IL-2受體與慢性乙型肝炎肝組織病理學的相關性分析

汪 濤， 蔣元燁， 王學偉， 高靜靜， 曹 勤

上海中醫藥大學附屬普陀醫院 消化內科， 上海 200062

HBV是一種小型的、有包膜的部分雙鏈DNA病毒。最新研究[1]發現，全球有2.57億人感染HBV，占全球人口的3.5%；我國有9300萬慢性HBV感染者，約2300萬慢性乙型肝炎(CHB)患者。盡管我國實施了以預防為主的綜合性防控策略，并取得了舉世矚目的成效，然而由于地區差異、篩查、診斷及管理系統的不完善，導致我國公民對HBV普遍認識不足[2]。肝臟持續的炎癥是各種肝臟疾病中肝損傷和纖維化的關鍵觸發因素，最終導致肝硬化形成[3]。肝纖維化是一種世界范圍內高發病率和高死亡率的疾病[4]，而廣泛的肝損傷、病毒性肝炎等最終會加重肝纖維化，從而導致肝硬化與肝細胞癌。因此，及時準確地判斷CHB患者肝臟炎癥及纖維化嚴重程度，對此類患者的防治及預后評價具有重要意義。

白細胞介素-2受體(interleukin-2 receptor，IL-2R)主要由活化的輔助性T淋巴細胞分泌，并在活化的T淋巴細胞、調節性T淋巴細胞、B淋巴細胞和單核細胞廣泛表達[5]。眾多研究發現，在慢性肝病中，IL-2R水平明顯升高，這一方面可能是因為IL-2R與循環單核細胞密切相關，而研究[6]發現從外周循環中滲入受損肝臟的單核細胞是肝纖維化進展的重要致病因素，具有明顯的促炎和促纖維化作用；另一方面，IL-2R能中和活化T淋巴細胞周圍的 IL-2，使 IL-2不能發揮作用[7]，而IL-2已被證明是調節肝臟免疫穩態的重要因子[8]。本文通過觀察經肝活檢明確診斷的CHB患者中IL的表達情況，闡述IL在CHB中的價值和意義，為肝臟炎癥和纖維化損傷程度的輔助判斷提供新的思路和臨床依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2018年2月-2019年2月于本院確診的CHB患者，臨床診斷參照《慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)》[9]，所有的患者均未進行過抗病毒治療；排除合并藥物性肝病、酒精性肝病、慢性丙型肝炎、慢性丁型肝炎、自身免疫性肝病、原發性膽汁性膽管炎等其他肝臟疾病以及已經確診為肝硬化、肝衰竭、肝癌的患者。所有患者均無血液系統疾病，并且近1個月內無輸血史。

1.2 研究方法 肝活檢采用1 s肝穿刺法，在彩色多普勒超聲引導下，用一次性活檢針(16G)進行?；顧z長度為1.5 cm或更長，或肝臟切片包含至少五條門靜脈束，被認為符合診斷條件。標本用10%福爾馬林固定，酒精脫水，常規組織切片，HE染色，用光學顯微鏡多視野觀察進行組織學炎癥分級(grading, G) 和肝纖維化分期(staging, S)。由兩位病理醫師集中進行雙盲法閱片，若意見不一致，重復閱片，至達成一致。肝臟炎癥分級和纖維化分期參照《慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)》[9]。穿刺的目的是基于病情評估和臨床診斷的需要，所有患者在進行肝活檢前均簽署知情同意書。依據肝臟炎癥活動程度分為輕度炎癥組(G1～G2)和重度炎癥組(G3～G4)；依據肝纖維化程度分為輕度纖維化組(S0～S2)和重度纖維化組(S3～S4)。

1.3 觀察指標 肝穿刺前后 1周內早晨空腹采血，所有患者在夜間禁食后采集血樣。用自動臨床化學分析儀(日本日立7600D-210)分析血清ALT、AST、GGT、ALP、TBil、DBil、TG、TC、HDL、LDL、IL-2R、IL-10、IL-6、IL-8水平。

1.4 倫理學審查 本研究通過了上海中醫藥大學附屬普陀醫院倫理委員會審核(批號：PTEC-A-2018-49-1)，所納入患者均簽署知情同意書。

2 結果

2.1 一般資料 共納入59例CHB患者，輕度炎癥(G1～G2)患者35例，重度炎癥(G3～G4)患者24例；輕度纖維化(S0～S2)患者46例，重度纖維化(S3～S4)患者13例。比較發現，性別、年齡在不同肝臟炎癥及纖維化嚴重程度間，差異均無統計學意義(P值均>0.05)(表1)。

2.2 肝臟炎癥程度與纖維化的相關性 Spearman相關分析顯示，肝纖維化分期與炎癥程度呈正相關，即肝纖維化程度隨肝臟組織炎癥程度增加而加重(rs=0.538，P<0.001)。

2.3 血清生化指標在不同肝臟炎癥及纖維化程度組間比較 血清ALT、AST、GGT水平在重度炎癥組均高于輕度炎癥組，差異均有統計學意義(P值均<0.05)，而血清Cr、LDL、ALP、TBil、DBil、TG、TC、HDL在2組之間比較，差異均無統計學意義(P值均>0.05)。血清HDL在重度纖維化組低于輕度纖維化組，差異有統計學意義(P<0.05)，而血清ALT、AST、GGT、Cr、LDL、ALP、TBil、DBil、TG和TC等在2組間比較，差異均無統計學意義(P值均>0.05)(表1)。

2.4 IL水平在不同肝臟炎癥及纖維化程度組間的比較

表2顯示，血清IL-2R水平在重度炎癥組高于輕度炎癥組，重度纖維化組高于輕度纖維化組，差異均有統計學意義(P值均<0.01)，而血清IL-6、IL-8及IL-10在不同肝臟炎癥及纖維化嚴重程度組間比較，差異均無統計學意義(P值均>0.05)。

