血培養雙側雙瓶送檢對病原菌和污染菌判斷的應用價值探討

古旭東 薛春玲 羅科城

（河源市人民醫院檢驗科 廣東 河源 517000）

血培養是臨床上診斷血流微生物感染的關鍵性指標，也是重癥感染、敗血癥等病癥確診的常用實驗室檢測技術。血培養陽性樣本內微生物的檢測數據是臨床疾病診斷的參考性參數，會對醫生的診斷產生極大影響，并因此影響患者治療效果[1]。通常來說，能夠由血培養內進行分離，并因此獲得真正菌血癥或真菌血癥的病原菌。但是在實際檢測過程中，血培養污染菌的比重相對較大，這就會使得實驗室檢測的成本提升，極大地影響診斷質量。凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）是臨床上一種常見的病原菌，可是因為其是皮膚的正常菌群，在采樣期間，被污染的幾率相對較高，因此也是一種出現幾率相對較高的血培養污染菌。現今，學界并未研究出有效的方法來鑒別CNS 是否為致病菌，或是污染菌[2]。鑒于此，本研究以本院近12 個月內血培養病原菌為例，采取回顧性分析的方式，分析污染菌有關實驗檢測技術的可實施性與實際運用效果。

1.資料與方法

1.1 一般資料

標本血培養選自2018 年某醫科大學住院患者。

1.2 儀器

山東鑫科LABSTAREX 自動血液細菌培養儀及配套血瓶，梅里埃BACT/ALERT3D60 自動血液細菌培養儀，MicroScanWalkAway96全自動細菌鑒定/藥敏測試系統及配套上機板。質控菌株：ATCC25922 大腸埃希菌；ATCC27853 銅綠假單胞菌；ATCC25923 金黃色葡萄球菌；ATCC29212 糞腸球菌等[3]。

1.3 方法

1.3.1 標本采集與處理 在無菌條件下獲得血樣本之后，要及時將其注至血培養瓶內，并進行編號，在血培養儀中完成培養處理，培養瓶中微生物會進行生長代謝，并且代謝后的CO2會充斥培養基內，和含熒光染料的感應器之間會產生反應，導致其中的熒光物質出現相應變化，并產生熒光現象，若是設備的光源檢測到這種現象，就能夠根據相關運算方法，判斷是否達到陽性培養標準，若是達到標準，就自動觸發陽性警報。

1.3.2 雙側雙瓶定義 雙側雙瓶系指由一個位置采血，并且將其接種到一套培養瓶內，之后由另一位置進行采血處理，并將其接種到另一套培養瓶內，也就是說，一套血培養的構成包括需氧瓶及厭氧瓶各一個。

1.3.3 疑似污染定義 依照CLSI-M47-A 中相關標準可知，若是檢測出對血培養污染的微生物，就應該聯系臨床醫師，基于患者的體溫、WBC 水平及感染有關癥狀等信息，有效分析疑似污染菌的可能性。

1.3.4 病原菌鑒定 陽性標本，若是出現陽性報警，就要立即在血瓊脂平板、中國藍平板以及巧克力平板上進行接種，還要進行涂片行革蘭氏染色、鏡檢等處理，詳細記錄涂片數據，運用菌株，嚴格根據操作流程完成鑒定與藥敏檢測，1d 之后將最終報告的陰性標本發出，并且進行5d 的血培養之后，若是還是陰性結果，就表示沒有細菌生長[4]。

1.3.5 提示污染菌的實驗室技術 根據操作規程進行血培養的采集處理，一些病患以左右臂雙側雙瓶的方式完成采集工作，單瓶報警，檢測之后，分析污染菌的可能性，并在報告中詳細贅述，為臨床醫生的診斷提供可靠數據；雙瓶都在2d 內報警，則顯示導致血流感染的病原菌生長。

