異細胞與淋巴細胞比值是確定家禽應激的一個重要指標，因此，本研究結果說明了鉻緩解了肉雞的熱應激。鉻增強免疫系統的確切機制尚不清楚。但本研究發現，日糧添加鉻降低了血漿皮質醇水平。皮質醇是最重要的糖皮質激素，具有免疫抑制作用，抑制抗體、淋巴細胞功能和白細胞群的產生和作用。日糧補充蛋氨酸鉻對肉雞淋巴器官相對重量無顯著影響。Toghyani 等（2007）報道，在熱應激條件下，肉雞日糧中以吡啶甲酸鉻的形式補充鉻后，淋巴器官相對重量無顯著影響，但未補充鉻的試驗組淋巴器官重量有所下降，其推測可能是由于熱應激條件下采食量的減少，降低了營養物質的供應。

4 結論

總的來說，肉雞日糧以蛋氨酸鉻的形式補充0.8 mg/kg 鉻可以改善熱應激條件下肉雞的免疫反應，但后續研究需進一步評估蛋氨酸鉻對不同飼養條件下肉雞生長性能和免疫反應的影響。