3 討論

本研究表明年齡、性別在不同肝臟炎癥及纖維化嚴重程度之間差異無統計學意義，這與文獻[10]報道一致。然而，也有文獻[11]報道，隨著年齡增加，肝臟炎癥及纖維化程度逐漸增加。此外，關于性別與CHB患者肝臟炎癥及纖維化程度是否有聯系，目前尚無法做出準確判斷。Hsu等[12]發現，老年人與男性CHB患者具有較高的肝臟炎癥及纖維化可能;Xiong等[13]則發現絕經后女性(尤其是50歲以后)與同齡男性相比具有更高的肝纖維化風險。由此可見，性別與年齡對肝臟炎癥及纖維化嚴重程度是否有影響尚有爭議。出現此種差異可能與樣本量的大小、地域差異、遺傳等因素有關，因此尚需大樣本量進行佐證。

本研究表明，ALT、AST、GGT在不同肝臟炎癥程度間差異有統計學意義，而Cr、LDL、ALP、TBil、DBil、TG、TC則無明顯差異。肝功能指標是臨床上診斷和評估肝損傷的直接標志物，如ALT和AST在評估肝功能中發揮著極其重要的作用。本研究發現，隨著肝臟炎癥程度的增加，ALT、AST水平逐漸上升，此結果與文獻[14]報道一致。然而，也有研究者[15]指出，血清ALT水平與肝臟炎癥及纖維化程度之間無明顯關系，甚至輕度ALT升高的患者也可發生明顯肝纖維化。因此，臨床上僅憑血清ALT和AST水平并不能準確判斷肝組織炎癥及纖維化程度。此外，本研究發現，隨著纖維化程度加重，HDL水平下降，此結果與Chen等[16]結果一致。此外，有研究[17]稱TBil與肝纖維化程度呈正相關，IBil尤其明顯。然而，本研究發現膽紅素水平在不同肝纖維化程度之間無差異，與Millonig等[18]研究結果相符。血清膽堿酯酶已被用于肝硬化患者肝臟儲備功能的評價,但很少有文獻探討它是否可用于肝纖維化程度的預測[19]。綜上，可以發現，多種血清指標與肝臟炎癥及纖維化程度密切相關，然而，肝臟炎癥及纖維化進展受多種因素影響，其血清指標靈敏度及特異度還有待考察。因此，仍需更大樣本量、更多臨床數據進行驗證。

表1 患者基本特征及生化指標在不同肝臟炎癥及纖維化程度組間的比較

表2 不同肝臟炎癥及纖維化程度組IL水平比較

本研究發現，肝臟炎癥隨著肝纖維化程度加重而加重。慢性肝炎肝組織炎癥分級代表了肝臟當前損傷和肝炎活動情況，而肝纖維化分期說明了肝臟的累積損傷情況。因此，肝臟炎癥程度與肝纖維化分期及進展的準確判斷是指導治療及判斷預后的關鍵。

有報道，血清IL-2R升高已被作為病毒性肝炎或原發性膽汁性膽管炎的無創指標之一[6]，然而，目前缺乏關于血清IL-2R在肝臟炎癥及纖維化中的研究[9]。本研究結果顯示，隨著炎癥和纖維化程度增高，血清IL-2R表達水平也越高,這與諸多研究[5,20]報道一致。Deng等[5]認為，血清IL-2R是肝臟炎癥與纖維化發生的獨立危險因子，并且認為IL-2R聯合TGFα的指數得分優于APRI和FIB-4指數。Seidler等[21]推測，血清IL-2R可能是肝臟炎癥細胞活化和疾病嚴重程度的一個評價指標，強調血清IL-2R與肝臟炎癥程度進展相關，可作為一種非侵入性的疾病嚴重程度分級工具。本研究結果發現，IL-6、IL-8、IL-10在不同肝臟炎癥及纖維化程度組間無統計學差異。而文獻[22]報道高水平IL-6可能反映更嚴重的肝臟炎癥及纖維化程度，但也有文獻[23]報道并未發現這種相關性。有研究[24]顯示，血清和肝組織中IL-8的表達與肝臟炎癥和纖維化程度密切相關，即隨著肝臟炎癥及纖維化程度的加重，IL-8水平逐漸升高。Suh等[25]發現，IL-10通過抑制肝星狀細胞活化來減輕肝纖維化。然而，也有學者[26]認為，IL-10表達增加是引起CHB患者肝臟炎癥加重的因素之一。研究結果的不同可能受被研究者的種群、血清中代謝組學成分，以及試驗方案的不同、試驗儀器等主觀及客觀因素的影響。因此可能需要更多的前瞻性、多中心和多人群的研究數據來進一步明確。

目前，肝活檢仍然是判斷肝臟炎癥分級及纖維化分期的“金標準”，但作為一種創傷性檢查，尚有其局限性。本研究發現IL-2R表達水平隨著肝臟炎癥及纖維化加重而上升，可能是疾病預后和進展的重要指標,對了解慢性肝炎的炎癥及纖維化程度、指導治療、評估預后及防止病情進一步惡化有著非常重要的意義，日后可用來作為輔助性預測肝臟炎癥及纖維化損傷的、新型的、潛在的血清學標志物，從而為臨床醫生更好地判斷患者肝臟炎癥及纖維化程度提供參考依據。

利益沖突聲明：本研究不存在研究者、倫理委員會成員、受試者監護人以及與公開研究成果有關的利益沖突，特此聲明。

作者貢獻聲明：汪濤負責資料分析、撰寫論文；高靜靜負責收集數據；王學偉、蔣元燁、曹勤負責擬定寫作思路，指導撰寫并最后定稿。