2.結果

根據表1 顯示，血培養病原菌檢出率中共檢測血培養標本1000 份，陽性為份109，陽性檢出率為10.90%，其中采用雙側雙瓶采血的血培養標本為90 份，陽性為21 份，陽性檢出率為23.33%。見表1。

表1 單、雙側瓶血培養陽性檢出率結果的對比

3.討論

血培養是敗血癥等判斷的關鍵性方式及診斷技術，如今，血流感染是醫療機構內感染及病患死亡的常見原因，血流感染測定需求也呈現出較為明顯的提升趨勢[5]。如今，全自動血培養儀等設備已經得到廣泛運用，血培養陽性率也逐漸提升。本組1000 份血培養病例中，奠定病原菌共109 株，檢出率是12.23%。根據相關報道可知，血培養陽性樣本內病原微生物包括大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌等，并且在醫療機構中并不存在空間及時間上的集中分布特點，這就表明院內感染的可能性相對較小。

如今臨床上往往針對住院患者及危重癥病患廣泛運用廣譜抗生素，再加上常常運用侵襲性治療方式，這就導致CNS 發生率提升[6]。此外，CNS 同樣是血培養過程中出現幾率最高的污染菌，在血液樣本采集期間，人體皮膚的正常菌群被攜帶的幾率相對較高，這就會使得血培養呈現出陽性的結果；留置導管同樣會使得血培養污染幾率提升；CNS 能夠生成黏滯物，并因此于醫療設備的表層產生生物膜，若是不能科學地開展消毒工作，血標本污染幾率也會顯著提升。所以，研究出一種科學、有效的技術，判斷CNS 屬于致病菌還是污染菌非常重要。本研究的樣本數量為1000 份，其中21 份的最終檢查結果是病原菌，而接受雙側雙瓶血液樣本采集的樣本共90 份，因此檢出率是23.33%，明顯高于單瓶血培養樣本。陽性血培養內，凝固酶陰性葡萄球菌檢出率為22.7%，而單瓶報警檢出率為18.1%，相對于雙瓶報警方式而言明顯較高，而若是采取雙臂血液樣本采集的方式，若是陽性結果中僅有一瓶樣本，而另一瓶樣本5d 的時間內都沒有發現細菌存在的現象，這就表明單瓶血培養內測定的CNS 結果,有很大概率是樣本采集等操作內所產生的污染菌，因此臨床工作者務必聯系病患的實際癥狀展開評估，還要依照現有資料進行分析。此外，針對血培養報警時長進行分析，能夠為診斷結果提供一定參考，這是因為菌血癥的陽性報警時間若是明顯短于污染現象，通常都會引發48h 內血培養陽性報警的事件，若是報警事件超出48h，那么極有可能就是污染菌，但是此種判斷方式僅在排除真菌性菌血癥之后具備一定參考性[7]。

怎樣提升血培養陽性率，使得實驗室報告的準確率以及效率得到提升，是當前學界關注的重點問題。現今，鑒定致病菌與污染菌的檢測技術并不完善，如果運用全套的實驗室檢測技術針對污染菌展開檢驗，會使得實驗室檢驗員的工作量加重，并且會顯著提升經濟成本，所以，應該運用科學的檢測技術，并且結合患者的實際情況進行系統性評估[8]。運用雙側雙瓶的樣本采集方式，并且在48h 內完成陽性報警的鑒定任務，構建科學的血培養三級報告機制，是一種較為科學且便捷的檢測技術，具備較大的可行性，易推廣[9]。可是，單單憑借上述兩點來確診CNS 菌血癥，可信度相對較低，并且根據有關報道可知，48h內血培養陽性的樣本中包括35.8%的污染菌，并且48h 之后均為污染菌。所以，CNS 菌血癥務必結合臨床、流行病學與微生物學等信息及資料進行診斷[10]。

終上所述，雙側雙瓶樣本采集技術能夠使得陽性檢出率及污染菌判斷的準確性明顯優化，提升實驗室檢測數據的正確性，為患者的臨床治療提供有效保障。